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1、细胞生物学囊泡转运研究研究历史报告第十组生物科学(2)班组员:任康曹安心张平李阳端蒋信明刘远文田合飞囊泡形成的研究丿力史(刘远文)囊泡运输的研究历史(曹安兴)囊泡锚定与融合的研究历史(田合飞)囊泡运输异常与那些疾病有关(蒋信明)PPT制作(仁康、李阳端)资料整理(张平)(-)囊泡形成的研究历史某些两亲性分了,如许多天然的合成的表面活性剂及不能简单缔合成胶团的磷脂,分散于水中时会白发形成一类具有封闭双层结构的分子有序组合体,称为囊泡(vesicle)也称为脂质体。形成囊泡的结构:囊泡可以认为是个鬪形的球壳,具冇几百到几T埃的直径和50埃左右的厚度。每个典型的囊
2、泡含有80000到100000个两亲分子。囊泡的双分子膜具有以下特征:囊泡的双分子膜的厚度仅为5()埃;在一段时间内囊泡是稳定的,可以川凝胶色谱柱和离心方法进行分离;对于水溶性化合物,双分了膜可以将其有效地分开,而水可以自由穿透狗双层膜;疏水性化合物课溶解在囊泡的疏水双分子膜屮;在20-50°CZ间存在着相对平衡。将囊泡谁溶液分为九个区域,⑴外部水域;[2]外部端基邻近的水域⑶外部端基区;[4]靠近外部端基区的疏水膜区;[5]疏水膜的内部;[6]靠近内部端呈区的疏水膜区;[7]内部端基区;[8]内部端基邻近的水域;[9]内部水域。囊泡的研究丿力史:1965年
3、英国学者用超声波的手段将干磷脂分散于水小制备得到多实脂质体,并证明每层均为双分子脂质膜11被水隔开,其厚度越为4nm,这标志着人工制备脂质体、囊泡研究的开始。1977年科学家发现由合成的表明活性剂双十二烷基二甲基漠化桜经过超声波处理野可以得到闭合双层膜结构。1989年科学家从复配的阴阳离了表面活性剂体系得到了自发形成的。(二)囊泡运输的研究历史囊泡运输既是生命活动的基本过程,乂是一个极其复杂的动态过程,在高等真核生物中尤其如此,涉及到许多利啖的蛋口质和调控因子。囊泡运输一般包括出芽、锚定和融合等过程,需耍货物分子、运输复合体、动力蛋白和微管等的参与以及多种分
4、子的调节。细胞内的囊泡运输系统,就好比一个城市的交通运输系统,各种具冇动力(即动力蛋白)的不同车辆(即运输复合体)装载着所运输的不同货物(即囊泡上的货物分了),按照指定的行驶路线(即微管)抵达目的地后,完成货物的卸载。一个城市的良好交通运输状况,需要精细的交通控制(即调节分子)。如來控制得不好,某些地方就会出现交通拥堵,严重吋整个城市的交通都会瘫痪。当类似悄况出现在我们的细胞内时,这些细胞就无法实现正常功能,甚至会因而死亡。现有的研究表明,细胞内可能存在精确调控货物分选与运送的一套指令,由货物分子、运输复合体、动力蛋白、运输轨道及相关调节因子共同组成,称之为
5、“运输密码”。解码这套指令,对于理解细胞功能和住命活力至关重要。这有赖于多学科交叉(如物理、化学、生物等)和新技术发展(如新一•代显微成像技术),以实现对细胞内的囊泡运输过程的实吋和长时程监控。(三)囊泡锚定和融合研究历史应用荧光探针法研究双(刀桂酸)三乙醇胺酯形成囊泡的融合动力学过程,工作中合成和应用了含长烷基链的荧光探针一十六烷基罗丹明B,以保证其进入囊泡的双分子层,随着融合的进行,探针浓度被稀释,探针分子逐渐由二聚体离解成为单体,从而使其荧光强度增强.研究发现,山双(月桂酸)三乙醇胺酯形成的囊泡,其融合速率和膜结构与介质酸度、环境温度等密切相关,当介质
6、酸度处于一定的pH范围时,形成的囊泡膜具有最致密的结构,其融合也最慢。受到广泛关注的神经递质的释放是通过突触囊泡与突触前膜的融合完成的•通过对■单个囊泡动力学的分析发现,在突触囊泡分泌过程中除了〃完全融合"(fullfusion)模式外,述存在着"部分融合即离开"(kissandrun)和"部分融合且停留"(kissandstay)两种融合模式.在神经元受到强烈刺激时,这两种分泌模式尤为重要•同时突触囊泡融合前的转运、锚定、激活过程在神经递质的释放和调节过程中起着很关键的作用•在高K+刺激下的PC12细胞中,我们运用全内反射荧光显微镜(totalintern
7、alreflectionfluorescencemicroscopy,TIRFM)技术,通过VAMP2-pHluorin和VAChT-TDimer2双色荧光成像的方法跟踪类突触小囊泡(synapticvesicle-likemicrovesiclos,SLMVs)的锚定和融合过程.结果表明,在高K+刺激的PC12细胞中,部分融合即离开这种分泌模式占主导地位,同时发现在高K+刺激FSLMVs在细胞膜上的停留时间增加了,说明被激活囊泡的囊泡数量增加•牛•物膜构成细胞之间以及细胞内各细胞器Z间的屏障,使一些更要住命活动在相对独立的空间内进行。这些独立的空间Z间需要
8、进行物质的交流,形成细胞内的物流系统。细胞内物质运输
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