人il-6检测试剂盒(elisa法)说明书

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1、人IL-6检测试剂盒(ELISA法)说明书【产品名称】人IL-6检测试剂盒(ELISA法)【包装规格】96T/盒【预期用途】本试剂盒仅供科研使用,可用于人血清、人血浆、细胞上清液及相关液体样本中IL-6的含量测定,不适合用于临床检测。【IL-6简介】白细胞介素是由多种细胞产生并作用于多种细胞的一类细胞因子,而白细胞介素-6(IL-6),属于白细胞介素家族中的一员。根据来源不同,IL-6是分子量从21-28kDa不同的单链蛋白,在多种细胞中都有表达,如T细胞、巨噬细胞、纤维原细胞、肝细胞和血管内皮细胞等。作为一种参与多种生理过程的多效性细胞因子,IL-6的生物学活性主要包括6个方

2、面:免疫应答调节、造血系统调节、急性期蛋白诱导、神经内分泌系统调节、肿瘤生长调节和其它。在免疫应答方面,IL-6可以诱导B细胞分化和产生抗体,诱导T细胞表达IL-2受体并产生IL-2,及诱导T细胞增殖和分化。在造血方面,IL-6可以诱导造血干细胞生长和巨核细胞成熟。在神经内分泌方面,IL-6可以诱导神经细胞分化,支持细胞存活,诱导神经内分泌细胞产生活性物质和促进神经系统重建等。在肿瘤生长方面,IL-6可以促进或抑制肿瘤细胞生长,参与多种肿瘤的发生发展过程。此外,IL-6还可以诱导多种急性期蛋白合成和分泌,促进中性粒细胞、角质细胞和肾小球细胞生长分化,调节促肾上腺皮质激素合成,结

3、合乙肝病毒包膜蛋白等。【检验原理】人IL-6检测试剂盒的原理是双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。预先用抗人IL-6捕获抗体包被微孔板,当标准品或待检样本加入微孔板中时,其中的人IL-6即与捕获抗体结合而被吸附在微孔板上,游离的成分则通过洗涤过程被除去。加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗人IL-6检测抗体,该抗体与人IL-6特异性结合而形成夹心的免疫复合物附着在微孔板上。加入酶底物TMB,出现蓝色,颜色的深浅与标准品或样本中IL-6浓度相关。在一定范围内人IL-6浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出样本中IL-6的浓度。【主要组成成分】1、试剂盒组分序号组分规格备

4、注1预包被微孔板(人IL-6抗体)96孔即用型,可拆卸板2标准品(人IL-6)2瓶冻干粉,按说明书进行稀释3ELISA稀释液(人IL-6)14mL×1瓶即用型4酶标抗体(人IL-6)12mL×1瓶即用型5浓缩洗涤液(20×)30mL×1瓶按说明书进行稀释6显色液12mL×1瓶即用型7终止液6mL×1瓶即用型8说明书1份/地址:广东省佛山市佛山新城岭南大道南2号中欧服务中心A1栋1/4电话:4008-819-519网址:www.tbhealthcare.com序号组分规格备注9封板膜3张/注:不同批号试剂盒中各组分不能互换2、需要实验者自行准备的试剂与仪器:•不同规格的移液器及相

5、应的枪头•37℃恒温培养箱•酶标仪(450nm、620~650nm)【储存条件及有效期】•试剂使用前避光密封,保存于2~8℃:有效期6个月。•试剂拆封后避光密封,保存于2~8℃:14天内用完。•生产日期和有效期:见标签。【操作步骤】1、从冰箱中取出试剂盒,再根据检测需要取出相应的板条与试剂(标准品除外),于室温平衡60分钟以上;剩余板条请及时放回自封袋中,并于2~8℃密封保存。2、洗涤液的配制:将浓缩洗涤液用超纯水或双蒸水稀释20倍(即1份加19份水)。3、标准品的配制:取一瓶标准品,按瓶身标签内容提示加入相应体积超纯水(或双蒸水)使IL-6浓度达到10ng/mL,静置5分钟后

6、轻轻混悬使其彻底溶解,用ELISA稀释液依照下图所示进行2倍倍比梯度稀释。稀释后标准品的浓度依次为8ng/mL、4ng/mL、2ng/mL、1ng/mL、0.5ng/mL、0.25ng/mL(此步骤冰上操作)。ELISA稀释液直接作为标准浓度0ng/mL,每个浓度重复2个孔。使用前15-20分钟配制好。10ng/mL母液根据冻干瓶上标签所示加入对应量蒸馏水8ng/mL(6号标准品,S6)320μL的母液加入80μL的ELISA稀释液4ng/mL(5号标准品,S5)200μL的6号标准品加入200μL的ELISA稀释液2ng/mL(4号标准品,S4)200μL的5号标准品加入20

7、0μL的ELISA稀释液1ng/mL(3号标准品,S3)200μL的4号标准品加入200μL的ELISA稀释液0.5ng/mL(2号标准品,S2)200μL的3号标准品加入200μL的ELISA稀释液0.25ng/mL(1号标准品,S1)200μL的2号标准品加入200μL的ELISA稀释液0ng/mL(空白对照)直接加入200μL的ELISA稀释液地址:广东省佛山市佛山新城岭南大道南2号中欧服务中心A1栋2/4电话:4008-819-519网址:www.tbhealthcare.com4、

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