酵母细胞酶法催化合成谷胱甘肽分析

《酵母细胞酶法催化合成谷胱甘肽分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、目录3．1．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯223．2结果与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一243．2．1不同菌体量对催化合成GSH的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一243．2．2硫酸镁浓度对催化合成GSH的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一243．2．3磷酸钟缓冲液浓度对催化合成GSH的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一253．2．4葡糖糖浓度对催化合成GSH的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一263．2．5反应温度对絮凝酵母催化合成GSH的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一273．2．6振荡反应速度对絮凝酵母催化合成GSH的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯一283．2．7葡萄糖消耗

2、与前体AA转化率随反应时间变化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．283．2．8正交试验设计和结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯293．3本章小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一32第4章絮凝酵母SP5发酵条件对细胞催化合成GSH的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯334．1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一334．1．1材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．334．1．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯344．2结果与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一354．2．1发酵温度的影响⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯354．2．2发酵培养基起始pH值的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．364．2．3摇瓶装液量的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯364．2．4接种量的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯374．2．5发酵培养基碳源的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯384．2．6发酵培养基氮源的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯394．2．7碳源氮源正交试验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯414．3本章小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42第5章表面活性剂对细胞合成GSH的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯445．1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一445．1．1材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．445．1．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯465．2结果与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一46VTT目录5．2．1TritonX．100溶液对酵母细胞催化合成GSH的影响⋯⋯⋯⋯⋯．465．2．2Tween80溶液对酵母细胞催化合成GSH的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯475．2．3SDS溶液对酵母细胞催化合成GSH的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯485．2．4表面活性剂TritonX一1

5、00透性化酵母细胞条件优化⋯⋯⋯⋯⋯．495．3本章小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一49第6章结论与展望⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一516．1结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯516．2进一步工作方向⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．52致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯53参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯54攻读学位期间的研究成果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯60第1章绪论1

6、．1概述1．1．1谷胱甘肽的结构组成及性质‘1]谷胱甘肽是由L．谷氨酸、L．半胱氨酸和甘氨酸三种氨基酸经肽键缩合而成的一种三肽化合物，同时具有Y．谷氨酰基和巯基两种生物活性【2j，对维持细胞正常的氧化还原状态等多种生物学反应具有十分重要的意义，其化学名称为Y．L一谷氨酰．L．半胱氨酰一甘氨酸，英文名称为L．Glutathione，因为它含有一SH基团，所以谷胱甘肽常用GSH来表示。1888年法国科学家deRey．Pailhade，J．在酿酒酵母中发现了谷胱甘肽，命名为philothion；1921年英国生化学家Hopkins[3,4J从酵母抽提物中也分离得到了谷胱甘肽这种物质

7、，并将其正式命名为glutathione；然而谷胱甘肽的化学分子结构式却是由Harington和Mead在1935年阐明其化学结构并加以合成才被最终确定的15J，其结构式如图1．1所示：H、NCOOHHlNOCH、HI—SHU上工八COOH图1．1谷胱甘肽的化学结构式Fig．1．1Chemicalstructuralformulaofglutathione谷胱甘肽在生物体内主要以还原型谷胱甘肽(reducedglutathione，简称GSH)和氧化型谷胱甘肽(oxidizedglutathione，简