原子力显微镜对甲状腺滤泡性肿瘤细胞膜表面结构的观察

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1、英文缩写英文缩略语英文全称中文全称AFMAtomicForceMicroscope原子力显微镜ScanningSPM扫描探针显微镜ProbeMicroscopeH．EHaematoxylin—Eosin苏木素一伊红染色TgThyroglobulin甲状腺球蛋白thyrotropinreleasing促甲状腺激素释砌hormone放激素thyrotropic—stimulatingTSH促甲状腺激素hormoneT3triiodothyronine三碘甲腺原氨酸T4tetraiodothyronine四碘甲腺原氨酸DNADeoxyribonucleicAcid脱氧核糖核酸r

2、eversfi逆转录多聚链IU'-PCRtranscription-polymerase式反应chainreaction河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应的法律责任。研究生甄勃乃噼翩签名红。红院领导签予舯l。，烀≥月洒研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导

3、下进行的研究-r_fF及取得的研冗成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。1研究生签名：南万霹导师签名：彩纱o√龟△f夕阵；月≯日中文摘要原子力显微镜对甲状腺滤泡性肿瘤细胞膜表面超微结构的观察摘要目的：1、寻找适合原子力显微镜(Atomicforcemicroscopy，AFM)观察甲状腺活体组织细胞标本的最佳制备方法。2、应用AFM观察甲状腺正常滤泡上皮细胞、腺瘤细胞和癌细胞的细胞膜表面超微结构，为甲状腺正常细胞和肿瘤细胞膜表面超微结构积累形态学信息，以期为临床的滤泡性肿

4、瘤的良恶性鉴别诊断提供向导。方法：1、采用实验室常用的细胞提取方法即压片组织细胞法、细胞印片法和酶消化离心涂片法制备适合于AFM观察的活体甲状腺组织细胞样品，对比观察三种方法所制备的细胞样品在光学显微镜和AFM下(Tapping模式)的细胞分散度和图像清晰度，找出适合AFM观察甲状腺活体组织细胞样品的最佳制备方法。2、以甲状腺正常滤泡上皮细胞、腺瘤细胞和癌细胞各300个为研究对象，应用AFM(Tapping模式)对三者进行扫描并采用软件分析系统进行分析，然后利用SPSSl1．5统计分析软件对所测得的三类细胞膜表面平均粗糙度(meailroughness)、平均峰高度(Av

5、erageMaxpeakheight)、平均凹陷深度(AverageMaximumdepth)和表面积差值(surfaceareadifference)进行统计，比较三者是否具有统计学意义。中文摘要结果：1、压片组织细胞法制备的甲状腺细胞样品经H．E染色，视野中可见较多的血液和组织液，大量细胞重叠成片排列。AFM扫描时这些重叠成片的细胞索影响单个细胞的观察，很难呈现出清晰、真实的AFM图像；细胞印片法制备的甲状腺细胞样品经H．E染色，视野中背景较干净，细胞分散度较好，可见较多单个散在的细胞。AFM扫描时，很容易找到单个细胞，杂质较少、干扰较小且成像清晰；酶消化离心涂片法制

6、备的甲状腺细胞样品经H．E染色，视野中细胞背景较杂，出现大量的裸核细胞及少量的细胞团块。AFM扫描时细胞表面的杂质较多、干扰较大，图像极不清晰。2、应用AFM对比观察正常甲状腺滤泡上皮细胞、腺瘤细胞和癌细胞三者的膜表面超微结构，发现正常甲状腺滤泡上皮细胞在扫描范围为20pro时其形状呈圆形，直径10～14啪，而腺瘤细胞和癌细胞形状略不规则，比正常细胞稍大，膜表面较粗糙，但更加微细的结构在此扫描范围还观察不到。随着扫描范围的逐渐缩小，分辨率逐渐增大，细胞膜表面的超微结构也逐渐清晰。尽管三者膜表面均表现为凹凸不平的“山峦样”隆起，但隆起的数量、体积、形态上各有差别。正常甲状腺

7、细胞表面的隆起较光滑，分布均匀、形状规则，排列疏密适中。隆起物平均大小为27．52X36．85nm，Z轴高度平均为32．37nm；腺瘤细胞表面的隆起较正常细胞粗糙，分布不均匀、形状渐不规则，排列开始紊乱。隆起物之间出现裂隙，呈“沟渠状”，裂隙间相互贯通。隆起物平均大小为54．74X41．98rim，Z轴高度平均为51．37nm，裂隙平均深度为-59．71rim；癌细胞的膜表面则更加粗糙，隆起物分中文摘要布更加不均匀、形状极不规则，有的隆起呈“尖刀状”，有的隆起呈“馒头状”，排列已经参差不齐，隆起物之间的裂隙比腺瘤细胞更宽更深，