川农微生物复习资料

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1、微生物的简答题:1、简述细菌细胞壁的生理功能细菌细胞壁在细菌体的最外层,保护细胞及维持细胞外形的功能,同时细菌细胞壁的化学组成也与细菌的抗原性,致病性以及对噬菌体的敏感性有关,而且是鞭毛运动所必需的,可能是为鞭毛运动提供可靠的支点,此外细胞壁实质上是多孔性的,可允许水及一些化学物质通过,并对大分子有阻挡作用2、简述细菌细胞膜生理功能·控制细胞内,外物质的运输,交换·维持细胞内正常的渗透压的屏障作用·合成细胞壁各种组分和荚膜等大分子物质的场所:·进行氧化磷酸化或光合磷酸化的产能基地;·许多酶和电子传递链组分的所在部位·鞭毛着生点和提供其运动所需能量3、实验室有三支斜面培养物

2、失去了标签,分别为大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌,如何运用实验方法将三支斜面培养物区别开来?理由答:在电镜显微镜下观察,细菌细胞的形状可以辨别,细胞是球状的或近似球状的为金黄色葡萄球菌,细胞细长并且有芽孢的为枯草芽孢杆菌,大肠杆菌为棒状4、试述革兰氏染色的步骤、机理、意义及注意事项一、步骤:Ø初染:结晶紫染一分钟Ø媒染:用碘液一分钟Ø脱色:95%乙醇脱色三十秒Ø复染:用番红复染两分钟Ø结果:一种细胞壁为紫色(G+),一种为红色(G-)二、机理Ø初染和媒染:经结晶紫染色的细胞再用碘液处理后形成了不溶性的复合物,所以前两步的结果是相同的。Ø脱色:不溶性复合物能被乙醇溶

3、解,同时乙醇还能对细胞壁本身产生影响。Ø复染:复染红色染料番红进入仍然为紫色的阳性菌,其颜色被紫色所盖没了,所以革兰氏阳性菌呈现紫色。而阴性菌经过脱色后脱去紫色,再用番红复染以后,细胞呈现红色Ø革兰氏阳性菌:肽聚糖层较厚,乙醇使厚的肽聚糖层脱水,导致孔隙变小,紫色复合物溶解在乙醇中,但是由于分子太大,不能通过细胞壁,所以细胞脱色后仍然保持紫色。革兰氏阴性菌:肽聚糖层薄,乙醇处理会破坏和损伤细胞壁,使复合物从细胞中渗漏处理,所以经过脱色后,阴性菌脱去了紫色三、意义经革兰氏染色可将细菌分为G+和G-菌,有助于指导临床选择药物,有助于研究和了解细菌的致病性等四、注意事项脱色不足

4、造成假阳性,脱色过度又造成假阴性1、对比革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的细胞壁结构有何不同?并说明革兰氏染色原理与结果革兰氏阳性菌:革兰氏阳性菌细胞壁中有较厚而且致密的肽聚糖层,约20-80纳米,其占细胞壁成分的60%-90%,以金黄色葡萄球菌为例,其网状肽聚糖大分子实际上是由大量小分子单体所构成。Ø每个肽聚糖单体含三种成分:Ø双糖单位:由一个N-乙酰葡萄糖胺(NAG)和一个N-乙酰胞壁酸(NAM)通过β-1,4糖苷键连接而成。Ø由四种氨基酸连接起来的短肽连接在N-乙酰胞壁酸(NAM)上,连接顺序是L-丙氨酸,D-谷氨酸,L-赖氨酸和D-丙氨酸。Ø肽桥:在金黄色葡萄球菌中是甘

5、氨酸五肽桥,这个肽桥的氨基端与前一个肽聚糖单体肽尾中第四个氨基酸相连,而羧基端则与后一个肽聚糖单体肽尾中第三个氨基酸氨基相连从而使前后两个肽聚糖单体交联起来,使这个肽聚糖层成为网状结构。革兰氏阴性菌:肽聚糖层较薄,以大肠杆菌为例,其肽聚糖层只占细胞壁的10%左右,厚度仅为2—3nm,结构单位与革兰氏阴性菌基本相同Ø不同在于肽尾第三个氨基酸不同(L-赖氨酸被二氨基庚二酸替代),而且没有特殊的肽桥,单体之间由前一个单体肽尾第四个氨基酸与后一个单体肽尾第三个氨基酸直接相联染色原理:细菌的不同显色反应是由于细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差异,主要由肽聚糖层厚度和结构决定的,经

6、结晶紫染色的细胞用碘液处理后形成不溶性复合物,乙醇能使他溶解,所以染色的前两步结果是一样的,但是在G+细胞中,乙醇能使厚的肽聚糖层脱水,导致空隙变小,由于结晶紫和碘的复合物太大,不能通过细胞壁,保持着紫色。在G-细胞中,乙醇处理不但破坏了胞壁外膜,还可能损害肽聚糖层和细胞质膜,于是被乙醇溶解的结晶紫和碘的复合物从细胞中渗漏出来,当再用衬托的染液复染时,显现红色。红色染料虽然也能进入已染成紫色的G+细胞,但被紫色盖没,红色显现不出来结果G+紫色,G-红色2、根据原生质体的特点说明细胞壁的生理功能原生质体的特点:是无完整的细胞壁,细胞呈球状,对渗透压较为敏感,革兰氏阴性。即使

7、有鞭毛也无法运动,对相应的噬菌体不敏感,细胞不能分裂根据这些特点说明了细胞壁生理功能有:保护细胞,维持细胞外形,对噬菌体的敏感性消失,而且为鞭毛运动所必需的,可能细菌的生长繁殖所必须3、以革兰氏阳性菌为例,试述细菌的细胞结构及生理功能结构:细胞壁、细胞质膜、细胞质和细胞核等4部分构成,有些细菌还有荚膜、鞭毛和芽孢等特殊结构革兰氏阳性菌细胞壁中有较厚而且致密的肽聚糖层,约20-80纳米,其占细胞壁成分的60%-90%,每个肽聚糖单体含三种成分:Ø双糖单位:由一个N-乙酰葡萄糖胺(NAG)和一个N-乙酰胞壁酸(NAM)通过β-1,

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