高中生物 专题1 基因工程 1_2 基因工程的基本操作程序(预)(基础版,含解析)新人教版选修3

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1、“讲忠诚、严纪律、立政德”三者相互贯通、相互联系。忠诚是共产党人的底色,纪律是不能触碰的底线,政德是必须修炼的素养。永葆底色、不碰底线专题1基因工程1.2基因工程的基本操作程序(预)【预习目标】基因工程原理及基本操作程序【知识点梳理】一、基因工程的基本操作程序1.目的基因主要是指编码蛋白质的结构基因。2.获得目的基因的方法:⑴从基因文库中获取目的基因①基因文库的含义将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。基因组文库:含有

2、一种生物的所有的基因部分基因文库:含有一种生物的一部分基因,如cDNA文库。②种类③目的基因的获取依据:基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA,以及基因的表达产物蛋白质。⑵利用PCR技术扩增目的基因①PCR的含义:是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。②前提条件:有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据该序列合成引物。③过程:目的基因DNA受热变性后解链为单链,引物与单链相应互补序列结合,然后在DNA聚合酶作用下进行延伸。④扩增方式:指数扩增,数量约

3、为2n(n代表扩增循环的次数)⑶人工合成法:若基因比较小,核苷酸序列又已知,可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。二、基因表达载体的构建1.表达载体的组成:启动子、目的基因、终止子、标记基因2.表达载体的功能:⑴使目的基因在受体细胞存在,并且可以遗传给下一代。⑵使目的基因能够表达和发挥作用。三、目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞是实施基因工程的第三步。目的基因进入受体细胞,并且在受体细胞内政德才能立得稳、立得牢。要深入学习贯彻习近平新时代中国特色社会主义思想特别是习近平总书记关于“立

4、政德”的重要论述,深刻认识新时代立政德的重要性和紧迫性。“讲忠诚、严纪律、立政德”三者相互贯通、相互联系。忠诚是共产党人的底色,纪律是不能触碰的底线,政德是必须修炼的素养。永葆底色、不碰底线维持稳定和表达的过程,称为转化。1.将目的基因导入植物细胞⑴方法:农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法。⑵农杆菌转化法机理:农杆菌易感染双子叶植物和裸子植物,对多数单子叶植物没有感染力。当植物体受损伤时,伤口处的细胞会分泌大量酚类化合物,吸引农杆菌移向这些细胞。这时农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细

5、胞,并整合到受体细胞染色体的DNA上。2.将目的基因导入动物细胞⑴常用方法:显微注射技术。3.将目的基因导入微生物细胞⑴由于原核生物繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等,因此,早期的基因工程操作都用原核生物作为受体细胞。⑵感受态法:首先用Ca2+处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态,这种细胞称为感受态细胞。第二步是将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液与感受态细胞混合,在一定温度下促进感受态细胞吸收DNA分子。四、目的基因的检测与鉴定1.检测及方法⑴检测转基因生物的染色体DN

6、A上是否插入了目的基因,这是目的基因能否在真核生物中稳定遗传的关键。检测方法是采用DNA分子杂交技术。⑵检测目的基因是否转录出mRNA,这是检测目的基因是否发挥功能作用的第一步。采用分子杂交技术。⑶检测目的基因是否翻译成蛋白质,使用抗原-抗体杂交。2.鉴定:除了上述的分子检测外,有时还需要进行个体生物学水平的鉴定。如抗虫,抗病鉴定等。【课前热身】1.基因工程的正确操作步骤是()①使目的基因与运载体结合②将目的基因导入受体细胞③目的基因的表达和检测④提取目的基因A.③②④①B.②④①③C.③④①②D

7、.④①②③【答案】D【解析】基因工程的正确操作的基本步骤是:提取目的基因、政德才能立得稳、立得牢。要深入学习贯彻习近平新时代中国特色社会主义思想特别是习近平总书记关于“立政德”的重要论述,深刻认识新时代立政德的重要性和紧迫性。“讲忠诚、严纪律、立政德”三者相互贯通、相互联系。忠诚是共产党人的底色,纪律是不能触碰的底线,政德是必须修炼的素养。永葆底色、不碰底线目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的表达和检测,所以,A、B、C三项均错误,D项正确。考点:本题考查基因工程操作步骤的相关

8、知识,意在考查学生能理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。2.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草的过程中,下列操作错误的是()A.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体B.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸C.将重组DNA分子导入烟草体细胞D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞【答案】B【解析】用限制性核酸内切酶切割目的基因,是抗除草剂基因,不是烟草花叶病毒的基因,B项错误。3.哪项不是基因表达载体的组成部分()A.启动子B.终止密码C.标记基因D.目

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