不同浓度钙离子对凝血及因子的作用

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1、第17卷第1期1997年1M屮国兽医学报ChineseJournalofVctcrinaryScience不同浓度钙离子对凝血工、:及忧因子的作用:李佩国张继东李蕴玉李双安王洪发(河北农业技术师范学院,河北昌黎066600)摘要家兔血液少不同浓度CaCh溶液混合后,随若Ca”浓度的増加血凝时间延长,当血屮Ca"浓度达01054mo1./*时,出现抗凝0172mol.X"CaCk溶液抗凝兔血置37°C水浴30,120min后,再以生理盐水稀释,血液仍能恢复凝固。表明CaCk抗凝血中的纤溶系统未被激活,•其抗凝作用具冇可逆性;英川的凝血恻因了无变性、降解、失活现象,对纤维蛋白原含量无影响,但可明

2、显抑制4000U上•凝血酶的活性。关键词钙离子家兔血液凝固凝血忧因子纤维蛋白原凝血酶中图分类号S85212凝血机制发生障碍或变界,是导致出血或血栓形成等重症疾患的主要原因。现己确定,在整个凝血过程中有12个凝血因子和A4种血喙蛋白成分参予。C芒作为凝血K因子已被公认它对血液凝固起着重要的不可替代的作用。许多报道证明,血中Ca"浓度低于0127mmoljf或肩于27mmol上•时,可使凝血时间延长从。但血中Ca2+浓度高出27mmol上后为何使血凝时间延长尚未见报道。鉴于血液凝固在血液学和医学临床应用上的重要性,本实验就不同浓度的Cf,尤其是高出27mmol上以上时对血液凝固的影响机制进行了分

3、段测定研究。1材料与方法111材料11111供试动物选用营养屮等、临床健康的成年青紫蓝健兔3()()只(雌雄皆有,均由本院实验动物中心提供),采血时用乙瞇麻醉动物,通过颈动脉插管(0115^210mm)放血。11112试剂氯化钙(分析纯),天津市塘沽邓中化工厂产,批号8102016;凝血酶,美国Sigma公司产品,-2()°C冰箱保存,用时配成所需浓度。11113血液样本分别以0113mol上、的柠檬酸钠和0172mol./'的CaCh溶液作抗凝剂,制备两3河北省教委基金资助项目本文收到H期:1995・07-17种抗凝血及富血小板血浆(PRP)和少血小板血浆(PPP)备用。计数两种PRP中

4、的血小板数,分别用同一种PPP稀释PRP,使两者PRP含血小板数相同(150X10%。112方法11211不同浓度CaCb溶液对家兔凝血时间的影响将CaCh配成0109,0118,0136,0154,0172,0190和1108moIX的溶液,按试剂与血液1:9比例混合(血样3()份),用试管法°依次测定各浓度的凝血时间。11212可逆性测定分2组,第1组用0172molJtCaCh抗凝血,置37°C恒温水浴30min后用生理盐水稀释,测凝血时间;第2组也用0172molJ£CaCh抗凝血,37°C水浴2h后用生理盐水稀释,测凝血时间。各组均以0113mol./'柠檬酸钠抗凝血作对照。112

5、13惻因子有效性测定取0136moljC的CaCb溶液1份,使其与9份兔血浆(PRP)混合后,分取012mL放入小试管内,置于37°C恒温水浴中,待其白然凝固后备用,作为试验组;取0113mol./'的柠檬酸钠抗凝血PRP011mL于小试管中,加入01025moIXCaC12液OilmL,混合后置37°C水浴凝固,作为对照组。待各组凝块形成后,将小试管在37°C水浴中留置10min,然后轻敲小试管使凝块脱离管壁,分别加5moiyL尿素盐水溶液115mL,并留置37°C水浴内24h,分别在015,110,210,410,2410h内观察凝块是否溶解。11214纤维蛋白原滴定度测定采用试管法分另

6、IJ测定0172molCaChPRP和0113mo1上•柠檬酸钠PRP的纤维蛋白原滴定度7。11215凝血酶时间(TT)测定取内径8mm小试管10支,分为2组。第1组每管加0172moljfCaCb抗凝血PPPOilmL,第2组加0113mol£柠檬酸钠抗凝血PPPOilmL,置37°C水浴。各组每管分别加入凝血酶(Thi*)生理盐水液,Thr20118moljfCaChM,Thr20136moljfCaCh液,Thr2Q54moIJt*CaC12液和Thr20172moljt*Ca2CL液各OilmL,立即混合并记录凝固时间(各混合液均含Thr4000U上*)。2结果211不同浓度CaCL

7、溶液对家兔凝血时间的影响随着血中CaCh浓度的增加,凝血时间延长混入0109,0118和0136moj£CaCh液的血凝时间(min)分别为3190±0110,4170±0110和17130±0114;CaC12浓度超过0154mol.X时出现抗凝作用。212可逆性测定结果0172moljfCaCh抗凝血经生理盐水稀释后,能恢复血液凝固能力;0113mol./'柠檬酸钠抗凝血经生盐水稀释后不凝固(表1)。C

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