红掌外植体消毒技术研究

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时间:2019-01-10

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1、红掌外植体消毒技术研究  摘要:以亚利桑娜红掌(Anthuriumandraeanum)为研究对象,研究了取材部位、消毒液HgCl2浓度、消毒时间对红掌外植体接种效果的影响。结果表明,以叶柄为外植体,使用0.1%的HgCl2消毒时间8min,红掌组培接种效果最佳。  关键词:红掌(Anthuriumandraeanum);外植体;消毒  中图分类号:S688.4文献标识码:A文章编号:0439-8114(2015)24-6294-02  DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.24.050  Abstract:Anthuriumandraeanum‘Ari

2、zona’astheresearchobject,theeffectofexplantssamplingsite,theconcentrationofHgCl2anddisinfectiontimeonexplantinoculationwereresearched.Theresultsshowedthattheinoculationeffectoftissuecultureofexplantsofthepetioleasexplants,0.1%concentrationofHgCl2anddisinfectiontime8minwasbest.  Keywords:Anthuriumand

3、raeanum;explant;disinfect  红掌(Anthurium4andraeanum)隶属天南星科花烛属,为多年生常绿草本花卉,原产于南美洲热带,欧洲、亚洲、非洲等地均有种植[1]。红掌株高因品种而异,其花朵独特,佛焰苞片色彩艳丽,肉穗花序姿态万千。红掌品种较多,可作切花栽培,可作盆花栽培,常采用分株繁殖,但繁殖速度慢[2]。因此,在工厂化生产中,常采用组织培养的方式实现快速繁殖。外植体的选择与处理是组培苗培育成功的关键步骤之一,也是红掌工厂化育苗的关键环节之一。本研究通过比较试验,研究了红掌外植体取材部位、消毒液HgCl2浓度、消毒时间对接种效果的影响,为红掌组培技术的研究提

4、供了参考。  1材料与方法  1.1试验材料  选取色泽艳丽的亚利桑娜红掌作为试验材料,其叶色浓绿、光亮,佛焰苞鲜红色,花序黄色,在市场上深受广大消费者喜欢。  1.2试验设计  将外植体先用流水洗净,再用无菌水冲洗2次,用75%无水乙醇浸泡30s,接着用无菌水冲洗3次,再用消毒液HgCl2浸泡6~10min后用无菌水冲洗4次。在超净工作台上将幼叶切成带主叶脉的大小为1.5cm×1cm的长方块,将茎段和叶柄切为长为1cm的小段,然后将外植体接种到预先做好的培养基上,生物学下端向下。  试验主要研究外植体取材部位、消毒液HgCl2浓度、消毒时间对接种效果的影响。外植体选择植株展叶两周的幼叶、茎段

5、和叶柄3种,消毒液HgCl2浓度选择0.10%、0.15%、0.20%,消毒时间选择6、8、10min[3],每种处理30瓶,试验重复3次。统计外植体的成活率、死亡率、污染率。  2结果与分析  2.1不同取材部位对外植体接种效果的影响4  分别取红掌幼叶、茎段和叶柄3种外植体进行接种试验,其成活率、死亡率、污染率结果如图1所示。由图1可以看出,茎段成活率最低,明显低于幼叶和叶柄;茎段和叶柄死亡率较低,明显低于幼叶;茎段污染率明显高于幼叶和叶柄,而幼叶又低于叶柄。这可能跟红掌长期生活在高温高湿的环境中,在茎段表面滋生大量细菌有关[4],叶柄次之,幼叶细菌相对较少,通过消毒,幼叶表面细菌较易去除

6、,因此污染率较低,而茎段表面细菌完全去除相对较困难,因此污染率高于幼叶;但幼叶在消毒处理过程中,比茎段和叶柄更易受到伤害。因此,在生产中叶柄更为适合作为红掌组培的外植体。  2.2不同HgCl2浓度对外植体接种效果的影响  分别用浓度为0.10%、0.15%、0.20%的HgCl2处理外植体,其成活率、死亡率、污染率结果如表1所示。从表1可以看出,0.10%的HgCl2处理后的外植体成活率明显高于0.15%和0.20%处理,死亡率明显低于0.15%和0.20%处理,污染率略高于0.15%和0.20%处理。结果表明,提高HgCl2浓度,可以降低污染率,但对细胞组织具有伤害作用。因此,消毒液HgC

7、l2浓度选择0.10%。  2.3不同消毒时间对外植体接种效果的影响  分别选择6、8、10min的消毒时间处理外植体,其成活率、死亡率、污染率结果如表2所示。从表2可以看出,随着消毒时间的延长,外植体成活率先升后降,消毒8min成活率最高。从6min到8min外植体死亡率升高并不明显,但从8min到10min死亡率升高明显,消毒时间越长,死亡率升高越明显;随着消毒时间的延长,污染率降低,从6mi

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