副鸡禽杆菌荚膜多糖提取的分析与免疫原性研究

《副鸡禽杆菌荚膜多糖提取的分析与免疫原性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、ADissertationSubmittedtoHebeiUniversityofEngineeringFortheAcademicDegreeofMasterofEngineeringExtractionandanalysisofAvibacteriumparagallinarumcapsularpolysaccharideandstudyonimmunogenicityCandidate：LuYmgyingSupervisor：Prof．WangXueminandAcademicDegreeAppliedforSpecialtyCollege／Depar

2、tment：AssociateProfiWangHongjunMasterofAgricultureAnimalGenetics，BreedingandReproductionScienceAgriculturalCollegeHebeiUniversityofEngineeringMay,2014独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得河北工程大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出重

3、要贡献的个人和集体，均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：鼹鲤幺签字日期：乃，午年f月涉日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解逦刍匕王猩太堂有关保留、使用学位论文的规定。特授权涸j匕工猩太堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子文档。(保密的学位论文在解密后适用本授权说明)学位论文作者签名：髂姬立签字日期：砂哗年李月磕日导师签名：砂匆％签字日期：≥D／午年S月矽日摘要

4、摘要副鸡禽杆菌(Apg)可引起鸡传染性鼻炎，该病是以鸡头和眼睑肿胀为主要症状的急性呼吸道传染病，主要引起育成鸡生长发育受阻和淘汰率增加，且造成蛋鸡产蛋量明显下降，给我国养禽业造成了巨大损失。2012年12月，我国南方某些蛋鸡养殖场出现了大量疑似鸡传染性鼻炎的病例，本研究对送检病鸡样品进行了细菌学检测。通过细菌分离、PCR、平板凝集试验，鉴定出4株副鸡禽杆菌，人工感染试验鸡能复制出与临床表现一致的病例。采用血凝和血凝抑制试验对分离菌株进行血清学分型，最终确认引起该病的病原体是B型副鸡禽杆菌。为了探讨以荚膜多糖(CPS)为抗原成份研发该病新型疫苗的可行性，本研究

5、用乙醇沉淀法在副鸡禽杆菌培养液上清中提取荚膜多糖，以苯酚一硫酸法测定其含量，并利用高效液相色谱(HPLC)分析多糖组分及分子量大小。结果显示，每升菌液可以抽提得到荚膜多糖85mg，含量为62％，该多糖主要由L一鼠李糖、D一木糖、D一葡萄糖等单糖组成，分子量约为209Ku。通过动物实验，分别研究了荚膜多糖和血凝素(HA)成份单独接种或混合免疫的免疫保护效果。用HA、C按PS和CPS+HA分别免疫SPF鸡后进行攻毒试验，在首免、二免后分别采血，利用ELISA方法检测血清抗体效价并计算各试验组鸡只的保护率。结果显示在免疫剂量和免疫途径相同时，CPS+HA联合免疫组

6、抗体水平高于HA、CPS单独免疫组；与肌肉注射相比，眶下窦注射免疫可显著提高血清抗体水平和保护率。表明B型副鸡禽杆菌荚膜多糖具有一定的免疫原性，且与HA结合后免疫保护率也有显著提高。关键词：副鸡禽杆菌；分离鉴定；荚膜多糖；分析；免疫原性Abstract一。———————————————————————————————————————————一InfectiouscoryzaofchickeniscausedbyAvibacteriumparagallinarum(Apg)，whichmainsymptomsareswellingofthecockscomba

7、ndeyelid．ItisanacuteresDiratoryinfectiousdisease，whichcouldleadtothebreedingchickensblockedingrowthandimproverejectionrate．Itcouldalsoresultsinalossoflayingrate，hugelossestopoultryindustryinourcountryInDecenlber2012，awidespreaddiseasesuspectedasinfectiouscoryzaoflayinghenoutbrea：ki

8、nsomecommerciallayerfarmsi