钙离子对心脏节律性的影响

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1、钙离子对心脏节律性的影响实验目的：观察不同浓度的钙离子对心脏活动的影响；实验原理：心脏的正常节律性活动必须在适宜的理化环境下才能维持，一旦适宜的理化环境被干扰或破坏，心脏活动就会收到影响。当细胞外的钙离子浓度发生变化时，钙离子的内流与钠离子内流都会发生较大变化。细胞外高钙时细胞膜钙离子通透性升高，心室肌平台期钙离子内流增加，心肌收缩增强增快；当细胞外钙离子过高时，心脏就会停搏于收缩状态，出现钙僵直。用理化性质近似于血浆的任试液灌流蛙心，在一定时间内可以保持其节律性。实验对象：蟾蜍实验器材与药品：蛙类手术器械一套，生物信号采集系统，张力换能器，铁架台，双凹架，

2、蛙心插管，蛙心夹，滴管，细线，任试液，实验步骤：（1）、离体蛙心的制备1、取蟾蜍一只，用探针到会脑和脊髓，将其仰卧固定在蛙板上。用镊子夹起皮肤，然后将胸部剑突软骨下方的皮肤剪出一个“V”字形切口，暴露出剑突。用镊子夹住剑突下端，在肌肉层上剪出“V”形切口。再用粗剪刀沿正中线剪开胸骨，并把左右两侧胸骨完全剪掉，眼科剪仔细剪开心包膜，暴露心脏。2、仔细识别心房、心室、动脉圆锥、主动脉、静脉窦、前后腔静脉等。3、结扎血管在右主动脉下穿一根线并结扎，再在左右主动脉下穿一根线备用。用玻璃分针将心尖向上翻至背面，以备用线将前后腔静脉一起结扎（注意勿结扎住静脉窦）。将心脏

3、回复至原位。4、蛙心插管在左主动脉下穿一根线结扎左主动脉远心端，另一线备用。提起左主动脉远端缚线，用眼科剪在做主动脉上圆锥处剪一“V”形切口，将盛有少量任试液的蛙心插管由此口插入主动脉，插至动脉圆锥时，略向后退，在心室收缩时，沿心室后壁方向下插，经主动脉瓣插入心室腔内（不可插入过深，以免心室壁堵住插管下口）。若插管成功进入心室，管内液体会随着心室搏动而上下移动。用左主动脉近心端的备用线结扎插管，并将结扎线固定于插管侧面的小突起上。5、游离蛙心提起插管，在结扎线远端分别剪断主动脉左右分支；剪断左右肺动脉和前后腔静脉，将心脏离体。用滴管吸尽插管内的余血，加入新鲜

4、任试液反复冲洗数次，直至液体完全澄清。保持灌流液面高度恒定（1~2cm），即可进行试验。6、仪器连接用试管夹将制备好的离体蛙心固定于支架上，在心脏舒张琪用蛙心夹夹住心尖部，并连接到张力换能器上（勿让心脏受到过度牵拉）。将张力换能器的输出线与生物信号采集系统相连。（2）观察项目描记正常心脏收缩曲线并分析：曲线的疏密：代表心跳的频率，可根据显速来计数。曲线的规律：代表心跳的节律性。曲线的幅度：代表心室收缩的强弱。曲线的顶点水平：代表心室收缩的程度。曲线的基线：代表心室舒张的程度。1、不同浓度Ca2+对心脏节律性的影响吸出插管内全部的任试液，分别换入配置好的（1/

5、4、1/2、1、2、4）倍的Ca2+浓度的任试液。每次换入新的试剂前用任试液润洗蟾蜍离体的心脏。2、结果分析3、正常心脏收缩图在不同浓度（1/4、1/2、1、2、4）倍Ca2+影响下，心脏收缩图。预期结果：低浓度钙离子会一定程度的增快心率，增加心跳幅度。过高的钙离子会出现钙僵直现象。注意事项：1、每次换液时，插管内的液面应保持相同的高度。2、加试剂时，先加1～2滴，用吸管混匀如果作用不明显可补加。3、每个实验观察项目应有前后对照，并做标记。4、滴加任试液于心脏表面使之保持湿润。5、注意避免通过滴管造成所用药物之间的相互污染。6、固定换能器时，头端应稍向下倾斜

6、，以免自心脏滴下的液体流入换能器内。参考资料：1心脏停搏液中钙离子浓度对幼鼠心肌的影响　　第四军医大学学报2000年第21卷第5期　　金峰　李彤　杨景学　候晓彬　张金洲2百度文库>教育专区>高等教育>医学