复方大果木姜子软胶囊抗流感病毒作用的体外实验研究_12

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1、从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果复方大果木姜子软胶囊抗流感病毒作用的体外实验研究作者：胡万福，张永萍，邱德文【关键词】复方大果木姜子软胶囊；,,FM1；,,MDCK；,,抑制病毒增殖；,,抗病毒活性摘要：目的对复方大果木姜子软胶囊进行体外抗流感病毒实验研究，开发安全有效的抗流感病毒的中药新药。方法细胞培养实验方法。结果复方大果木姜子软胶囊在MDCK细胞中的半数中毒浓度为・ml-1；预防组抗流感病毒的半数有效浓度为・ml-1；治疗指数

2、为；感染病毒0~h后均有明显的抑制FM1在MDCK细胞中增殖的作用。结论复方大果木姜子软胶囊对流感病毒FM1在MDCK细胞中的增殖具有明显的抑制作用。关键词：复方大果木姜子软胶囊；FM1；MDCK；抑制病毒增殖；抗病毒活性Anti-influenzaEffectofFufangDaguomujizngziRuanjiaonanginvitroAbstract：ObjectiveToobservetheeffectofanti-virusbycompound-herbschinamomummigaosoftcapsule,todeve

3、lopaneffectivenewdrugofThecellculturewasfoundtobeapotentialinhibitorofinfluenzaFM1virusinaconcentration-dependent课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果mannerwithaTC50of・ml-1inMDCKcultu

4、re.TheEC50was・ml-1(TI=)whendrugwasaddedfor0~hoursaftervirusinfection.ConclusionTheremightbeaquantity-effectrelationshipandithasnotablerestraineffect.Keywords：Chinamomummigaosoftcapsule;FM1;Restraincloneofvirus;Anti-virusactivity　　流感病毒易引发急性呼吸道疾病，不仅影响人们的正常生活，还容易引发严重的并发症。

5、由于其表面抗原能经常不断发生变异，使本来有效的流感病毒疫苗很快失效［1］。当前用于防治流感的药物主要以化学合成药物为主，如金刚烷胺、金刚乙胺和扎那米韦等，分别存在有毒副作用和服用不方便的问题［2~4］，因此，研制开发抗流感病毒的低毒有效的中药制剂势在必行。现有的研究表明，大果木姜子具有增加血液循环、改善心肌缺血［5~7］、抗流感病毒［8］等作用。复方大果木姜软胶囊是以大果木姜子为主要原料，经提取各味药材的有效部位制成的软胶囊剂。本研究采用细胞培养技术对复方大果木姜子软胶囊中药物有效部位抗流感病毒FM1活性进行了研究。现将实验结果报道

6、如下。　　1材料及方法课题份量和难易程度要恰当，博士生能在二年内作出结果，硕士生能在一年内作出结果，特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发，应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性，便于研究生提出新见解，特别是博士生必须有创新性的成果药品及试剂复方大果木姜子软胶囊；MEM培养液；胰酶；新生牛血清；流感病毒亚甲型FM1、MDCK细胞。细胞培养病毒血凝滴度测定按常规操作将病毒接种于9~11d胚龄鸡胚的尿囊液，测定红细胞凝集活性，得病毒血凝滴度≥640，细菌培养阴性，分装，置-85℃保存待用。MDCK细胞

7、培养MDCK细胞采用单层接种培养，培养液为含10%新生牛血清的MEM培养液，37℃，5%CO2培养箱中培养。病毒在MDCK细胞中毒力测定用含2%新生牛血清的MEM将病毒稀释成10，102，103，104，104，105，106，107，108，109，1010倍10个浓度，按常量分别加入已长成单层细胞的96孔细胞板中，置于37℃、5%CO2温箱内孵育h，弃去含病毒维持液，更换正常细胞培养液，继续培养，分别于1，2，3，4，5，6，d在倒置显微镜下观察记录细胞病变程度。同时设正常细胞对照。计算细胞半数感染量。经测定，FM1感染MDCK

8、细胞的TCID50是/ml。复方大果木姜子软胶囊对MDCK的毒性检测取对数生长期的MDCK细胞接种于24孔细胞培养板，37℃，5%CO2的培养箱中培养2h后先以不同稀释浓度的药物作用h，然后用Hank’s液洗板3次，甩干后每孔加1ml