聚己内酯胶原支架纳米纤维方向对小鼠mc3t3-e1成骨前体细胞的形态,增值和分化的影响

《聚己内酯胶原支架纳米纤维方向对小鼠mc3t3-e1成骨前体细胞的形态,增值和分化的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、聚己内酯/胶原支架纳米纤维方向对小鼠MC3T3-E1成骨前体细胞的形态、增值和分化的影响路菊[通迅作者]xxx，电话:(023)68752348，E—mail：(400038重庆，第三军医大学科研部生物医学分析测试中心)[摘要]目的：探讨聚己内酯/胶原（PCL/COL）纳米纤维方向对小鼠成骨前体细胞（MC3T3-E1）的形态，增殖，分化的影响。方法：通过扫描电子显微镜（SEM）对非取向和取向的PCL/COL纳米纤维支架的形貌进行观察;将MC3T3-E1细胞接种在非取向与取向的PCL/COL纳米纤维支架上，通过SEM及激光共聚焦

2、显微镜(LSCM)观察细胞在两组材料上的生长形态，CCK-8法检测细胞在两组材料上的增殖情况，RealtimeRT-PCR检测细胞在两组材料上成骨分化的功能性基因Ⅰ型胶原（COLⅠ）、碱性磷酸酶（ALP）、骨钙素（OCN）的表达情况。结果：非取向PCL/COL纳米纤维支架的纤维方向无规则，取向PCL/COL纳米纤维支架的纤维方向相同,两者纤维直径差异无统计学意义(p>0.05)，分别为586±239nm和625±155nm);SEM及LSCM检测结果显示MC3T3-E1细胞在非取向的纳米纤维上成多边形生长，细胞骨架呈不规则形态

3、，而在取向纳米纤维上成纺锤形生长，且细胞骨架沿纳米纤维方向整齐排列；CCK-8检测结果显示在1、3、5和7dMC3T3-E1细胞在非取向与取向PCL/COL纳米纤维支架上的增殖率比较差异无统计学意义(p>0.05);RealtimeRT-PCR检测结果显示MC3T3-E1细胞在两组材料上COLⅠ表达水平比较差异无统计学意义(p>0.05)，而细胞在非取向组较在取向组上能表达更多的ALP和OCN，比较差异均有统计学意义(p<0.05)。结论：非取向和取向的PCL/COL纳米纤维支架均能提供了一个良好的微环境利于MC3T3-E1细

4、胞的生长、增值，同时非取向PCL/COL纳米纤维支架较取向PCL/COL纳米纤维支架更有利于MC3T3-E1细胞的成骨分化，是一种有应用前景的骨组织工程支架材料。[关键词]聚己内酯/胶原；纳米纤维；MC3T3-E1细胞；方向Theeffectofpoly(ε-caprolactone)/collagennanofiberorientationonMC3T3-E1preosteoblastmorphology,proliferation,anddifferentiationLuJu(BiomedicalAnalysisCente

5、r，ThirdMilitaryMedicalUniversity，Chongqing400038，China)[Abstract]Objective:Toexploretheeffectofpoly(ε-caprolactone)(PCL)/collagen(COL)nanofiberorientationonmousepreosteoblastcells(MC3T3-E1)morphology,proliferation,anddifferentiation.Methods:Themorphologiesoftherando

6、mandalignedPCL/COLnanofiberscaffoldswereobservedbyscanningelectronmicroscopy(SEM);MC3T3-E1cellswereculturedontherandomandalignedPCL/COLnanofibersscaffoldstostudytheeffectsoffiberorientationoncellmorphologythroughSEMandlaserconfocalmicroscope(LSCM),Toevaluateprolifer

7、ation,7numbersofviablecellsweremeasuredusingtheCellCountingKit-8(CCK-8),ToexplorehowMC3T3-E1senseandrespondtodifferentscaffolds,real-timeRT-PCRwasusedtotestifytheexpressionofosteogenicmarkergenes(includingcollagentypeⅠ(COLⅠ),alkalinephosphatase(ALP)andosteocalcin(OC

8、N)).Results:TherandomPCL/COLnanofibersshowedisotropicfiberalignments,thealignedPCL/COLnanofibersexhibitedanisotropicfiberalignments.Thedif