大肠杆菌转化实验报告

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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划大肠杆菌转化实验报告　　大肠杆菌转化实验　　大肠杆菌转化可以：将重组DNA分子导入大肠杆菌受体细胞进行复制，增殖和表达，以获得目的基因；验证大肠杆菌感受态细胞效果；用于分子生物学其他研究。1原理：　　质粒DNA粘附在细菌细胞表面，经过42°C短时间的热击处理，促进吸收DNA.然后在非选择培养基中培养一代，待质粒上所带的抗菌素基因表达，就可以在含抗菌素的培养基中生长。　　2器材：　　旋涡混合器，微量

2、移液取样器，移液器吸头，微量离心管，双面微量离心管架，干式恒温气浴，制冰机，恒温摇床，培养皿，超净工作台，酒精灯，玻璃涂棒，恒温培养箱。　　3材料和试剂：　　质粒DNA，重组DNA，培养基，LB培养基，无菌ddH2O，IPTG，X-gal。　　4实验准备：　　无菌ddH2O，离心管装入铝制饭盒、移液器吸头装入相应的吸头盒，20%IPTG，2%X-gal。　　5操作步骤：　　事先将恒温水浴的温度调到42℃。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保

3、其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　从-70℃超低温冰柜中取出一管感受态菌，立即用手指加温融化后插入冰上，冰浴5~10min。　　加入10μl连接产物，轻轻震荡后放置冰上20min。　　轻轻摇匀后插入42℃水浴中90秒进行热休克，然后迅速放回冰中，静置3~5min。　　在超净工作台中向上述各管中分别加入900μlLB培养基轻轻混匀，然后固定到摇床的弹簧架上37℃震荡30min到50min　　在超净工作台中取

4、上述转化混合液100~300μl，分别滴到含合适抗菌素的固体LB平板培养皿中，用酒精灯烧过的玻璃涂布棒涂布均匀。　　如果载体和宿主菌适合蓝白斑筛选的话，滴完菌液后再在平板上滴加40μl2%X-gal，8μl20%IPTG，用酒精灯烧过的玻璃涂布棒涂布均匀。　　在涂好的培养皿上做上标记，先放置在37℃恒温培养箱中30-60min直到表面的液体都渗透到培养基里后，再倒置过来放入37℃恒温培养箱过夜。　　在被细菌污染的桌面上喷洒70%乙醇，擦干桌面，写实验报告。　　观察平板上长出的菌落克隆，以菌落之间能互相分开为

5、好。注意白色菌斑。　　海洋学院目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　综合大实验报告　　专业：生物技术班级生技131班姓名：gsq学号：XX题目：生物技术大实验　　指导教师：安贤惠、孙玉英学年　　XX年5月24日--XX年6月3日　　分离　　划线分离：方法简单，但单菌落较难分开。　　涂布分离：单菌落更易分开，

6、但操作复杂。　　制备LB培养基　　1、配方：蛋白胨克，牛肉膏，氯化钠克，水1000ml　　2、流程　　计算称量　　倒平板　　溶解调pH分装加塞，包扎灭菌　　培养基配制(特)　　培养基应现配现用，每次配置350ml，一次性使用完毕。　　1、按下表称取物资配置LB培养基到500ml锥形瓶中：　　2、用双层铝箔和棉绳对锥形瓶进行封口，摇晃锥形瓶以使各物质迅速、均匀、完全、　　溶解。待灭菌。　　①分装：注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，因此在将培养基转移到三角瓶或试管中时必须用____。目的-通过该培训员工可对保安

7、行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　②加塞：试管用塑料盖或__棉花塞___；三角瓶口用_封口膜__或_6层纱布封口,再用__牛皮纸__或报纸封口。　　③包扎：用_牛(转载于:写论文网:大肠杆菌转化实验报告)皮纸__或报纸　　④灭菌：高压蒸气灭菌法1）加水：向外层锅内加入适量的水，加水的要求是不触及内胆_.　　2）装锅：物品放置的要求

8、__：加盖：将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的_排气槽__内。再以__两两对称方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气。3）加热排气：打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气。待冷空气完全排尽后，关上排气阀。4）保温保压：当锅内压力升到1_kg/cm2时，控制热源，维持压力至。5）出锅：切断电源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力降至_0_时，打开_排气阀__，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。否则会因锅内压