GBT24310-2009-烟草及烟草制品转基因检测方法.pdf

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1、ICS65．160X85圆雪中华人民共和国国家标准GB／T24310—2009烟草及烟草制品转基因检测方法Tobaccoandtobaccoproducts--Detectingmethodofgeneticallymodifiedorganismcontents2009-09-30发布2009—12-01实施丰瞀髁鬻瓣警矬瞥星发布中国国家标准化管理委员会促111GB／T24310—2009目次前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯ll范围⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯’⋯⋯‘‘l2

2、规范性引用文件⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯’⋯⋯⋯⋯⋯⋯’’’’⋯⋯‘13术语和定义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯’’⋯⋯⋯⋯⋯⋯’’⋯⋯‘‘l4实验室要求⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯z5试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯’⋯⋯⋯⋯⋯⋯’⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯’36仪器设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯’’⋯⋯⋯⋯⋯⋯’⋯⋯⋯⋯37取样⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯·⋯⋯⋯··⋯⋯⋯‘⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯’’⋯‘⋯⋯⋯⋯48烟叶样品DNA提取方法⋯

3、⋯⋯⋯···⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯’’’⋯⋯⋯⋯’⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。。49转基因烟草定性检测方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯’’’⋯⋯⋯⋯⋯⋯’’⋯⋯⋯⋯⋯⋯’’’’510转基因烟草定量检测⋯⋯⋯⋯⋯····⋯⋯⋯⋯⋯⋯’⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯’⋯’“711转基因烟草检测验证标准⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯’’⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯’’’⋯。812检测报告⋯⋯···⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯’’’’’⋯⋯⋯⋯⋯⋯’⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。9附录A(规范性附录)含EB电泳液的处理方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯’’’⋯⋯⋯⋯⋯⋯’’⋯⋯⋯⋯⋯⋯’’’。10附录B(

4、规范性附录)各类样品的DNA提取方法⋯⋯⋯⋯’’’’⋯⋯⋯⋯⋯’’’⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯‘‘11附录C(规范性附录)DNA提取物的浓度和纯度的测定方法⋯⋯⋯’’’⋯⋯⋯⋯⋯⋯’’’⋯⋯⋯⋯12附录D(规范性附录)烟草转基因检测PCR扩增体系与扩增条件⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯13附录E(规范性附录)溶液的配制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯’⋯⋯⋯⋯⋯⋯’’⋯⋯⋯⋯⋯。14附录F(规范性附录)荧光定量PCR扩增体系与扩增条件⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16附录G(资料性附录)烟草转基因检测结果报告单⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18前言GB／T24310一20

5、09本标准的附录A、附录B、附录C、附录D、附录E、附录F为规范性附录，附录G为资料性附录。本标准由国家烟草专卖局提出。本标准由全国烟草标准化技术委员会(SAC／TC144)归口。本标准起草单位：中国烟草进出口烟叶检测站、中华人民共和国深圳出入境检验检疫局。本标准主要起草人：郭兆奎、陈枝南、冯茜、万秀清、颜培强、李丽杰、乔婵、孙宏宇。1范围烟草及烟草制品转基因检测方法GB／T24310—2009本标准规定了烟草种子、鲜烟叶、初烤烟、片烟和卷烟烟丝进行转基因成分检测的样品取样方法和实验室检测方法。本标准适用于烟草及烟草制品转基因成分检测。2规范性引用文件下列文件中的条款通

6、过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB／T5606．1卷烟第1部分：抽样GB／T19616烟草成批原料取样的一般原则3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3．1转基因烟草geneticallymodifiedtobacco通过基因工程技术或现代生物技术改变基因组构成的烟草。3．2小样increment在一个取样单位一次取出的一定数量的烟草，构成单样的一部分。[GB／T1

7、96162004，定义2．6]3．3样品sample从一个群体中选取的一个或多个具有代表性的样本单位。3．4实验室样品laboratorysample用于实验室检验或测试的样品，其代表总样。[GB／T196162004，定义2．10]3．5检测样品testsample实验室样品经过研磨和匀浆(如果需要)处理后进行分析测定的样品。3．6聚合酶链式反应扩增polymerasechainreactionamplificationPCR扩增模板DNA序列在含有4种脱氧核糖核酸(dNTPs)、引物、DNA聚合酶等的反应体系中，在仪器中通过多次的高温