酒精分离实验报告

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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划酒精分离实验报告　　附录：　　图一图二　　图三　　附录续：　　生物工程07级24班第3组组长：罗丽梅　　成员：陈婕，付林，李桃，宋点，谢鸿杰，孟湘　　微生物分离实验报告　　实验仪器及材料　　土样：18号土样　　试剂及培养基　　培养基：果胶酶筛选培养基；几丁质酶真菌筛选培养基；果胶酶划线分离培养基；几丁质酶划线培养基；细菌半固体培养基；淀粉培养基；葡萄糖酵解培养基；乳糖酵解培养基；蛋白胨水培养基　　a)试剂：草酸铵结晶紫染液、番红复染

2、液等各种染料以及卢戈氏碘液、　　95%乙醇、5%孔雀绿水溶液、无菌水等　　仪器目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　锥形瓶、培养皿、试管、移液管、烧杯、玻璃棒、载玻片、盖玻片、光学显微镜、涂布棒、U型管、德汉氏小管、酒精灯、漏斗、接种环、滤纸、棉塞、牛皮纸、无菌操作台、灭菌锅、纱布等　　细菌的筛选，分离纯化及鉴定　　细菌的筛选　　土样处理　　

3、配制生理盐水：在烧杯中配置％的生理盐水，用移液管各移取9ml于五支洁净试管，再移取90ml配置好的生理盐水于三角烧瓶，并放入少许玻璃珠，包好灭菌；　　加土样：冷却后准确称取10g土样放入盛有90ml无菌生理盐水并带有少许玻璃珠的三角烧瓶中，充分震荡摇匀，然后放在30℃恒温培养箱中静置15min。　　果胶酶菌种筛选　　梯度稀释：用一支无菌吸管吸取1ml土壤悬液加入到盛有9ml无菌水的试管　　中充分混匀，此为10-1稀释液，以此类推制成10-2、10-3两种稀释度的土壤溶液；目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大

4、潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　涂布：配制果胶酶筛选培养基，110度灭菌20-30分钟，冷却后倒平板在培养皿盖周边用记号笔做好标记，分别写上10-1、10-3两种稀释度字样，每稀释度标记三皿，然后用无菌吸管分别由10-3、10-1两管土壤稀释液中吸取适量对好放入已写好稀释度的平板中央位置，每皿准确放入，用无菌玻璃棒在培养基表面轻轻地涂布均匀，其方法是将菌液先沿一条直线轻轻地来回推动，使之均匀分布，然后改变方

5、向90度沿另一垂直线来回推动，平板内边缘处改变方向用涂布棒再涂布几次；　　培养：将平板倒置于30℃恒温箱中培养1-2天；　　果胶酶透明圈平板检测：取10-1涂布平皿，用％的刚果红染色15-20min后，倒掉刚果红，用1mol/L的NaCl脱色几分钟至观察到透明圈，则说明水解圈内的菌有水解果胶的能力；　　菌落描述：取此菌进行菌落形态描述，就菌落的大小，颜色，干湿，边缘，表面分别进行阐述并详细记录；　　细菌的分离纯化　　划线分离：制备果胶酶划线培养基，灭菌后　　倒平板，挑取具有水解圈的菌种，第一次划线分　　离培养1-2天后取分离所得单菌落再进行第

6、二　　次划线分离，划线分离的具体方法是：先在平皿　　上划定区域，然后将接种针在火焰上进行灭菌操目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　作，取含菌种的培养皿，在火焰上方打开培养皿盖，先拿接种针在上盖处划线以降温，然后用接种针轻挑所选菌落一到两下，将平皿盖上放好，再取刚刚冷却了的干净平皿在1区进行划线接种操作。操作完毕后对接种针进行灭菌操作，完成后

7、在火焰上方打开平皿盖，将接种针冷却后从1区引线到2区，再如图所示划线，划完后引线到3区，同上进行划线，划线完毕后盖盖平放；　　纯种保藏：再配制一份普通细菌培养基，分装试管后灭菌，制得斜面，将纯种划线接种在斜面上培养保存并进行下一步的鉴定。　　a)纯种果胶酶水解能力的测定　　配制果胶酶筛选培养基，110度灭菌20-30分钟，冷却后倒平板在培养皿盖周边用记号笔做好标记，将分离纯化的细菌点种于平板上，在30℃培养箱中培养1～2天，取培养后的平皿用％的刚果红染色15-20min后，倒掉刚果红，用1mol/L的NaCl脱色几分钟至观察到透明圈，测量并记

8、录透明圈的大小　　b)简单染色步骤　　i.涂片　　取一块载玻片，在上边用胶头滴管加半滴无菌水，用接种环无菌操作将沾有菌的接种环置于载玻片上的无菌水种涂抹，待看到微弱