番茄红素分离纯化研究

《番茄红素分离纯化研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、番茄红素分离纯化研究　　摘要：以5%番茄红素粉为原料，研究了应用不同型号树脂对番茄红素进行分离纯化的效果。结果表明，不同型号树脂对番茄红素的分离纯化效果不同，其分离纯化效果顺序为X-5>AB-8>S-8>离子交换树脂，最适静态吸附样液浓度为0.03g/L、最适静态解吸时间为1h、最适动态上样速度为2BV/h、最适洗脱剂为乙酸乙酯。番茄红素经X-5吸附后，以乙酸乙酯为洗脱剂，可将番茄红素浓缩5.9倍，具有良好的富集纯化效果。　　关键词：番茄红素；分离纯化；大孔树脂　　中图分类号：TS202.3；R284.2文献标识码：A文章编号：0439-8114（

2、2016）18-4787-03　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.18.038　　番茄红素是人类自身不能合成，而由植物和微生物合成的一种天然色素，是目前在自然界的植物中被发现的最强抗氧化剂之一，对人体具有预防癌症、延缓衰老、保护心脑血管等功用[1]，人们主要通过食用番茄摄入番茄红素。　　当前，人们常见以氯仿、丙酮、正乙烷等有机溶剂作为提取剂从番茄果实中提取番茄红素[2]，再采用皂化纯化法、溶剂纯化法、HPLC法、重结晶法和柱层析法等方法进一步分离纯化番茄红素。本试验拟以5%番茄红素粉为原料，研究不同型号

3、树脂对番茄红素的分离与纯化效果，为进一步研究利用番茄红素提供科学根据。6　　1材料与方法　　1.1试验材料　　试验所用材料为番茄红素粉（5%），购自陕西森弗高科实业有限公司；大孔吸附树脂（X-5、AB-8、S-8、离子交换树脂）。　　1.2试剂与仪器　　试验所用试剂主要有：乙酸乙酯（AR）、丙酮（AR）、石油醚（AR）、乙醇（95%）、去离子水（自制）。　　试验所用主要仪器：VIS-7220型可见分光光度计，北京瑞利分析仪器公司；AL204型电子天平，梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司；层析柱（1.6cm×30cm）；旋转蒸发器；真空泵；烘箱；HL

4、-2B型数显恒流泵；电脑全自动部分收集器。　　1.3方法　　1.3.1番茄红素提取液制备准确称取番茄红素粉（5%）0.05g，用乙酸乙酯溶解后，定容至500mL。　　1.3.2最大吸收波长的确定将所制备的番茄红素提取液稀释一定倍数，选用1cm比色皿在波长为400～700nm进行可见光吸收光谱扫描。　　1.3.3大孔吸附树脂的预处理将树脂用清水漂洗干净后，用80%乙醇浸泡24h以除醇溶性有机物，滤干，再用蒸馏水洗涤，滤干，用2mol/LHCl溶液浸泡4h，再用蒸馏水洗涤至中性，滤干，用2mol/LNaOH溶液浸泡4h，再用蒸馏水洗涤至中性，备用。　　

5、1.3.4静态分离纯化条件筛选　　1）吸附剂的选择。取已经活化的X-5、AB-8、6S-8、离子交换树脂5.0g于250mL锥形瓶中，分别加入30mL番茄红素提取液避光振荡吸附4h，测定A502nm[3]，了解各树脂对番茄红素的吸附速度，确定最佳吸附时间和吸附剂。　　2）样液浓度的选择。取已经活化的X-55.0g，加入不同浓度的番茄红素提取液避光振荡吸附4h，测定A502nm，计算吸附率，确定最佳样液浓度。　　3）解吸时间的选择。各大孔树脂吸附完成后，倒去上层清液，加入乙酸乙酯40mL，25℃水浴振荡3h，每隔0.5h取解吸液分别稀释适当倍数后，测

6、定A502nm并计算解吸率。　　1.3.5动态分离纯化的选择　　1）上样速度的选择。取已经活化的X-55.0g装填层析柱，取稀释一定倍数的番茄红素提取液30mL，以0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0BV/h速度上样，10min后测定流出液的吸光度A502nm，确定最佳上样速度。　　2）洗脱剂的选择。取稀释一定倍数的番茄红素提取液以2mL/min速度上样，分别以95%乙醇、丙酮、石油醚、乙酸乙酯为洗脱剂进行洗脱，洗脱液连接自动部分收集器，速度为1min/管，每隔一管测定A502nm，绘制洗脱曲线。　　1.3.6吸附及解析效果评价[4]　　

7、吸附率E=■×100%　　解吸率D=■×100%　　式中，A0为吸附前溶液的吸光度；Ae为吸附完成后溶液的吸光度；An为洗脱液的吸光度。6　　2结果与分析　　2.1不同树脂对番茄红素的静态吸附曲线　　X-5、AB-8、S-8、离子交换树脂中分别加入30mL番茄红素提取液避光振荡吸附4h，每隔0.5h测定提取液的A502nm，结果如图1所示。由图1可见，X-5、AB-8、S-8、离子交换树脂中分别加入30mL番茄红素提取液避光振荡吸附，提取液的吸光度逐渐降低，在4h内X-5的降低速度和幅度最大，吸附效果最佳，3h左右吸附基本完成。其次为AB-8，S-

8、8。离子交换树脂的吸附效果则较差，因此后续试验选择X-5。　　2.2番茄红素浓度的选择　　不同浓度的番茄红素提取液经X-5