培养基1005班吴郡

《培养基1005班吴郡》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、培养基化药1005100150136吴郡一.配制原则（1）目的明确：在设计培养基前要明确所培养菌种；所获取的产物；用作实验室研究还是大生产；作一般研究还是做精密的生理、生化或遗传学研究；用作种子培养基还是发酵培养基;是生产含氮量低的发酵产物还是生产含氮量高的产物。根据不同的目的运用不同的知识。（2）营养协调：对微生物细胞组成元素的调查或分析，是设计培养基时的重要参考依据，微生物细胞内各种成分间有一较稳定的比例。因此，在大多数为化能异养微生物配制的培养基中，除水分外，碳源的含量最高，其后依次是氮源

2、、大量元素和生长因子。他们间大体上存在着10倍序列的递减趋势。真菌需要碳氮比较高，细菌尤其是动物病原菌需碳氮比较低。（3）理化适宜：理化适宜是指培养基的PII、渗透压、水活度和氧化还原电势等物理化学条件较为适宜。（4）经济节约在生产实践中应做到:①以粗代精②以〃野〃代〃家〃③以废代好④以简代繁⑤以氮代月元⑥以纤代糖⑦以姪代粮⑧以〃国代进〃。二.培养基的作用培养基是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料。三.分类：（一）按对培养基成分的了解分类①天然培养基:指一类利用动、植物或微生物

3、体包括其提取物制成的培养基。如牛肉膏蛋白月东培养基、麦芽汁培养基等。②组合培养基:又称合成培养基或综合培养基，是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。③半组合培养基:又称半合成培养基指一类主要以化学试剂配制，同吋还加有某种或某些天然成分的培养基。例如，马铃薯苛糖培养基。(-)按培养基外观的物理状态作分类①液体培养基:各营养成分按一定比例配制而成的水溶液或液体状态的培养基称为液体培养基。工业上绝大多数发酵都采用液体培养基。实验室屮微生物的生理、代谢研究和获取大量菌体也常

4、用液体培养基。②固体培养基:一般是指液体培养基中加入一定量的凝固剂配制而成的固体状态的培养基。包括固化培养基，非可逆性培养基天然固态培养基，滤膜。在发酵工业中常用固体培养基进行固体发酵。③半固体培养基:半固体培养基是指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配成的半固体状态培养基。④脱水培养基:又称脱水商品培养基或预制干燥培养基，指含有除水以外的一切营养成分的商品培养基，使用时只要加入适量水分并加以灭菌、分装即可，是一类既有成分精确又有使用方便等优点的现代化培养基。（三）按培养基对微生物的功能分类①选择

5、培养棊：类根据某微牛物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素抗性的原理而设计的培养基，具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能，广泛用丁•菌种筛选等领域。②鉴别培养基:一类在成分中加有能与目的菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而达到只需用肉眼辨别颜色就能方便地从近似菌落屮找出目的菌菌落的培养基。最常见的鉴别性培养基是伊红美蓝乳糖培养基。四.常见配方1.放线菌培养基:①淀粉硝酸盐培养基：溶性淀粉2.Og硝酸钾0.lg磷酸氢二钾0.05g氯化钠0.05g硫酸镁0.05g硫酸亚铁0.001g琼脂2

6、g水100ml先把淀粉放在烧杯里，用5毫升水调成糊状后，倒入95毫升水，搅匀后加入其他药品，使它溶解。在烧杯外做好记号，加热到煮沸时加入琼脂，不停搅拌，待琼脂完全溶解后，补足失水。调整pH值到7.2〜7.4,分装后灭菌，备用。2.细菌培养基：①牛肉膏琼脂培养基：肉膏0.3只,蛋白月东1.0g,氯化钠0.5g,琼脂1.5g,水100ml在烧杯内加水100毫升，放入牛肉膏、蛋白月东和氯化钠，用蜡笔在烧杯外作上记号后，放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后，加入琼脂，不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足

7、失水，用10%盐酸或10%的氯化钠调整pH值到7.2〜7.6,分装在各个试管里，加棉花塞，用高压蒸汽灭菌：1.05千克每平方厘米、121摄氏度维持15到30分钟。②马铃薯培养基：新鲜牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀细细剁成肉末后，加入500毫升蒸懈水和5克蛋白月东。在烧杯上做好记号，煮沸，转用文火炖2小时。过滤，滤出的肉末干燥处理，滤液pH值调到7.5左右。每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心，灭菌，备用。3•真菌培养基:萨市培养基：白月东10g琼脂20g麦芽糖40g水1000ml

8、先把蛋白豚、琼脂加水后，加热，不断搅拌，待琼脂溶解后，加入40g麦芽糖（或葡萄糖），搅拌，使它溶解，然后分装，灭菌，备用。五•微生物的分离和纯培养分离方法：细胞挑取法平板画线法纯化方法：①根据要分离菌的特性，找适合的初筛培养基，找到要纯化的菌。②若知道日标菌的形态，可以直接挑混合菌划平板，直到长出当个菌落，并且在镜下没有杂菌即可；或者挑菌稀释涂布得到单个菌落也行。稀释混合平板法：与稀释涂布平板法基本相同，无菌操作也一样，所不同的是先分别吸取0.5mll010110"稀释度的土壤悬液对号放入平皿