卵泡发育过程中γ氨基丁酸作用的初步探讨

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1、硕士学位论文卵泡发育过程中Y一氨基丁酸作用的初步探讨硕士研究生：刘晓艳指导教师姓名：邢福祺摘要Y一氨基丁酸(Y—gamma-aminobutyricacid，GABA)是由谷氨酸在谷氨酸脱羧酶的作用下脱羧而成，是中枢抑制性神经递质，分泌GABA的神经末梢位于下丘脑的神经核及中隆部，而其神经细胞则在下丘脑以外，GABA在下丘脑对黄体生成素(LH)和泌乳素(PRL)有调节作用。近年来，人们发现30多种外周组织中也有GABA的存在，特别是卵巢和输卵管中含量最高，提示GABA可能对生殖系统有某种生理作用。GABA对哺乳类动物卵巢功能的影响，已引起生殖内分泌领域的广泛关注。有资料提

2、示大鼠卵泡的生长与卵巢GABA含量有关，并且动物实验提示外源性GABA对黄素化颗粒细胞分泌雌二醇(estradiol，E2)和孕酮(progesterone，P)有抑制作用。本实验利用ELISA及RIA技术探索GABA与人卵泡发育及卵子成熟的关系和外源性GABA对人黄素化颗粒细胞分泌功能的影响。第一部分人卵泡液中GABA浓度与卵泡成熟的相关性研究【研究目的】探讨在人的卵泡发育过程中GABA浓度与卵泡发育及卵子成熟的关系。【材料和方法】中文摘要1标本来源来自2007．10"--2007．12于南方医院生殖中心行IVF／ICSI—ET的患者44例，患者月经周期规律，年龄均小于

3、35岁，不孕原因均为输卵管因素不孕或男性因素不孕。患者采用GnRH长方案，阴道B超监测卵泡发育，监测过程中收集未成熟卵泡(<14ram)的穿刺液，无血污。当双侧卵巢中至少有3个卵泡平均直径≥16mm-17mm时给于HCG5000～10000IU，HCG注射后34---,36小时取卵，HCG注射日抽血查E。，取卵日留取成熟卵泡(≥16ram)的穿刺液，卵泡液无血染，1个卵泡内含1个卵母细胞，空卵泡除外。将获得的卵泡液离心，3000转／分，离心5分钟，取上清装入EP管待测卵泡液中GABA浓度，将标本保存在--20℃，避免反复冻融，保存时间不超过一个月。2分组A组成熟卵泡(≥1

4、6mm)液34例B组未成熟卵泡(<14mm)液lO例3统计学方法利用人Y一氨基丁酸ELISA试剂盒检测卵泡液中GABA浓度，比较两组卵泡液中GABA的浓度以探索卵泡发育过程中GABA的变化。利用SPSS11．5软件进行统计学处理，独立样本t检验比较两组浓度的差异。氏0．05差异有统计学意义。【结果】A组与B组卵泡液中GABA的浓度分别为(29．7126±10．4225；7．0420+3．1971)ng／ml，A组浓度明显高于B组并且差异有统计学意义(P

5、1)明显高于未成熟卵泡液中GABA浓度(7．0420±3．1971ng／m1)，两者有显著性差异(P

6、对照组)；10一mol／1、10～mol／1、10咱mol／1、10巧mol／1(处理组)，继续培养24小时留取上清待测。2分组对照组11例10吨mol／111例10。7mol／111例lO-6mol／1ll例10巧mol／111例3统计学方法用人雌二醇和孕酮的放免试剂盒检测上清液中E：和P的浓度，比较各组中激素浓度的变化。利用SPSSl1．5软件进行统计学处理，采用单向方差分析(One-wayANOVA)比较处理组与对照组之间激素水平的差异。P

7、之间有丝状突起相互连接，细胞核大、圆，胞浆富含颗粒。2GABA对颗粒细胞分泌E：、P的影响对照组上清液中E。和P浓度分别为27．6132±6．4235pg／ml，47．8203±11．8306ng／ml，加入不同浓度的GABA后，上清液中的E：和P浓度分别为：①加入10。8mol／1GABA，上清液中E：和P浓度分别为17．7604--+4．5452pg／ml，38．8716_+6．5662ng／ml，与对照组相比，两者差异均有统计学意义(尸