降低植物组织培养中污染率的主要措施

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1、植物组织培养过程中的污染及其防治方法刘玲玲I（定西师范高等专科学校甘肃定西74300。摘要：污染是植物组织培养过程中的常见问题之一，它严重影响了培养材料的正常发育和生长，并给科研和生产造成了不同程度的损失。本文主要对植物组织培养中出现的污染原因进行了分析，并提出了控制和降低污染率的有效方法，为科研和生产提供了一定的参考价值。关键词：植物组织培养；污染；外植休；防治方法PlantTissueCultureintheProcessofPollutionandItsControlLiuLing-ling（TeachersCollegeofDingxiGansu743000China）Abs

2、tract:Contaminationofplanttissuecultureisacommonproblem,Itseriouslyaffectedthenormaldevelopmentoftrainingmaterialsandgrowth,andtotheresearchandproductionresultedinvaryingdegreesofdamage・Thispaperappearsinplanttissuecultureanalysisofthecausesofpollution,andproposedpollutioncontrolandreducetherat

3、eofeffectivemethodsforresearchandproductionofacertainreferencevalue・Keywords:planttissueculture;pollution;explant;controlmethods.植物组织培养是20世纪初以植物生理学为基础发展起来的一门新兴的植物繁殖技术。经过近一个世纪的发展，这项技术已在工厂化育苗、植物快速繁殖、种苗脱毒复壮、单倍体育种、种质资源保存与交换、细胞突变体筛选等方面得到广泛运用⑴，成为举世瞩F1的生物技术的重要内容但它的技术环节还存在不少问题，其中污染问题是植物组织培养过程屮的一人技术难题，也

4、是组培快繁过程中常遇到的问题⑵,在植物的组培过程中,接种室、培养基、超净工作台消毒不严或无菌操作不规范等均可引起污染的发纶，有吋会严重影响工作效率和生产进展，严重者会导致试验和生产的失败，给科研和生产造成巨大的经济损失3。所以，植物组织培养操作过程中的经验积累和技术的掌握是非常重要的。现根据国内外最近的研究成果，并结合自己在实践教学及实验中发现的污染原因并采取的措施。本文对•植物组织培养中的污染原因进行了详细的分析，并提出了相应的解决方法。在正文屮以组培代替组织培养。1污染的概念污染是指在组培过程中培养基和培养材料等滋生杂菌，导致培养失败的现象。在组培过程中山于植物材料培养时间长，而

5、微牛•物的牛长周期短，繁殖快，加之植物组培条件下的温度、湿度、营养、pH值等都是微牛物牛长所需的较好条件，所以组培小的每一个坏节都可能引起培养体系的污染。这些污染出现在材料表面，材料附近的培养基以及培养基的其他部位⑷。污染不仅影响试管苗的质量，而仇是植物组培成败的关键因素Z-o2污染的原因及其危害山微牛.物所引起的污染一直是当前制约植物组培发展的主要障碍,特别在接种和培养过程中，污染率常常高达80%以上。污染的原因，从污染产生的病原来分析，主耍有细菌和真菌两人类。2.1细菌污染细菌污染是指在培养过程屮，在培养基某•位置或培养材料周围出现黏液状物体、菌落

6、作者简介:刘玲玲（1977-）

7、,女,汉，甘肃陇西人,讲师，主要从事作物遗传与育种的教学和研究工作。或混浊的水迹状，冇时甚至出现发酵状泡沫。细菌污染中乂以芽砲杆菌瑕普遍、最严重，这种芽砲杆菌能耐一定的高温高压，对消毒剂和紫外线有一定的抗性。一•般是在接种后1〜2天即可发现。细菌性污染形成的原I大I,其一主耍是外植体带菌或培养基灭菌不彻底；其二是丄作人员操作不当造成的。如接种工具灭菌不充分、操作人员的呼吸等。2.2真菌污染真菌污染主要是指霉菌引起的污染，表现为培养基污染部位发霉，一般接种后3〜8d可在培养基中发现各种颜色的菌斑⑸，继而很快出现黑、白、黄、绿等砲子。真菌污染主耍是由周围环境和空气污染造成。如接种室空气不

8、洁净，超净丄作台过滤装置损坏；接种过程屮，由于操作不慎而使真菌抱了通过瓶口进入瓶内等。污染的危害是多方面的。尤其是内牛细菌引起的危害较多，主要包括在早期导致培养失败，增殖效率的降低，培养物生长减缓，玻璃苗增加等；在后期导致试管苗移栽困难和死亡,冇时污染也会引起培养物的遗传变异⑹“。但也有报道说一些潜在的污染并不影响培养物的增殖吧3污染的影响因素引起污染的因索很多，概括起来主要冇两大方面，一是植物材料木身带菌所造成的污染。外植体带菌是不易清除的，特别是外植体