临检基础小知识点整理江大京江版for医学检验

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1、血液部分血液标本全血：用于细胞计数、分类、形态观察;血浆：全血去除血细胞，用于血栓止血检测;血清：全血自然凝固后析出的液体，用于生物化学、免疫学检测等。 血液标本采集方法：一、毛细血管采血法：用于微量检测    部位：耳垂或手指末梢，主要是中指或无名指尖内侧，半岁以下拇指或足部，特殊人员视情况而定    所用器材：采血针、吸管二、静脉采血法：用于血沉、免疫、生化等检测项目    部位：主要是肘静脉。还可以在：手背部手腕部等部位采血，幼儿可采用颈外静脉采血。    采血器材：一次性注射器，检验用真空定量采血装置。 抗凝: 用物理或化学方法除去或抑制血液中的某些凝血

2、因子的活性，以阻止血液凝固，称为抗凝。一、草酸盐，抗凝原理：与血液中钙离子形成沉淀；使用方法：草酸钠0.1mol/L和血液1:9。优点：溶解性好，价廉。缺点：①对凝血因子保护功能差，影响凝血因子；②形成草酸钙沉淀物，影响自动凝血仪器的使用。使用范围：逐步被淘汰。二、柠檬酸钠（枸橼酸钠），抗凝原理：与钙离子生成可溶性的鳌合物。使用方法：配成109mmol/L的浓度和血液1:9（用于凝血试验）；106mmol/L的浓度和血液1:4（用于血沉）。优点：对凝血因子有很好的保护作用。缺点：血液中溶解度低，抗凝作用较弱。使用范围：止血学检验、血沉、输血保养液（毒性小）。三、

3、乙二胺四乙酸（EDTA）盐，抗凝原理：与钙离子生成可溶性的鳌合物。使用方法：15g/LEDTA和血液1:10。优点：对红细胞和白细胞形态影响小。缺点：影响血小板的聚集。使用范围：全血细胞分析和血细胞比容测定，但不适用于出凝血实验和血小板功能。四、肝素，抗凝原理：加强抗凝血酶作用，阻止凝血酶形成。使用方法：肝素钠1g/L与血液1:10。优点：抗凝能力强、不影响血细胞体积、不易溶血、能耐高温。缺点：引起白细胞聚集，使白细胞计数降低，不利于制备血涂片，价格昂贵。使用范围：血浆生化/免疫项目，红细胞脆性实验，科学研究等。 亚铁血红素: 血红蛋白色素部分，由铁原子及原卟啉

4、区组成。 血涂片的制备1、用途：  血细胞形态学检验、网织红、异常细胞检验、寄生虫检验。2、制备步骤：（手工推片法）将推玻片向1的方向稍抽回，当血液充满推玻片的宽度后，以一定均匀的速度向2的方向滑动。3、质量评价： 均匀、厚薄、头体尾、边缘、两侧注意：血滴大，速度快、角度大----血膜厚 瑞氏染色法原理：分两相进行，第一相是酸性伊红与细胞中的碱性物质如血红蛋白、嗜酸性颗粒结合；碱性染料天青B与细胞中的酸性物质如核染色质、特异中性颗粒、血小板结合。第二相是天青B和伊红结合在适宜条件下形成紫色的天青B-伊红复合物，结果使白细胞核染色质成紫色（疟原虫的染色质成红色），

5、中性粒细胞的颗粒及血小板颗粒区成紫色。试剂1. Wright染液：瑞氏染粉0.1g，甲醇60.0ml甲醇：有强大的脱水力，可将细胞固定为一定形态，并使蛋白质沉淀为颗粒状、网状等结构，增加细胞与染料接触表面积，提高对染料的吸附作用，增强染色效果。2.磷酸盐缓冲液（PBS）：磷酸二氢钾（无水）0.3g，磷酸氢二钠（无水）0.2g,蒸馏水加到1000ml。配好后用磷酸盐溶液校正pH(6.4-6.8)，塞紧瓶口备用。方法：a. 用蜡笔在血膜两头划线，平放于染色架上。b. 加瑞氏染液覆盖血膜，固定1min。c. 滴加等量或稍多的缓冲液，混匀，染色5-10分钟。d. 用清水

6、冲洗，待干后镜检。 红细胞计数：测定单位体积血液中红细胞的数量【技数方法】显微镜计数法：用等渗稀释液将血液稀释一定倍数后，滴入血细胞计数盘，然后于显微镜下，计数一定范围内的红细胞数，经过换算即可求得每升血液中的红细胞数。【参考值】成年男性：（4.0～5.5)×10^12/L 成年女性：（3.5～5.0)×10^12/L 新生儿：（6.0～7.0)×10^12/L 低于3.5×10^12/L可诊断为贫血，低于1.5×10^12/L应考虑输血。网织红细胞 网织红细胞是未完全成熟的红细胞，是晚幼红细胞脱核后到完全成熟的红细胞之间的过渡型（未成熟）红细胞。【计数方法】显

7、微镜计数法：（活体染色）   染料煌焦油兰：常用，染色效果好，但沉渣较多。   新亚甲兰：WHO推荐的，染色效果好，但试剂昂贵。试验方法试管法：染色时间长（30min），效果好，易重复计数。玻片法：染色时间短，水分易蒸发，结果偏低。制薄片，不复染，油镜下计数1000个RBC中Ret数（缩小视野法或Miller窥盘）。【参考值】成人：0.005~0.015或（24-84)×10^9/L 儿童：0.02~0.06 血红蛋白(Hb)是在人体有核红细胞及网织红细胞内合成的一种含色素辅基的结合蛋白质，是红红细胞内的运输蛋白。【检测原理】血液在血红蛋白转化液中溶血后，除SH

8、b外各种血红蛋白均可被高