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1、马铃薯培养基污染 2010-12-2418:39:15
2、 分类:马铃薯繁种
3、 标签:植株 植物 菌类 培养基 污染
4、字号大中小 订阅 1.植物本身具有: (1)植物病原菌:有些作物的病害已被透彻研究,因此在大量繁殖时,可立即检查出来,但有些则否,造成若有污染时,不知来源为何。 (2)和植物有关的菌类:有修植物本身便会和一些菌种共生,或是寄生于植物内部。2.植物所带入的污染:内在污染源 许多植物表面或大气中生存的微生物,可经由植物自然的开口或伤口进如植物内部,而有一些兼性腐生菌或绝对寄生菌,可藉由载体或是
5、拥有一些侵入的机制侵入植物内部,依其存在的地方分为 1.细胞内-inter 2.细胞间隙-interacellular种类有:virus病毒、viroids类病毒、prokarytoes原核生物、fungi真菌、柔膜纲(ex:mite)、立克次体。3.操作室:外在污染源 在组织大量培养下,除了植物本身外,大部分最有可能的污染来源便是来自操作室。依其可能原因分析为: (1)空气:在操作室中,未过滤空气带有大量的微生物,随者操作人员或植株接触时,而污染培养皿。故在国外对于操作室内空气的清洁度分为四种等级:ClassⅠ.没有容易培
6、养的微生物,和作物之主要病原菌Ⅱ.没有容易培养的微生物,和作物特殊病原菌Ⅲ.没有容易培养的微生物Ⅳ.未做检测 (2)不完全的灭菌设备或技术:因为使用灭菌不完全的设备或是技术,而导致植株或培养皿的污染,例如:有些酵母菌,可避免酒精消毒,还有一些会产生内孢子,而避免火焰消毒。 (3)人员:在整个操作室内,人员可说是最大的带菌者,其不管在毛发或是衣服等,都隐藏属不清的菌。在进入操作室前,最好能将作业人员清洁处理,然后换上脱鞋,或是将尘土去掉。 (4)细缝的存在:因为若操作室有细缝的存在,则造成外果气体直接流入,使得空气中菌数增加。
7、 (5)操作台上的滤网不干净:因为使用过久,或不当保养,而造成滤网坏掉,而产生更多的污染。 (6)蹒及蓟马的存在:此为珠形网,具有活动能力,能到处跑来跑去。因此常造成散乱的污染。4.栽培过程污染 在栽培室,组培瓶外和外界气体交换时,亦会有污染进入。污染机率取决于空气中带菌密度与组培瓶空气交换率。二、污染的种类及形式 1.污染的形成 依据污染的来源,可将污染分为三个形式:a.由植物内部或病原菌所造成的污染,植物内部或病原菌所造成的污染,所呈现是系统性,及从stageo~stage4中都可发现,而且占有一定的百分比。a.在制造时
8、所造成的污染,如因蹒或是空气中的关系造成的污染,其所表现的方式是散乱(random)性非系统性,且不集中于某一地方,占的百分比也不一定,是机率性。b.技术上的失误:其呈现方式有一定性,例如由此工作台所生产得植株都被污染,表现为带状性,可用卷标方式来追踪,以进而改善。 2.污染的来源分类 A.污染的种类,以总体来说可分为下列几种:a.病毒(virus)-常存在植物内部。b.(viroids)常存在植物内部c.细菌-在组织培养中又分依其来源和所在地方分类如下:(a)phlem-eimited生长于韧皮部xylem-eimited生长
9、于木质部(b)植物病原细菌(c)空气中存在的细菌,但因植物有伤口,或是营养丰富的地方,可分为植物表面的细菌或植物内部的细菌。例如:Bacillusspp.可抗热,在不完全灭菌的玻璃器皿中可发现。(d)菌质体是一种像细菌的微生物,但是本身没有细胞壁,可以在培养基培养,亦可用特殊的抗生素(四环霉素)抑制其生长。其种类有microplasm与spiroplasm。(e)真菌在植物病害中,真菌所引起的病害特别多且严重,且因其会产生孢子,所以会随着空气飘散。一旦落于适当的环境下,一粒小小的孢子便会扩大成一个菌落,污染整个组织培养瓶。例如常见的
10、酵母菌,其菌落为粉红色,若有其出现,则其污染来源可能来自空气。(f)蹒或蓟马此为细小的微生物,具有活动能力,喜欢吃菌丝。在国内使用期限较久的组培场中常出现此问题。(g)立克次体目前未清楚其污染方式。 B.以培养难易区分污染源1.在培养基中易培养菌类细菌,真菌,蹒。2.在培养基中不易培养的菌类病毒,类病毒,立克次体,菌质体。在组织培养过程中,常造成污染或是造成威胁的菌类,称为培养菌类。因常为腐生菌,且营养需求不高(随便吃,随便活)所以常造成成本的增加。而且污染后,常使培养基的pH值降低,洋菜无法凝结,而使植物无法生长或是产生有毒物质
11、或副产品,使得植物生长缓慢,或是干脆就在植物上生长。在培养基上不易培养或是不能培养的菌种,就不会造成太大的威胁。 C.各种菌种其主要传播方式1.病毒,类病毒,菌质体-常利用机械或利用有载体传播。2.细菌-可经人力,气流或水,及昆虫等
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