论文撰写模板5、正文

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1、黑体二号居中,行间距21磅,段前后间距12、18磅第一章前言1.1发展生化“下游”技术的意义“第一•章”与“前言”及“前”与“言'Z间均加两个空格,根据人标题字数多少适当调整现代生物技术的迅猛发展使当今世界发生了日新月异的变化。迄今为止,人们已经能够设计、制造、生产多种具有重要价值的蛋白质,如胰岛素(insulin)、白细胞介素(interleukin)、干扰素(in[cron)、促红细胞生长素(EPO)和肿瘤坏死因子(TNF)等。1.2,基因工程蛋白质分离纯化的原则加空格正文部分:宋体小四,行间距21磅,段前后间距为0必须考虑到产品的变性和活性恢

2、复等问题。如不同技术来改进分离工艺。…般认为,要实现高纯度和低成本必须做到以下几点:生物产品有许多使生物高分子,果选取的条件合适,也可以通过基因工程蛋口质分离纯化的高效率、①使用温和、高效的方法;②尽可能地减少操作步骤;③减少化学和生化试剂地使用。Prokopakis等提出了优化分离纯化步骤的基本规则,用以指导分离纯化操作标题另起一行居右,黑体四号,行距21磅,段前后间距均为12磅的改进。具体规则如下:①选择分离操作必须基于产品的物理化学性质和生化性质;②高产量的杂蛋白必须要除去;③最高效率地利用ri标产物与杂质间地理化性质差异;④尽可能地将高效的

3、步骤放在前而;⑤把操作最困难的步骤放在最后山2]。'/体Timesnewroman»小四,右上角标1.3现有白细胞介素一13的分离纯化方法1993年,Mckcnzic首次提出白细胞介素一13(IL-13)的名字,此后,人们逐渐发现了IL-13的许多生物学活性:刺激前髓样细胞(TF—1)的增殖,直接诱导原始造血前体细胞(Lin'Sca-l4)的增殖及分化;……第二章实验材料与方法2.1概述本论文主要从IL-13地分离纯化入手,将传统的细胞破碎和双水相萃取(选择PEG盐系统)用于IL-13的提纯。2.2.实验材料与方法标题另起一行,黑体小四号,行距21

4、磅,段前后间距均为6磅标题前空两格“221”Z厉加一空格,下同②操作方法按事先计算,取-定量的PEG母液、盐母液核细胞碎片固体(超声波破碎,4000r/min离心收集),用NaOH或盐酸调节pH值,加水至要求的浓度;(2-1)用公式编辑器,单倍行距,居中居右第三章实验结果与讨论3.1GST-IL-13的培养3.2GST-IL-13总含量的测定3.3化学破碎3.3.1pH的影响pH对蛋白质禅放的影响见图3.8。pH的作用主要是影响蛋白质的电离平衡,从而影响到其融解性。JM109菌的细胞壁蛋口在微碱性师的融解性较高,同时这又很接近细胞本身的生长环境,故

5、蛋白质不会发生结构上的改变。从图小也可以知道,pH以8.0左右为宜。鞍、硫酸镁、硫酸钠、磷酸钠)构成的双水和体系,系统分析了蛋白质、GST-IL—13和细胞碎片的分布规律。表3.4平均相对分了质录对双水相萃取结果的比较表编号后空•格五号宋体居中,段前、后间距分别为0磅、6磅相组成ABCD蛋口收率/%64.369.568.741.2GST-1L-13/%5&178.471.51&9成相情况上清、下微浊戛卜•清上清、下浊上下相浑浊上下两根线粗3/2磅,中间一根1/2磅A.PEG600(26%),硫酸钗(14%);B.PEG1540(25硫酸馁(1爲zC

6、.PEG600(25%),硫酸钱(8%);D.PEG1540(20%),硫酸钱(10%);表后空一行五号或更小字体;说明性文字在表下方,宋体五号第四章结论与展望4.1结论⑴通过正交实验设计,对化学渗透法破碎JM109菌的齐影响因素进行了实验研究和显著性分析,确定了齐影响因素显著性的大小,并对齐显著因子进行了单独实验,确定处适宜的破碎条件为盐酸弧7.0mol/L,TritonX-1000.5%,pH为8.0。⑵综合比较了超声波细胞……4.2对进一步研究的展望本实验对基因工程菌JM109屮以包涵体形式存在的外源融合蛋白GST-IL-13进行了细胞破碎(

7、超声波法、化学渗透法)、包涵体融解、双水相萃取等方而的实验研究,确定了最佳的细胞破碎、双水相萃取的工艺路线和工艺条件,并取得较为满意的结果,为下一步的研究工作奠定了良好基础。进一步的研究工作主要包括:⑴口标产物GST-IL-13的进一步纯化。⑵口标产物GST-IL-13的酶切和折叠复性实验,尽可能地提高酶切效率和蛋口切割后的高级结构的重建。⑶切割后的IL-13的活性检测,以及影响性的相关因素研究。通过对GST-IL-13分离纯化系统的研究,可为用基因工程菌大量生产基因工程药物提供一个理论和方法上的借鉴。

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