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1、不同烟草品种的抗旱性比较1、实验口的烟草起源于雨量充沛的热带，对水分的耍求很高，但在特定生长时期，田间持水量如果未能保持在50%以上，就会严垂影响烤烟的产量和品质。在烤烟生产中，选育自身抗旱能力强的品种就显得尤为重要。抗旱鉴定就是对作物品种进行抗旱性筛选、评价的过程。木实验通过人工控水的方法模拟干旱条件，对5个烟草品种进行统一的干旱处理，并对多项与抗旱性有关的牛:理半化指标以及形态指标进行了测定，通过对各项指标进行综合分析，对不同烤烟品种的抗旱性进行了评价。2、材料与方法2.1供试材料的选择与种植本试验采用盆栽控水的方法造成干旱胁迫条件，称
2、重法控制土壤含水最。供试烤烟品种为红大、K326、云烁
3、87、云烟100、NC85。用漂浮育苗培育烟苗后，移栽于装有相同质量土和有机质的混合物的人盆中。2.2处理方法移栽后」E常浇水，待烟苗生长至对水分最敏感的旺长期，开始控制浇水造成干旱胁迫。前10d处理水平为：土壤含水最占田间最大持水量的50%,造成屮度胁迫；10d后的处理水平为：土壤含水量占川间最大持水量的30%,造成重度胁迫。重度胁迫5d后，开始进行冇关指标的测定。整个过程模拟自然条件下干早程度的逐步加剧过程。所冇指标的测定均设3次重复。表2烟草各生育期不同干旱状况的界定（土壤含水昴
4、％）Table2Definitionofdrouglitsituationsindifferenttobaccogrowthstages干早程度还苗期伸根期旺长期成熟期适宜水分55658565中度干早45557555垂度干早354565451.3测定的项H与方法1.31形态指标的测定分别测最烟株的株高、叶长、叶宽、根系总吸收面积、根系体积、根干重、冠/根比。指标品种红大K326云烟87云烟100株高叶长叶宽冠/根比根系体积根干重1.3.2生理指标的测定1.3.2.1离体叶片保水力的测定取烟株展开顶叶，分别称其鲜重，并对每份样品进行编号，重复
5、3〜4次；将称过鲜重的叶片放入25°C〜30°C的干燥器中，在黑暗条件下干燥2〜6h,再称量失水后叶片的重量;然后计算每份样品的失水率：失水率(%)鲜重鲜重一失水后重计算出每一供试品种叶片的平均失水率，并进行比较。一•般抗旱性强的品种叶片持水力高于抗旱性差的品种。1.3.2.2叶片相对含水罐的测定剪下叶片，擦干表面，迅速称量鲜重(FW),然后将其浸于蒸镭水中，4C下暗处放置24h吸水饱和，取出，吸水纸擦十表面水分，称量饱和鲜重(TW),然后放于烘箱80C烘48h,称最干重(DW),利用公式RWC=(FW・DW)/(TW-DW)rOO%计算相
6、对含水最。1.3.3生化指标的测定1.3.3.1脯氨酸含量的测定称取0.3g來自经干旱处理的烟叶，剪碎后放入具塞试管中，加5ml3%磺棊水杨酸溶液,加塞后在沸水浴中提取10min,过滤液待测；取提取液2ml于具塞试管中,加入2ml蒸憎水、2ml冰醋酸和4ml酸性苗三桐试剂，摇匀后在沸水浴中加热显色2h,取出后冷却至室温，加入4ml甲苯，充分摇匀以卒取红色产物。静置约10min,吸取卬苯层，于分光光度计520nm波长处测定吸光度。计算样品中的脯氨酸含量：脯氨酸含量(pg/g)=(C^V/A)/W或脯氨酸含量(%)=(C^V/A)/W^10-4
7、式中：C—由标准溶液查得脯氮酸jjg数；V—提取液总体积(ml)；A—测定液总体积(ml)；w—样品重(g)；1g=106pg.,1.3.3.2抗氧化酶(SOD、POD)的捉取和测定取0.5g叶片于预冷的研钵中，加磷酸缓冲液在冰浴卜•研瞎成浆，加缓冲液使最终体积为5mLo取2mL于12000r/min下离10min,±清液即为SOD,POD粗提液。显色反应后按公式计算其活性。SOD总活性=[(Ack・AE)H/]/(1/2Ack^W^Vt^SOD总活性以鲜重酶单位何克表示(u/gFW)；比活力单位以酶单位每毫克蛋口表示；Ack为照光对照管的
8、吸光度；AE为样品管的吸光度；V为样品液总体积(ml,1.6ml,加入PBS的体积)；Vt为测定时的酶液丿IJ量(ml,30ul)；W为样品鲜重(g,测定时应换算为叶绿体的质最mg)；蛋白质含量单位为mg/g。POD=(AA470^Vt)/(W^Vs^O.OUt)(u/gmin)AA470：为反应时间内吸光度的变化；W为样站鲜重(g)；t为反应时间(min)；Vt为捉取酶液总体积(ml,(1.6ml)；Vs为测定时取用酶液体积(ml,30ul)o
