甘草水提物对口腔细菌的体外抑菌实验研究 毕业论文

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1、目录摘要……………………………………………………………………………1Abstract………………………………………………………………………21实验材料……………………………………………………………………31.1实验样品………………………………………………………………31.2培养基…………………………………………………………………31.3实验仪器………………………………………………………………31.4实验试剂………………………………………………………………32方法…………………………………………………………………………42.1口腔细菌的分离纯化………

2、…………………………………………42.2口腔细菌的观察………………………………………………………42.3药物提取………………………………………………………………42.4抑菌试验………………………………………………………………42.4.1菌种活化…………………………………………………………52.4.2抑制………………………………………………………………53结果与分析…………………………………………………………………53.1菌落特征………………………………………………………………53.2菌落的形态特征………………………………………………………63.3甘

3、草的抑菌效果………………………………………………………64讨论与结果…………………………………………………………………7参考文献………………………………………………………………………87第页共9页甘草水提物对口腔细菌的体外抑菌实验研究摘要：目的：研究甘草的水提物对部分口腔细菌的抑制作用。方法：采用滤纸片扩散法对甘草水提物进行口腔细菌的抑菌实验。结果：甘草水提物对甘草水提物对3号和7号菌的抑制作用显著对1、4、5、6号的抑制一般，对2、8号的菌抑制不明显。结论：甘草的水提物对部分口腔细菌有较好的抑菌效果。关键词：口腔细菌水提物甘草抑菌7第页共9页甘草

4、（GlycyrrizaUralensisFisch.G.GlabraL.）豆科多年生草本植物根呈圆柱形，长25～lOOcm，直径0.6～3.5cm。外皮松紧不一。表面红棕色或灰棕色，具显著的纵皱纹、沟纹、皮孔及稀疏的细根痕。质坚实，断面略显纤维性，黄白色，粉性，形成层环明显，射线放射状，有的有裂隙。根茎呈圆柱形，表面有芽痕，断面中部有髓[1]。甘草多生长在干旱、半干旱的荒漠草原、沙漠边缘和黄土丘陵地带，在引黄灌区的田野和河滩地里也易于繁殖。清热解毒的中草药对多种细菌或病毒所致的感染性疾病有良好的治疗效果[2]。补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛

5、，调和诸药，常与金银花、连翘等同用，共奏清热解毒之功效。本文采用甘草水提物对部分口腔细菌进行体外抑菌实验，观察甘草的水提物对部分口腔细菌的体外抑菌效果，为口腔疾病的防治提供理论依据。1实验材料1.1实验样品甘草样品于2009年12月购买于大通红十字医院。1.2培养基牛肉膏蛋白胨琼脂培养基[3]。1.3实验仪器电热恒温水浴锅恒温培养箱手提式压力蒸汽消毒锅无菌操作台1.4药品试剂甘草结晶紫染液卢戈氏碘液95%乙醇番红复染液芽孢染色液荚膜染色液2方法7第页共9页2.1口腔细菌的分离纯化分别于生命于地理科学学院生物技术06级C班李光菊、李鹏、张华三位同学的

6、牙根、舌后根、舌两侧部位[4]用无菌牙签取菌，将牙签上的菌用1ml无菌水冲到无菌试管内，振摇5min，使口腔细菌与无菌水充分混合。在无菌操作台上点燃酒精灯并在火焰附近用无菌移液管从中吸取0.1ml放入平板，倒置培养48h。用无菌竹签挑取培养好的口腔细菌放入10ml无菌水中，振摇使口腔细菌与无菌水充分混合，用无菌移液管从中吸取1ml口腔菌悬液加入盛有9ml无菌水的试管中充分混匀，然后用无菌移液管从此试管中吸取1ml加入盛有9ml无菌水的试管中混合，以此类推制成10倍、100倍、1000倍、10000倍到1000000倍不同稀释度的口腔细菌液[3]。用

7、无菌移液管分别从后三个稀释度的三管口腔细菌稀释液中各吸取0.1ml对号放入平板中，用无菌玻璃涂棒在培养基表面轻轻涂布均匀。将涂布后的平板倒置培养于37℃恒温箱中48h，观察菌落特征，将典型的单菌落移接到斜面培养基上，置于37℃恒温箱中培养48h继续分离纯化，直至形成单一菌落，将单菌落转接到培养基上，纯化3次后，4℃保存备用[5].2.2口腔细菌的观察在光学显微镜下观察细菌个体形态，测量其大小，并对细菌进行革兰氏染色，芽孢染色，荚膜染色，鞭毛染色。2.3药物提取将阴干的甘草切成薄片，称取50g置烧杯中加蒸馏水浸泡30min后加热煮沸，并加热30min

8、，过滤得第一次水提物，将滤渣用同样的方法得第二次，第三次水提物，合并3次滤液，置于烧杯中，在70℃恒温水浴锅中蒸发浓缩至5