大黄酚对黄瓜白粉病菌的抑制作用机制的的研究

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1、14111111111111Illlll!llllllllllllllllllUlllalllIIIlll!Y1897566摘要黄瓜白粉病是由SphaerothecafuligineaPoll．引起的一种潜育期短、再侵染频繁、流行性强的叶部病害。目前使用杀菌剂和抗病品种是防治白粉病的重要手段。但随着药剂的大量和长时间使用，各地病原菌对一些药剂产生了不同程度的抗性，防效大幅度降低。因此，开发对瓜类白粉病高效、低毒、低残留的新型杀菌剂是当前研究的一个热点。本论文以游离葸醌类(Anthraquinone)化合物大黄酚(Chrysophan01)为材料，采用室内外生物测定相结合的方法，首先建立了

2、黄瓜白粉病生物测定体系，并研究了大黄酚对黄瓜白粉病菌的保护和治疗生物活性及作用方式；同时对大黄酚进行了剂型加工和田间试验。随后又从组织病理学和超微结构方面研究了大黄酚对黄瓜白粉病菌的作用机制。此外，还研究了大黄酚对黄瓜白粉病菌孢子呼吸代谢的影响，以及寄主体内与植物抗病相关酶基因变化规律。本研究取得了以下主要结果：1．建立了以下针对黄瓜白粉病菌的简便、快速的杀菌剂生测体系：选用对白粉病菌高度感病黄瓜品种新长春密刺，苗龄为5~10d，菌龄10~15d，接种浓度为30-40个孢子／视野(10xlO倍显微镜)的悬浮液，采用子叶喷雾法或叶盘法进行生物测定，曲利苯兰染色后对白粉病菌的整个生长发育阶段

3、进行组织学观察。2．应用子叶喷雾法测试了大黄酚及2种化学药剂对黄瓜白粉病菌(&fuliginea)的保护和治疗生物活性。结果表明，大黄酚能有效降低黄瓜白粉病的病情指数，其保护和治疗作用的ECso分别为33．36ttg／mL和90．101．tg／mL，对照药剂硫磺悬浮剂保护作用的ECso为59．75p．g／mL，苯醚甲环唑可湿性水分散粒剂治疗作用的ECso为13．55pg／mL。3．采用喷雾法分别在黄瓜子叶期和真叶期研究了大黄酚对黄瓜白粉病菌的作用方式及其在寄主组织中的内吸传导性。大黄酚对黄瓜的保护作用具有较长的持效期，在100pg／mL浓度下施药20d后接种白粉病菌，其防效仍达84．83

4、％，与浓度为500ttg／mL的硫磺悬浮剂防效相近。大黄酚在寄主组织中有一定的跨层传导性，横向传导性较弱，几乎没有表现出向顶及向基的传导性。4．将含有47％的大黄酚经剂型加工得到了5％大黄酚悬浮剂，经室内和田间测定，其加工后的悬浮剂对黄瓜白粉病菌的防效优异。在田问69g(a．i)／hm2的使用剂量下防效达到88．9％。5．从组织病理学角度揭示了大黄酚对白粉病菌的整个生长发育阶段进的影响。结果发现，2．4I_tg／mL大黄酚可有效降低黄瓜白粉病菌分生孢子的萌发率和萌发芽管个数，能抑制菌丝的生长并减少新生分生孢子的个数。接种后24h，清水对照萌发率为66．6％，而大黄酚处理后的孢子不萌发；接

5、种后48h，对照茵丝的平均长度为414．7pm，大黄酚处理的菌丝平均长度为40．1ttm；接种后144h，对照的新生分生孢子串最多为8个孢子，大部分为缸7个，而大黄酚处理后新生分生孢子串最多为2个孢子，大部分为1个。接种7d后对照的病情指数为72．2，大黄酚处理组的病情指数仅为2．1，其保护作用防治效果达到97．1％，显著高于50％硫磺悬浮剂65．4％的防效。6．电镜观察发现大黄酚作为保护剂使用时，黄瓜白粉病菌的大部分孢子细胞壁破裂不能萌发侵入寄主，部分分生孢子的萌发受到明显抑制，芽管或菌丝表现畸形，孢子表现皱缩、萌发侵入缓慢。侵染钉被致密乳突包围，少数侵染钉能突破乳突产生畸形的吸器，吸

6、器内原生质电子致密度加深，原生质凝集，吸器中的细胞器逐渐解体成为泡囊，表明吸器即将解体。大黄酚作为治疗剂使用后，白粉病菌大部分萌发的芽管和附着胞畸形或破裂，菌丝顶端肿胀，部分菌丝塌陷、扭曲或断裂、停止发育。大黄酚处理后寄主产生的乳突增多，且结构致密，寄主InhibitivemechanismsofchrysophanolagainstSphaerothecafuligineaCandidate：RenHongminAdvisor：．Prof．KeqiangCaoSl’ecialty：．PesticideScienceAbstractPowderymildew,causedbySphaer

7、othecafuligineaPoll．，isoneofthemostimportantdiseasesoncucumbers．Fungicidesandresistantcultivarsarethemajormeanstocontrolthediseaseoncucumber．However,withintensiveandlong-termuseoffungicides，pathogenshavedevelopedresist