高中生物 现代生物科技复习课件 新人教版选修

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1、选修3技术总结1、基因工程基本操作2、植物组织培养3、植物体细胞杂交4、动物细胞培养5、动物细胞核移植6、动物细胞融合7、单克隆抗体的制备8、体外受精9、胚胎移植基因工程基本操作的四个步骤1、目的基因的获取2、基因表达载体的构建3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测与鉴定1、从基因文库中获取2、利用PCR技术扩增3、人工合成包括启动子、目的基因、终止子、标记基因植物：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法动物：显微注射法（受精卵）微生物：感受态细胞法目的基因是否插入：DNA分子杂交技术目的基因是否转录：分子杂交技术目的基因是否翻译：抗原-抗体杂交技术（1）图中将人乳铁蛋白

2、基因插入载体，需用限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含的培养基上进行。BamHIHindIIIamp（1）需用限制酶。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含的培养基上进行。BamHIHindIII氨苄青霉素（1）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是。（2）在检测到人乳铁蛋白说明基因表达成功。1.下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线乳腺蛋白基因启动子乳汁外植体愈伤组织根、芽植物体脱分化再分化植物组织培养的过程（未分化）（分化）原理：植物细胞的全能性①有丝分裂。②无机物、有机物和植物激素（生长素，细胞分裂素等

3、，避光薄壁细胞高度液泡化排列疏松、无规则①有丝分裂、细胞分化。②无机物、有机物和植物激素（生长素，细胞分裂素等，需光去壁去壁纤维素酶果胶酶原生质体植物细胞原生质体融合再生细胞壁杂种细胞去分化愈伤组织杂种植株再分化植物体细胞杂交过程示意图植物细胞离心、振动、电刺激、聚乙二醇细胞融合成功的标志植物组织培养优势：克服远缘杂交不亲和障碍原理：植物细胞的全能性，膜具有一定流动性动物细胞培养取的组织、器官原代培养（1-10代细胞）传代培养（10-50代细胞）单个细胞加入液体培养液动物胚胎或幼龄动物胰蛋白酶接触抑制遗传物质没有改变胰蛋白酶无限传代（细胞系）遗传物质改变动物血清去核卵细胞（减

4、II中期）供体细胞重组细胞重组胚胎新个体代孕母牛C胚胎移植卵细胞培养无性繁殖体细胞的核移植过程高产奶牛A供体细胞培养（10代以内）含有促进细胞核全能性表达的物质细胞核移植原理：动物细胞核具有全能性遗传物质来源：供体细胞核和受体线粒体A细胞B细胞人工诱导杂交细胞动物细胞融合电激、PEG、灭活病毒原理：细胞膜具有一定的流动性BB、B瘤、瘤瘤（B、瘤）（一选）选择性培养基：获得杂交瘤细胞获得产生相应抗体的B细胞（抗体检测）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞√体外培养小鼠腹腔内培养单克隆抗体的制备杂交瘤细胞特点：既能无限增殖，又能产生特异性抗体。单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏

5、度高，并能大量制备。胚胎移植采集卵母细胞体外培养采集精子体外获能体外受精早期胚胎培养受体牛体外受精（时期：）1）超数排卵（试剂）2）活体取卵（仪器）3）从屠宰的卵巢取卵①假阴道法②手握法③电刺激法（培养法，化学法）（获能溶液或专用受精溶液）成熟的卵子获能的精子MII中期方法方法发育培养液：两盐、两酸、两素、血清和水有性繁殖选择供体母牛受体母牛……处理……超数排卵供体公牛配种冲卵质量检查、培养胚胎移植妊娠检查分娩（胚胎移植的犊牛）胚胎移植的基本程序同期发情1.卵细胞成熟期。2.胚胎移植用期。3.胚胎分割用期。4.同期发情用激素5.超数排卵用激素。6.胚胎干细胞来自于。MII中桑

6、椹胚或囊胚桑椹胚或囊胚孕激素促性腺激素原始性腺或早期胚胎