eppendorf plus 移液枪校准方法

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1、Eppendorfplus移液枪校准方法1、准备超纯水、万分之一天平(如果校正0.5~2.5ul量程的,至少要十万分之一的天平)、温湿度计、恒温室,还需准备一个小口容器,防止水分挥发。2、按移液器总量程的100%、50%、10%分别进行第三和第四步。3、吸头要反复吸取超纯水三次后,吸取固定容积的超纯水,推入放置在天平上的小口容器中,待数据稳定读取天平数值,同时记录温度。重复10次。4、将测量的数据用iso8655中的计算公式计算获得对应温度下的体积,取平均值。5、根据三个测量点的偏差,用移液器专用的

2、校正扳手通过移液器的校正窗进行调整。6、重复3、4步,直至偏差在ISO8655的要求内为止。ISO8655-1-2002活塞式容量测量仪器.第1部分:术语、一般要求和用户使用建议ISO8655-2-2002活塞式容量测量仪器.第2部分:活塞式吸量管ISO8655-6-2002活塞式容量测量仪器.第6部分:确定测量误差的重量分析法三、校准方法及步骤操作环境:温度应控制在15-30℃,恒定在±0.5℃,相对湿度50%-80%,要保持较高的空气湿度以减少水分蒸发对结果造成的影响。建议使用防蒸发装置。测试应

3、在独立无通风的房间内进行,并配备温度和湿度显示。所需设备:1、分析天平一台。确保室内空气流动平缓,应避免天平正对空调出风口。根据所测试的移液器的容量来选择适合的天平:移液器容量范围天平可读性天平的重复性和线性测量不准确度1μl~10μl0.001mg0.002mg≤0.002mg10~100μl0.01mg0.02mg≤0.02mg>100μl0.1mg0.2mg≤0.2mg 2、纯水、三蒸水或去离子水,需达到ISO3696三级水的标准。3、独立工作间,配备防震、防尘、远离热源、无阳光直射的操作台。

4、4、温度计、湿度计。校准操作:为确保校准的准确性,采用三点移液十次,具体步骤如下:1、同温处理,将移液器、吸头、天平、测试用水、操作台等校准用具放置在同一工作间内,至少四小时。2、在正式操作前,先预洗吸头,吸排测试用水5次。3、用最大体积、50%最大体积和最小体积(或10%最大体积),各移液10次,记录每次移液的质量。4、计算每组数据的平均值,代入计算公式,计算出不准确度与不精确度。5、对比可允许的最大误差限度,根据实际需要确定进行调整。附:相关计算公式质量体积转换公式1:V=(w+e)×Z式中:V

5、=体积(μl)w=质量(mg)e=蒸发损失(mg)Z转换因子以上公式参考ISO8655标准。蒸发损失对测量小体积液体影响较大,因此应将蒸发损失计算在内。方法:在称过重的容器中注入定量清水,按下秒表观察30秒,读出损失量,然后算出每秒的损失量。(若30s内质量损失3mg,则损失量为3mg÷30s=0.1mg/s)。记录移液时间,将移液时间乘以每秒损失量,算出实际蒸发损失量,代入上述公式计算实际体积。若使用防蒸发装置,通常可以忽略蒸发损失量。不同温度、压力下水的质量和体积不同,具体转换因子Z值请查看附录

6、1。公式2:V20=m×K(t)式中:V20=标准温度20℃下实际体积(μl)m=质量(mg)K(t)值以上公式参考JJG646-2006移液器检定规程。根据天平测试蒸馏水的质量,以及检测时温度所对应的K(t)值,即可计算出标准温度下蒸馏水的实际体积。具体K(t)值请查看附表2。计算式时,请根据实际需要,选择公式进行计算。不准确度(系统误差)不准确度是指实际移取体积和显示体积的差异。A=-V0式中:A=不准确度=平均值V0=标称容量A%=100%×A/V0不精确度(随机误差)不精确度指每次实际移取体

7、积与实际体积平均值的差异,其变化是不可预计的测量误差的一部分。它可以表示为标准差S或变异系数CV:式中:S=标准偏差=平均值n=测量次数Vi=单次测量数值CV=100%×S/附表1:转换因子Z(μl/mg)数值表(无菌水)温度气压(KPa)1KPa=10hPa(℃)80859095100101.310515.001.00171.00181.00191.00191.00201.00201.002015.501.00181.00191.00191.00201.00201.00201.002116.001

8、.00191.00201.00201.00211.00211.00211.002216.501.00201.00201.00211.00211.00221.00221.002217.001.00211.00211.00221.00221.00231.00231.002317.501.00221.00221.00231.00231.00241.00241.002418.001.00221.00231.00231.00241.00251.00251.002518.501.

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