鸡组织中地克珠利和妥曲珠利残留检测方法的分析

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1、氟甲)硫]苯氧基)苯基·l，3，5．三嗪基2，4，6(1H，3H，5H)一三酮。简称甲基三嗪酮。不溶于水，溶于乙腈、甲醇和乙二醇等有机溶剂。图1地克珠利分子结构式Fig．IMoleculestructureofdldaz,uril1．2三嗪类抗球虫作用机理图2妥曲珠利分子结构式Fig．2Moleculestl"uctureoftoltrazurll三嗪类抗球虫药物，可有效杀灭包括球虫在内的多种原虫。其中对柔嫩、堆型、毒害、布氏、巨型、和缓等艾美耳球虫的抗球虫指数均超过180，属高效抗球虫药物[3，141。三嗪类药物对球虫的整个生命期都有直接的杀灭作用，特别是第一代裂殖体。三嗪类可在球虫正常

2、发育阶段诱导虫体细胞内质网和高尔基体发生膨胀，从而使细胞核周围空间的分布发生异常。同时，三嗪类还抑制球虫呼吸链酶活性，抑制球虫细胞线粒体内氧化磷酸化作用，结果导致球虫的呼吸作用受阻，从而影响虫体的正常新陈代谢，导致球虫死亡。三嗪类是目前产生耐药性最慢的抗球虫药物【3qH41。1．3临床应用1．3．1地克珠利地克珠利原药在水中溶解性很差，一般作为饲料添加剂使用，常用的剂量为lppm。在规模生产的情况下，每吨全价饲料添加地克珠利的成本在20元以下，是目前市售抗球虫药中成本最低、效果最好的药物之一。地克珠利对所有感染鸡、火鸡和其他鸟类的致病性艾美尔球虫都有效【"】。对于兔‘81、猪‘9】和羊㈣的

3、球虫感染也具有较好的效果。地克珠利还被用来控制艾滋病患者继发的弓形体(eryptosporidiosis)和隐孢子虫感染(Isosporaspecies)t11～131。地克珠利对E．tenella的有性和无性繁殖期、E，aeervulina的裂殖体后无性期、E．maxima的合子期和E．brunette的配子体都具有良好的杀灭效果(Brandereta1．．1991)””。地克珠利还具有残留抗球虫能力，McDougaldLR(1998)等比较了七种抗球虫药(diclazuri，monensin，salinomycin，halofuginone，nicarbazin，robenidine，

4、2mnprolium．andlasaloeid)的残留抗球虫能力。结果显示只有地克珠利具有残留抗球虫能力，可以维持三天【l”。目前，已开发出水溶性地克珠利制剂。H．A．E1．Banna(2005)等比较了地克珠利可溶性粉(Dielosol1％)和地克珠利饲料预混剂(Clinaeox，O．5％)在抗球虫作用方面的差异，结果显示水溶性地克珠利和饲料添加剂型对试验混合感染的多种艾美尔球虫具有同等的疗效t161。1．3．2妥曲珠利妥曲珠利被广泛用于球虫病控制，一般以75ppm剂量饮水给药2d。妥曲珠利饮水给药(75ppm)能杀灭所有细胞内发育期的球虫。妥曲珠利能有效的预防和治疗所有能感染鸡[17】

5、，仔猪【18】和老鼠【19】的球虫。妥曲珠利在球虫感染的早期使用效果较好，ReynaudMC等在番鸭上的研究显示球虫感染后的第二天(第一裂殖体)使用妥曲珠利(7mg／kg)治疗效果要好于第五天(终末裂殖体和配子体)用刻”】。最近，妥曲珠利也用于牛艾美尔球虫感染的防治，剂型一般为预混剂，剂量15mg／kg。妥曲珠利能明显降低牛的腹泻率和卵囊排出【2“221。妥曲珠利也用于弓形体(Neosporacaninum)感染的治疗【”j，GottsteinB(2005)等比较了妥曲珠利(52．5mg／kg)和恩诺沙星(16．7mg／kg)对鼠弓形体胎盘传播的控制效果，结果显示妥曲珠利组的流产和死胎率明

6、显低于恩诺沙星和未用药组。妥曲珠利组母鼠脑内寄生虫的PcR检查阳性率也明显低于恩诺沙星组【241。妥曲珠利对犬肝簇虫感染也具有较好的治疗效剁”】。1．4耐药现状球虫药的耐药性是目前球虫病经常暴发的一个重要原因，长期使用相同的抗球虫药物容易引起球虫的耐药性，而且同一类抗球虫药物往往产生交叉耐药性。球虫耐药性的获得在分子水平往往表现为基因变异引起的酶和其它蛋白质的变化。JiangLL(2005)等运用双向电泳对泰勒艾美尔球虫蛋白质组进行了差异分析，比较了地克珠利耐药株和敏感株的蛋白质组学差异。在耐药株中发现了五个不同的蛋白质，并对其中四个进行了基质辅助激光解吸附离子飞行时间质谱(M√uDI-T

7、OF-Ms)分析【26】。三嗪类抗球虫药是目前产生耐药性较慢的一类抗球虫药物。但随着它们在临床的广泛使用，有关其耐药性的报道也逐渐增多。StephenB(1997)研究了十株艾美尔球虫分离株的耐药性，结果显示有九株表现出耐药性，其中7株抗马杜霉素，6株抗莫能霉素，5株抗盐霉素，8株抗尼卡巴嗪，7株抗lmlofuginone，抗妥曲珠利l株，抗地克珠利2株。有七株表现多重耐药性，5株同时耐马杜霉素、莫能霉素和盐霉素，l株对