小鼠骨髓基质细胞复合藻酸盐异位成骨和成软骨能力的研究

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1、四川大学硕士学位论文小鼠骨髓基质细胞复合藻酸盐异位成骨与成软骨能力研究姓名：蔡潇潇申请学位级别：硕士专业：口腔临床医学指导教师：欧国敏20070501四川太学华西口腔医擘院七年制学生学住论文缩略词BMSCsECMColFBSTGF-BlOCNOPNPBSWkDHMillSe圮缩略词表英文全称Bonemarrowstronmlcellsac仕acelhdarmatrixCollagenFetalbovineSerumTransforminggrowthfactor-pl0steocalcinOsteopo

2、ntinPhosphate-bufferedsalineWeekDayHourMinuteSecond中文名称骨髓基质细胞胞细胞外基质胶原蛋白胎牛血清转化生长因子Bl骨钙蛋白骨桥蛋白磷酸盐缓冲液周天小时分秒——一——一!型苎兰兰望!垦垦兰堕主±型兰圭兰堡垒墨．。．声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究j：作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同

3、工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本学位论文是本人在四川大学读书期问在导师指导下取得的，论文成果归四川大学所有，特此声明。申请人：燕毳禹指导教师：侈净f学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解四川大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许沦文被查阅和借阅。本人授权四川大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。学位论文作者签名：藻螽灞签字日期：碲‘月

4、弓日学位论文作者毕业后去向：工作单位：通讯地址：导师签名：电苹签字同期：卅7年6月多日联系方式邮政编码四川大学华西口腔医学院七年制擘生学位论文小鼠骨髓基质细胞复合藻酸盐异位成骨与成软骨能力研究七年制研究生：蔡潇潇导师：欧国敏副教授中文摘要在临床医学中，因刨伤、感染、肿瘤术后及先天缺陷导致组织缺损的修复重建，一直是困扰各专业医生的棘手问题。在口腔种植学领域，由于长期缺牙导致多数患者术区缺乏足够的骨量，需要术前植骨。当前临床上使用的自体骨、异体骨移植，以及其它各种组织修复与重建方法虽然各有优缺点。组织工程是

5、应用细胞生物学和工程学的原理，对病损组织结构、功能的修复与重建进行研究开发的一门新兴科学。种子细胞是组织工程的首要因素，骨髓基质干细胞是近年来研究最热门的种子细胞，被认为是最有可能用于临床的种子细胞之一。本实验通过分离BALB／C小鼠骨髓基质细胞，经过原代培养和定向诱导后将其复合藻酸盐支架材料后植入体内观察异位成骨、成软骨能力。实验采取贴壁法获得骨髓基质细胞。并诱导培养其成骨、成软骨表型，观察细胞形态变化并进行免疫细胞化学、组织学染色以及分子生物学鉴定；再复合藻酸盐凝胶，扫描电镜观察细胞与支架材料粘附情

6、况；最后将细胞一支架复合体植入裸鼠皮下，于植入后4、8周取材，HE染色、免疫组织化学染色、RT-PCR检测异位形成的骨、软骨组织。研究结果显示：骨髓基质细胞经过成骨和成软骨诱导后可以表达明显的成骨和成软骨表型，扫描电镜结果显示细胞在藻酸盐支架内良好的贴附和增殖。体内动物试验证实，经过成软骨诱导的BMSCs复合藻酸盐后可以形成C01．II2免疫组织化学染色阳性的软骨样组织；经过成骨诱导的BMSCs复合藻酸盐支架后可以形成OCN免疫组化染色阳性，类似骨小梁的结构的骨样组织。而RT-PCR结果也证实异位软骨、

7、骨组织可以表达出软骨、骨的特异性基因。综上所述，经过成骨或成软骨诱导BMSCs复合藻酸盐凝胶可以形成异位骨、软骨组织，将成为骨软骨组织缺损修复的有效途经。工程关键词：骨髓基质细胞；藻酸盐凝胶；骨组织工程；软骨组织3四川大学华西口腔医学院七年制学生学位论文EctopicosteogenesisandchondrogenesisofbonemarrowstromastemcellsinalginatesystemPostgraduate：CaiXiaoxiaoTutor：OuGuominAssociateP

8、rof．AbstactObjeet：Inorthopaedics,theregenerationandrepairofcartilageorbonedefectsresulting舶哪trauma,cancerormetabolicdisorders．isstillamajorclinicalchallenge．Withdevelopmentalplasticity,bonemarrowmesenchymalstemcells(BMSCs)