《GB5413.17-2010-发布稿婴幼儿食品和乳品中泛酸的测定发布稿》.pdf

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1、中华人民共和国国家标准GB5413.17—2010食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中泛酸的测定NationalfoodsafetystandardDeterminationofpantothenicacidinfoodsforinfantsandyoungchildren,milkandmilkproducts2010-03-26发布2010-06-01实施中华人民共和国卫生部发布GB5413.17—2010前言本标准第一法为等同采用国际分析家学会（AOAC）945.74PantothenicAcidinVitaminPreparations。本标准代替GB/T5413.17-1997

2、《婴幼儿配方食品和乳粉泛酸的测定》。本标准与GB/T5413.17-1997相比，第一法主要变化如下：——增加了tris缓冲液配制方法；——确定了测定波长；——增加了标准曲线绘制的文字描述。第二法主要变化如下：——更换了色谱柱；——改变了流动相；——增加了含淀粉类试样进行酶解的处理方法。本标准的附录A为资料性附录。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：——GB5413-1985、GB/T5413.17-1997。IGB5413.17—2010食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中泛酸的测定1范围本标准规定了婴幼儿食品和乳品中泛酸的测定方法。本标准适用于婴幼儿食品和乳品中泛酸的测定。2规范性

3、引用文件本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。第一法微生物法3原理利用植物乳杆菌（Lactobacillusplantarum）ATCC8014对泛酸的特异性，在含有泛酸样品中生长产生的酸度和形成的光密度来测定泛酸的含量。4试剂和材料除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯试剂，水为GB/T6682规定的二级水。4.10.9%生理盐水：9.0g氯化钠溶解于1000mL水中，分装于具塞试管中，每管10mL，121℃灭菌15min。每周准备一次。4.2泛酸钙标准品

4、。4.3乙酸溶液（0.2mol/L）：吸取12mL冰乙酸用水稀释至1000mL。4.4甲苯（C7H8）。4.5乙酸钠溶液（0.2mol/L）：溶解16.4g无水乙酸钠于水中，稀释至1000mL。4.6菌株：植物乳杆菌（Lactobacillusplantarum）ATCC8014。4.7培养基4.7.1乳酸杆菌琼脂培养基：光解胨15g，酵母浸膏5g，葡萄糖10g，番茄汁100mL，磷酸二氢钾2g，聚山梨糖单油酸酯1g，琼脂10g，加蒸馏水至1000mL，调pH至6.8±0.2（20℃～25℃）。4.7.2乳酸杆菌肉汤培养基：光解胨15g，酵母浸膏5g，葡萄糖10g，番茄汁100mL，磷

5、酸二氢钾2g，聚山梨糖单油酸酯1g，加蒸馏水至1000mL，调pH至6.8±0.2（20℃～25℃）。4.7.3泛酸测定用培养基：葡萄糖40g，乙酸钠20g，无维生素酸水解酪蛋白10g，磷酸氢二钾1g，磷酸二氢钾1g，L-胱氨酸0.4g，L-色氨酸0.1g，硫酸镁0.4g，氯化钠20mg，硫酸亚铁20mg，硫酸锰20mg，硫酸腺嘌呤20mg，盐酸鸟嘌呤20mg，尿嘧啶20mg，胡萝卜素400μg，盐酸硫胺素200μg，1GB5413.17—2010生物素0.8μg，p-氨基苯甲酸200μg，烟酸1mg，盐酸吡哆醇800μg，聚山梨糖单油酸酯0.1g，加蒸馏水至1000mL，调pH至6.

6、7±0.1（20℃～25℃）。4.8Tris缓冲液：称取24.2gTrizmaBase于烧杯中，加200mL水溶解。4.9盐酸（0.1mol/L）：吸取8.3mL盐酸，用水稀释至1000mL。4.10标准溶液4.10.1泛酸标准贮备液（40μg/mL）：精确称取45mg～55mg泛酸钙标准品（4.2），溶入500mL蒸馏水中，加10mL乙酸溶液（4.3），加100mL乙酸钠溶液（4.5），用水稀释至泛酸钙精确浓度为43.47μg/mL（即泛酸浓度为40μg/mL），加0.5mL甲苯（4.4）贮于2℃～4℃冰箱中，保存期为4个月。4.10.2泛酸中间贮备液（1μg/mL）：取25mL标准

7、贮备液（4.10.1），加入蒸馏水500mL，乙酸溶液10mL（4.3），乙酸钠溶液100mL（4.5），再用水稀释至1L。加0.5mL甲苯（4.4）贮于冰箱中（2℃～4℃），保存期为1个月。4.10.3泛酸标准工作液（10ng/mL，5ng/mL）：吸两次5.0mL中间贮备液（4.10.2），分别用水定容至500mL和1000mL，临用前配制。5仪器和设备5.1分光光度仪。5.2pH计：精度为0.01。5.3涡旋振荡器。5.4天平：感量0.1