【5A版】植物器官培养.ppt

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1、2021/9/181第四章植物器官培养第一节概述第二节营养器官培养第三节繁殖器官培养2021/9/182植物器官培养（OrganCulture）是指对植物某一器官的全部、部分或器官原基进行离体培养的技术。分为营养器官（根、茎、叶）和繁殖器官（胚胎、种子、花器官）培养。第一节概述2021/9/183植物器官培养营养器官培养繁殖器官培养根培养茎培养（包括茎尖、茎段）叶培养（包括叶原基、叶柄、叶鞘、叶片、子叶）花培养（包括花托、花瓣、花丝、花柄、子房、花药）种子培养（包括成熟与未成熟）胚胎培养（包括幼胚、成熟胚、胚珠、子房、胚乳培养）外植体形态发

2、生形成完整植株的途径（一）外植体-愈伤组织-完整植株。具体又可分为三种：1、愈伤组织-同时长芽和根-植株。2、愈伤组织-茎-根-植株。3、愈伤组织-根-芽-植株。4、愈伤组织-体细胞胚-植株第二节营养器官培养2021/9/186一、离体根的培养二、茎尖的培养*三、茎段的培养四、离体叶的培养*一、离体根的培养（一）意义：①生理代谢研究的优良实验体系②研究器官分化形态建成的良好体系③建立快速生长的根无性系④进行诱变育种2021/9/1871.培养基选择White培养基；2/3或1/2MS和B5培养基注：离体根生长要求提供全部必需元素，蔗糖、硝态

3、氮效果好，加入VB1、VB6最重要，生长素对离体根影响不一致。培养温度25－27℃，暗光培养。2021/9/188（二）培养方法离体根生长的营养要求1、无机成分要求培养基中有全部必要元素，因为它是离体生长所需要的，一般的为MS、B5培养基。2、氮源氮源有铵态氮、硝态氮和可溶性有机氮如氨基酸或酰胺等，其中以硝态氮的效果最好。加入含各种氨基酸的水解酪蛋白，能促进离体根的生长。3、碳源以蔗糖的效果最佳，几乎为葡萄糖的10倍。蔗糖的浓度为2—3%。4、维生素维生素以B1和B6最为重要，缺少它根的生长受到阻碍，而加入它可使根的生长成倍的加快。B1的使

4、用浓度为0.1-1.0mg/L为宜。5、生长物质对离体根的生长而言，生长素的效应最为明显，在一般情况，加入适量的生长素能促进根的生长，其反应和需要量因植物种而异：6、温度和光照黑暗有利于根的形成，温度一般在16-25℃7、PH根发生和生长所需的PH范围一般为5.0-6.02.无性繁殖系的建立种子消毒→→接种→→待根伸长后从根尖一端切取长1.2cm的根尖→→接种于培养基→→发育出侧根→→待侧根生长约1周后切取侧根的根尖进行扩大培养→→又迅速生长并长出侧根→→切下进行培养，如此反复→→得到从单个根尖衍生而来的离体根的无性系。3.培养条件暗光和温

5、度25-27℃。2021/9/18114、根的间接增殖第一步在脱分化培养基上诱导形成愈伤组织，如胡杨的根段培养，可诱导形成白色愈伤组织。第二步在再分化培养基上诱导形成芽的分化，如胡杨从绿色愈伤组织分化出小植株。一、离体根的培养胡萝卜根培养5、培养方式离体根的培养方式有三种类型。第一种固体培养法，即将根尖接种在固体培养基上，根依靠培养基中的养分和生长物质而不断生长。第二种是液体培养法，把根尖接种在无琼脂的液体培养基中，经常振荡使根获得充足的氧气。第三种是固体-液体培养法，就是把根基部插入固体琼脂培养基中，根尖浸在液体培养基中，根尖生长而根不断

6、的伸长和分枝。2021/9/1815二、茎尖的培养*（一）茎尖培养概念及类型（二）病毒在植物体内的分布（三）茎尖培养方法及步骤(一)茎尖培养概念及类型茎尖培养：切取茎的先端部分或茎尖分生组织部分，进行无菌培养。茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为：①微茎尖培养:带有1-2个叶原基的生长点,其长度不超过0.5mm。2021/9/1816②普通茎尖培养：较大的茎尖(如几mm到几十mm)、芽尖及侧芽。这里主要讲普通茎尖培养。这种培养技术简单，操作方便，茎尖容易成活，成苗所需时间短。茎尖培养的意义：普通茎尖培养技术简单，操作方便，易成活，成苗时间短

7、，加快繁殖。微茎尖培养可获得脱毒苗；2021/9/1817病毒侵染植株的叶片后，经过一段时间，即向附近的细胞增殖转移。转移速度很慢，每小时只有几微米。当叶片内病毒浓度增大到一定量时，就转移到韧皮部，随后通过维管束转移到其它部分。由于病毒转移速度慢，加上茎尖分生组织无维管束，病毒只能通过胞间连丝传递，赶不上细胞分裂和生长的速度，所以生长点的病毒数量极少，几乎检测不出。茎尖培养时，切取的茎尖越小，带病毒的可能性就越小。——茎尖脱毒的基本原理(二)病毒在植物体内的分布（三）茎尖培养方法及步骤2021/9/1820取材材料处理及消毒培养接　种驯化移

8、栽①直接取材：在生长旺盛、枝条健壮、无病的母株上选生长不久、杂菌污染少的顶梢（1－2cm）（取前可喷杀菌药，可顶芽或侧芽）。②从试管苗获取。2021/9/18211、取材取1-2