无菌体液细菌培养的新方法探讨

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果无菌体液细菌培养的新方法探讨【摘要】目的：探讨无菌体液培养的最佳方法。方法：对278份无菌体液标本用双相液体培养基法和直接接种法培养分离细菌。结果：双相液体培养基检测278份标本，40份培养出细菌，阳性率为％，直接接种法培养19份标本培养出细菌，阳性率为％，经SPSS软件处理，χ2检验，P【关键词】无菌体液；细菌培养；双相液体培养基无菌体液(胸腹水、关节液、胆汁、脓液等)标本细菌培养是诊断各种细菌感染的一种重要方法。直接接种法(传统方法)细菌培养阳性

2、率低,往往易造成误诊,为改变上述现状,作者经过两年的研究,终于发现一种新的细菌培养方法，即能做到床边接种又能增菌分离，现报告如下。1材料和方法材料标本来源78份标本为我院住院患者标本，其中胸腔积液52份，腹水51份，脑脊液49份，腹透液53份，胆汁37份，脓液36份。培养基双相液体培养基(上海奥普生物医药有限公司提供)。方法标本采集课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果双相液体

3、培养基接种法临床医生床边采样(立即接种)，无菌操作采集无菌体液标本≥ml,注入双相液体培养瓶内,充分混匀,并覆盖整个固相培养基,立即送实验室，置35℃孵育箱培养。直接接种法用接种环直接接种血平板、巧克力平板和麦康凯平板，置35℃孵育箱培养。结果判断次日将培养瓶取出,观察液体是否混浊,固相是否有菌落和菌苔生长,若无菌生长或混浊,继续培养。如有菌生长,立即涂片染色镜检、鉴定和药敏实验，4h无菌生长,报告未见细菌生长。鉴定涂片、染色分属后，采用珠海黑马生物鉴定板进行鉴定、药敏［1，2］。结果.1两种方法检测分离出的细菌标本数课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一

4、年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果用双相液体培养基检测278份标本，40份培养出细菌，阳性率为％。胸腔积液标本阳性8份，阳性率%,腹水标本阳性8份，阳性率%,脑脊液标本阳性5份，阳性率%,腹透液标本阳性8份，阳性率%，胆汁标本阳性6份，阳性率%,脓液标本阳性5份，阳性率%；而用直接法培养，仅有19份标本培养出细菌，阳性率为％。各标本培养出的阳性标本数分别是：胸腔积液5份，腹水4份，脑脊液2份，腹透液3份，胆汁3份，脑脊液2份；阳性率分别

5、是：%、%、%、%、%、%。经统计学软件SPSS处理，χ2检验，P＜,结果差异有非常显著性。.2两种方法检出时间及阳性率用双相液体培养基培养检出40株细菌，1h～2h检出38株，2h～4h检出2株；直接法培养检出19株细菌，1h～2h检出16株，2h～4h检出3株，各菌属细菌检出时间情况见表1。表1双相液体培养基和直接法各菌属细菌检出时间份(略).3双相液体培养基内检出细菌种类78份标本在双相液体培养基内检出40株细菌，肠杆菌属15株，葡萄球菌属8株，肠、链球菌属6株，非发酵菌6株(%)，真菌5株，各菌属检出情况见表2。表2双相液体培养基检出的细菌种类份(略)讨论双相液体培养基是由

6、固相和液相组成。固相是一块透明的琼脂面，固定在瓶内壁的一侧，含多种营养物质，能观察到菌落和菌苔，直接作鉴定和药敏。液相肉汤也含有丰富的营养成分，如多种生长因子、氨基酸、血红素、维生素B6等，除常见菌生长良好外，苛养菌也生长较好。课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果本研究从278份体液标本中分离出40株细菌，其阳性率为％，而直接接种法278份标本只分离出19株细菌，阳性率为％，

7、经χ2检验，而直接接种从采样到接种耗时较长，尤其不能及时接种时，易造成某些细菌死亡，影响培养结果。标本接种量大，约ml，而直接接种法标本量少，约10μl。双相液体培养基固相可以分离细菌，液相具有增菌作用，其营养成分丰富，适宜大部分细菌快速生长。每天8时、11时、15时、18时四次充分混匀，及时接种，有利于细菌快速生长，提高检出率。表1显示：该培养基阳性检出时间，2h内检出阳性数占95％，2h～4h内检出阳性数5％，于直接接种法阳性检出基本一致，与仪器血培养仪作体液标本