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1、大鼠骨髓来源树突状细胞的体外培养与鉴定Invitrocultureandidentificationofratbonemarrow-deriveddendriticcells指导教师:(副教授)指导教师:(副教授)专业名称:生物工程答辩时间:2013年6月吉林工程技术师范学院学术委员会2013年6月中文摘要中文摘要骨髓来源的树突状细胞(dendriticcellsDC)是已知的体内抗原提呈功能最强的抗原提呈细胞(antigenpresentingcell,APC),能摄取各类抗原,体内、外均能激发T细胞增殖,诱导特异性细胞杀伤性T淋巴细胞(cytotoxicTlymphoc
2、ytes,CTL)生成,产生抗肿瘤效应。近些年来越来越多的人认识到DC在肿瘤免疫中的作用,DC的研究也已经进入了体内研究阶段。但既往体内试验主要是以裸鼠为动物模型,由于裸鼠为细胞免疫缺陷性动物,很难反应出卵巢癌DC疫苗的真正免疫调节作用,因此有必要对正常免疫状态的实验动物进行DC培养。大鼠是体内实验最常用的动物模型,而目前国内外对大鼠来源DC培养方法有限。本实验利用大鼠骨髓细胞进行DC的分离培养,进一步探讨了大鼠骨髓DC的培养方法,为DC体内研究奠定基础。目的:建立体外培养、诱导和扩增大鼠骨髓来源的树突状细胞的方法。方法:实验通过运用大鼠淋巴细胞分离液和培养过程的手法筛选相
3、结合,培养、诱导和扩增大鼠骨髓来源的树突状细胞,通过形态学和免疫表型进行鉴定。结果:成功建立了体外大量培养、诱导及扩增大鼠骨髓来源树突状细胞的方法;经倒置相差显微镜、透射电镜及流式细胞仪鉴定,证实所培养细胞为树突状细胞。结论:通过运用大鼠淋巴细胞分离液和培养过程的手法筛选相结合能培养、诱导、扩增大量的树突状细胞。关键词:树突状细胞;免疫耐受;大鼠19吉林工程技术师范学院毕业论文英文摘要AstractBonemarrowderiveddendriticcells(dendriticcellsDC)isknowninvivoantigenpresentingfunctionis
4、thestrongestantigen-presentingcells(antigenpresenting,cell,APC),intakeofvariousantigens,body,canstimulatetheproliferationofTcells,inducespecificcytotoxicTlymphocyte(CYtotoXicTLymphocytes,CTL)generation,producingantitumoreffect.Inrecentyears,moreandmorepeoplerealizethattheroleofDCintumorimm
5、unity,DCresearchhasenteredaphaseofthestudyinvivo.Butpreviousinvivotestismainlytonudemiceasanimalmodel,thenudemiceforcellimmunodeficiencyanimal,itisdifficulttoreflecttherealimmuneregulationeffectofovariancancerDCvaccine,itisnecessarytoexperimentalanimalofnormalimmunestatuswereculturedinDCsy
6、stem.Theratisthemostcommonlyusedexperimentalanimalmodels,whileathomeandabroadontheratDCcultureco..IsolationandcultureofratbonemarrowcellsinthisexperimentusingDC,tofurtherexplorethecultivationofratbonemarrowDC,laythefoundationforDCinvivo.Objective:toestablishamethodofinductionandproliferati
7、onofratbonemarrow-deriveddendriticcells,invitroculture.Methods:theexperimentbyusingtheseparationofratlymphocytesandscreeningcombinedtrainingtechniques,training,inductionandproliferationofratbonemarrow-deriveddendriticcells,wereidentifiedbymorphologyandimmunoph