油菜茎基溃疡病菌与黑胫病菌菌丝的生长动态

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1、油菜茎基溃疡病菌与黑胫病菌菌丝的生长动态　　摘要：比较了油菜茎基溃疡病菌（Leptosphaeriamaculans）和油菜黑胫病菌（L.biglobosa）在不同培养温度和2种培养基上的菌丝生长动态。结果表明，在PDA和V8培养基平板上都生长良好，油菜茎基溃疡病菌培养温度在28℃时，油菜黑胫病菌培养温度在25℃或28℃时，在PDA平板上菌丝生长最好；油菜黑胫病菌与油菜茎基溃疡病菌菌落生长速度相比，在最适培养温度（25℃或28℃）和相同的培养时间（21d）内，二者在PDA平板上的菌落生长速度分别为5～7mm/d和2.0mm/d，前者的菌落直径约90mm，是后者的2

2、倍。因此，在温度为25℃或28℃的条件下，PDA培养基最适合这2种病菌的生长。　　关键词：油菜茎基溃疡病菌（Leptosphaeriamaculans）；油菜黑胫病菌（L.biglobosa）；菌丝生长　　中图分类号：S435.654文献标识码：A文章编号：0439-8114（2016）18-4708-03　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.18.021　　油菜茎基溃疡病菌（Leptosphaeriamaculans）和油菜黑胫病菌（L.6biglobosa）均为茎点霉属真菌，可引起油菜严重的病害[1-6]。由于频繁的

3、油菜国际间贸易，黑胫病原菌目前已扩散到世界多数油菜生产国，导致病害的发生。油菜的子叶、真叶、茎秆、根以及荚果等都有可能被黑胫病原菌侵染，其中以叶片和茎基部的感染症状最为常见[6]。油菜茎基溃疡病菌可在十字花科植物上广泛传播，在叶片和茎秆上形成典型的茎点病斑，继而在主茎及分枝上形成黑色的条状茎腐病斑，造成幼苗或成株死亡，导致菜子产量和品质的下降[4，7]。现已成为世界性的重要病害。为此，本试验对这2种病菌在不同培养平板上的培养特征进行了研究，以便找到快速培养这2种病菌的方法[2，5]。　　1材料与方法　　1.1菌株来源　　本试验所用油菜黑胫病菌XGL-1、SS-13

4、（根）、10ZJ-1（茎）、SYL-2B（叶）菌株为华中农业大学李国庆教授所提供。油菜茎基溃疡病菌的阳性对照分离物为湖北出入境检验检疫局收藏的标准菌株ATCC60737。　　1.2菌株的分离纯化　　将菌株ATCC60737、XGL-1、SS-13（根）、10ZJ-1（茎）、SYL-2B（叶）直径5mm的菌丝碟片接种到马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基平板中央，于25℃培养，10～15d后挑取其产生的分生孢子器，在20℃下进行纯化培养，观察菌丝的生长状况。　　1.3油菜黑胫病菌最适生长温度的筛选　　在活化14d的SS-13（根）、10ZJ-1（茎）、SYL-2B（叶）

5、的PDA培养基平板边缘取直径5mm的菌丝碟片，分别接种于PDA培养基平板中进行不同温度的恒温黑暗培养。试验设置5个温度梯度，4、10、15、25、30℃，每个温度每种菌株5皿，每3～5d观察记录菌丝的生长状况，取平均值。　　1.4两种病菌生长速度比较　　在活化14d的ATCC60737、XGL-1的PDA培养基平板边缘取直径56mm的菌丝碟片，分别接种于PDA和V8培养基平板中进行不同温度的恒温黑暗培养。试验设置4个温度梯度15、20、25、28℃，每个温度每种菌株5皿，每3～5d观察记录菌丝的生长状况，取平均值。　　2结果与分析　　2.1油菜黑胫病菌最适生长温度

6、筛选　　不同油菜植株部位分离的油菜黑胫病菌菌株SS-13（根）、10ZJ-1（茎）、SYL-2B（叶）在5个温度（4、10、15、25、30℃）、黑暗、PDA平板上的菌丝生长速度见图1。由图1可知，最适生长温度为25℃，菌落扩展速度约为5.0mm/d。同种培养条件下，分离自根部的菌株（SS-13）菌丝生长最快，但各菌株的菌落扩展速度无明显差异。结果表明，油菜黑胫病菌不同部位分离的菌株在油菜生长期均可侵染，该病菌在离体条件下生长较快，培养初期产生绒毛状白色菌丝，呈直线式生长，产生很少短的分枝，菌落规则，分生孢子器主要形成于菌落中央，菌丝的气生部分形成黄色或褐色液体小

7、滴，在PDA培养基上释放深棕色色素。　　2.2油菜茎基溃疡病菌ATCC60737在不同培养基上的生长速度　　油菜茎基溃疡病菌在4个不同温度下黑暗培养时发现，该病菌在PDA和V8平板上生长良好，生长速度较稳定，在平板上释放黑色色素，形成白色平坦菌落，气生菌丝短小，有较多的分支菌丝，形成分生孢子器相对较少。当温度为25℃时，该病菌的菌落在PDA平板上扩展速度约为1.8mm/d，在V8平板上约为1.4mm/d；当温度为28℃时，该菌落在PDA平板上扩展速度增加至2.0mm/d，在V8平板上扩展速度增加至1.8mm/d。因此，油菜茎基溃疡病菌的最适生长温度为28℃6，最适

8、培养基为P