高中生物 专题2 动物细胞工程 2_4 动物细胞融合与单克隆抗体课件 新人教版选修31

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1、2.4动物细胞融合与单克隆抗体2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体植物细胞A植物细胞B去掉细胞壁去掉细胞壁原生质体A原生质体B原生质体融合杂合的原生质体再生出细胞壁杂种细胞细胞分裂分化发育愈伤组织杂种植株温故知新:植物体细胞杂交过程材料1:1970年，有两位科学家做了一个人—鼠细胞融合的实验，以证明细胞膜的流动性。那么，如何实现人—鼠细胞的融合，动物细胞融合后还有什么用途呢？人-鼠(想像图)科幻电影对人-鼠杂交种的想像合作探究：一、动物细胞融合如何实现人—鼠细胞的融合？阅读教材52页相关内容，思考下列问题：1、动物细胞融合的概念是什

2、么？2、动植物细胞在结构上有何区别？这对它们杂交或融合过程有什么影响？3、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？那动物细胞融合呢？为什么可以使用灭活的病毒促进动物细胞融合？不灭活的病毒能作为诱导剂吗，为什么？不同DNA的两个细胞融合有丝分裂两个完整的杂交细胞灭活的病毒？这是什么？？？用灭活的病毒诱导动物细胞融合的过程2.过程：动物细胞A动物细胞B诱导、融合杂合的细胞有丝分裂2个完整的杂交细胞AB5、植物体细胞杂交可得到杂种植株，动物细胞融合后能象电影上一样形成杂种动物个体吗?为什么？植物细胞A植物细胞B去掉细胞壁去掉细胞

3、壁原生质体A原生质体B原生质体融合杂合的原生质体再生出细胞壁杂种细胞细胞分裂分化发育愈伤组织杂种植株4、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同？是什么原理？融合的过程一样吗？你能参照植物细胞杂交过程写出动物细胞融合过程吗？6、动物细胞融合的意义？应用意义：突破有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。应用：1、成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。2、为制造单克隆抗体开辟了新途径。鼠—鸡、鼠—兔、鼠—猴、人—鼠、人—兔、人—鸡、人—蛙、酵母菌—鸡、人—胡萝卜等获得杂种植株物理、化学方法（同左）灭活的

4、病毒物理（离心、振荡、电激）化学（聚乙二醇）直接诱导细胞融合细胞膜的流动性细胞膜的流动性结果诱导方法融合过程融合的原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目植物、动物细胞融合的比较获得杂种细胞小结7去壁诱融生壁组培材料1：在基因工程中,采用抗原-抗体杂交法检测基因表达产物需用到纯度很高的抗体。材料2：传统获得抗体的方法：把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体。用这种方法获得的抗体，不仅产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不够灵敏。思考：1、抗体由哪种细胞产生的？2、抗体的传统生产方法的缺陷是什么？3、能否通过

5、相应效应B细胞体外培养的方式大量获得抗体?不能：原因是在体外培养的条件下效应B细胞不能无限增殖。合作探究：二、单克隆抗体的制备材料3：效应B淋巴细胞在体内只能由B淋巴细胞增殖分化而来,不再进行分裂,在体外培养的条件下，也很难分裂。提示：1.什么细胞可以产生抗体？2.什么细胞可以无限增殖？思考：用什么方法才能让B淋巴细胞在体外培养时既能产生抗体又能无限增殖?B淋巴细胞与癌细胞融合材料4：每一个效应B细胞只分泌一种特异性抗体材料5：1975年,米尔斯坦和柯勒首先将抗原注射入小鼠体内，然后从小鼠脾脏中获得能够产生抗体的B淋巴细胞，与小鼠

6、骨髓瘤细胞融合，得到多种杂交细胞。在特定的选择性培养基中可筛选出杂交瘤细胞。经过再次筛选和抗体检测,得到能产生特定抗体的杂交瘤细胞。但纯度达不到100%。对单一杂交瘤细胞进行克隆培养,获得足够数量的细胞，在体外培养或注射到小鼠体内增殖。从细胞培养液或小鼠的腹水中，可提取出大量抗体。（由于产生抗体的细胞来自一个杂交瘤细胞,故产生的抗体称为单克隆抗体.）请根据以上材料,讨论设计单克隆抗体制备过程图.讨论：注射抗原效应B细胞骨髓瘤细胞融合多种杂交瘤细胞选择性培养基筛选1抗原-抗体杂交法克隆化培养筛选2效应B细胞小鼠注射抗原骨髓瘤细胞融合

7、多种杂交细胞选择性培养基筛选1多种杂交瘤细胞能产生特定抗体的杂交瘤细胞筛选2克隆化培养抗体检测体外培养小鼠腹腔内增殖单克隆抗体杂交瘤细胞特点：既可以产生特异性抗体，又可以大量增殖多种杂交细胞克隆化培养抗体检测B淋巴细胞注射特定抗原蛋白骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞融合多种杂交细胞在具有筛选作用的培养基上培养专一抗体检验阳性克隆上述杂交细胞单克隆抗体的制备过程分开不同杂交细胞，克隆专一抗体，检验阳性细胞专一抗体检验阳性单克隆抗体注射到小鼠体内体外培养单克隆抗体思考以下问题：1、如何获得效应B细胞？融合细胞几种类型？2、本过程中进行了两次筛

8、选，目的分别是什么？第1次筛选要淘汰哪些细胞？3、本过程利用的那些技术？4、杂交瘤细胞有何特点？5、如何培养杂交瘤细胞并提取单克隆抗体？（6）拓展阅读：如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化养？融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的细胞就是杂交瘤