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1、从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果化学消毒剂作用机理研究进展用同位素标记法研究消毒剂对蛋白质及核酸合成的影响也是一个重要的研究方法。Viktor[]用1C-Adenine和1C-Leucine作为合成前体测定了16种季铵盐类消毒剂对阴沟肠杆菌(Enterobactercloacae)的蛋白质及DNA合成的影响,发现有15种消毒剂的DNA合成的IC50小于蛋白质合成的IC50,其中7种消毒剂主要作用于DNA的合成。似乎阴沟肠杆菌DNA合成比蛋白质合成更容易受季铵盐类消
2、毒剂的影响。也有人用同位素掺入法研究了二氧化氯对蛋白质合成的影响。病毒的外壳蛋白(capsidprotEin)一直是研究病毒消杀机理的一个热点。消毒剂与病毒外壳的作用方式与强度因消毒剂和病毒的种类而异。总体而言,有包膜病毒比裸病毒对消毒剂更敏感。多数化学消毒剂对有包膜病毒几乎都有效,但季铵盐类、洗必泰、戊二醛对裸病毒的杀灭效果都不甚理想。有研究显示,病毒基因组不是戊二醛作用的理想位点,戊二醛主要与病毒外壳上的氨基酸发生交联作用,特别是与赖氨酸上的ε-氨基发生交联。Martine[101证明了戊二醛对肠病毒的毒力与病毒VP1外壳蛋白上的赖氨酸残基的排列顺序有关,而与
3、其总数目没有明显相关性。3 消毒剂对核酸的作用核酸位于细胞的内部,真核生物的核酸还有核膜包被,课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果因此核酸可能是消毒剂最后到达的位点之一。芬顿反应(Fentonreaction)是一个能产生羟自由基的反应体系(Fe++H2O→Fe++OH-+·OH),常被应用于羟自由基对DNA损伤的胞外研究。胞外的DNA损伤试验为研究胞内的D
4、NA损伤提供了有益的信息[11]。质粒pSV2neo在芬顿反应处理后,透射电镜显示其损伤包括形成缺口环状分子、线状分子、单链噜噗(loop)结构和质粒聚合物等[1]。戊二醛似乎对枯草芽孢杆菌芽孢的DNA没有损伤作用。陈春田发现二氧化氯可导致大肠杆菌DNA漏出,但漏出率与杀灭率不成比例。含氯消毒剂对细菌DNA毒性包括形成含氯的核苷酸碱基衍生物,16mg/L的次氯酸作用5min能彻底抑制大肠杆菌的生长,对DNA合成的抑制率为96%,而对蛋白质合成的抑制率仅为10%~50%,因此推断DNA合成是对该消毒剂的更为敏感的环节。含氯消毒剂具有杀病毒活性,Olivieri发现氯
5、(chlorine)对f2噬菌体裸露RNA及完整衣壳内的RNA有同等的损伤效果,但其外壳蛋白仍然能够进入宿主;Taylor和Butler发现1型脊髓灰质炎病毒(Poliovirustype1)的RNA在病毒外壳形态发生明显改变之前即被降解成RNA片段;但Floyed和OpBrien证实脊髓灰质炎病毒的衣壳也能被严重损坏。此种矛盾结果尚需进一步研究澄清。基因组核酸不是戊二醛作用的理想靶点。对噬菌体F116的研究发现,课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定
6、实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果经戊二醛预处理后的噬菌体颗粒仍有感染铜绿假单胞菌的能力。在病毒SV40中,只有戊二醛、甲醛等能引发蛋白质-DNA交联的醛类,才能抑制DNA的合成。辛忠涛等[1]研究氯及二氧化氯对甲肝病毒(HAV)的灭活作用表明,病毒在抗原被破坏前已失活,推测可能是核酸遭到了损伤。李君文等[1]用RT2PCR步移法及ELISA法证实了前者的推测:在氯或二氧化氯的作用下,HAV病毒的感染性丧失与5’端非编码区约600bp的RNA片段被破坏有关。4 展望由于消毒剂公认的多靶点作用性,也由于微生
7、物是一个构成复杂的庞大群体,其细胞组成千差万别,个体极其微小,要确切了解消毒剂对它们的作用机理,其难度不小。只有联合运用生物、化学及物理的方法才能获得比较满意的结果。比如,消毒剂对核酸的作用总体来说研究得还不够深入。特别是在细菌和真菌的研究方面,很多研究者还仅仅停留在通过消杀液OD260的变化来推测核酸是否受损。实际上即使核酸受损也不一定释放到胞外;也未见有从OD260增高的消杀液中提取到核酸的报道。更深入、细致的研究必须不断地采用新的设备、方法和技术。近二十年来细胞学研究方面的一些新技术,如流式细胞仪(Flowcytometry),单细胞凝胶电泳(Single-
8、cellg