《绿茶与肾纤维化》word版

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1、[转载]绿茶抗大鼠肾间质纤维化作用的实验研究已有549次阅读2010-9-2309:50

2、个人分类:未分类

3、系统分类:论文交流

4、关键词:绿茶;慢性肾衰竭;大鼠;肾间质纤维化  绿茶抗大鼠肾间质纤维化作用的实验研究 邱模炎1,姜岳2,孙慧1(1中国中医科学院望京医院,北京 100102;2北京市朝阳区太阳宫社区卫生服务中心,北京 100028) 摘要:目的观察绿茶抗肾间质纤维化的作用以及对肾间质纤维化大鼠肾脏Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的影响。方法采用“单肾切除加腺嘌呤灌胃法”建立大鼠慢性肾衰竭模型。治疗组予绿茶液灌胃治疗,对照组予尿毒清溶液灌胃治疗。给药4

5、周后处死,肾脏石蜡切片分别进行HE染色、PASM染色、Masson染色、SiriusRed染色、Mallory染色,光镜下观察大鼠肾组织5种染色的病理形态学改变,HE染色进行肾小管间质病变半定量分析,PASM染色、Masson染色、SiriusRed染色进行肾脏组织病理学图像分析。结果绿茶组在肾间质纤维化面积、肾小球系膜积分光密度值、肾间质中I、Ⅲ型胶原分布面积等方面的作用与模型组对比,P<0.05。绿茶能够减轻腺嘌呤对大鼠肾脏的病理损害,并具有抗肾间质纤维化的作用。结论绿茶有抑制I、Ⅲ型胶原纤维增生的作用,这可能是绿茶防治肾间质纤维化、延缓慢

6、性肾衰竭发展进程的机制之一。 关键词:绿茶 慢性肾衰竭 大鼠 肾间质纤维化注:本文转载自:《茶叶科学》,2008,28(5):353-357. 目前对非药物疗法的研究越来越多,非药物疗法以其使用安全而受到广泛关注。在慢性肾衰竭的治疗上,中医非药物疗法被广泛使用。绿茶饮用十分广泛,茶多酚是从绿茶中提取出来的有效成分,是由茶叶中的黄烷醇类、花色素类、花黄素类、缩酸及缩酚酸类组成的化合物,可以防止免疫过强和炎症反应,抑制细胞和机体脂质过氧化,从而能够抑制肾病的发生;同时茶多酚还可抗凝、抗血栓、改善血液流变学,从而可以预防肾病进展,改善慢性肾功能不全的

7、症状。Manabu等研究表明摄入绿茶可改善慢性肾衰竭的症状[1]。但目前尚无绿茶防治慢性肾衰竭的实验研究,有必要开展绿茶防治慢性肾衰竭的实验研究。1实验材料1.1实验动物Wistar雄性健康大鼠65只,6周龄,清洁级,体重200±20g,由中国医学科学院实验动物研究所提供(合格证号:SCXR京:2005-0013)。1.2实验药物1.2.1造模药物:腺嘌呤,购自北京化学试剂公司,用前将其加入蒸馏水中配制成20mg/ml的混悬液。1.2.2治疗药物:绿茶为信阳毛尖,河南省信阳市云雾赛山茶厂2006年出品。根据文献[2]的方法,取正常人60kg体重

8、用药剂量的7倍为大鼠剂量,人用剂量为10g/60kg,则每100g大鼠每日剂量为:0.17g。用90℃初开沸水冲泡茶叶3~5分钟,泡好冷却过滤,再浓缩制成含生药量为0.12g/ml的浓缩液。盛于消毒干净磨口玻璃瓶中,密封储存于4℃冰箱内备用。1.2.3阳性对照药物:尿毒清颗粒由广州康臣药业有限公司生产,批号:20060207。根据文献[3],大鼠使用尿毒清的剂量为3.75g/kg。将尿毒清颗粒以蒸馏水配制成含药量为375mg/ml的溶液。2实验方法2.1模型制作方法:采用“单肾切除加腺嘌呤灌胃法”建立大鼠慢性肾衰竭模型[4]。大鼠行左肾切除术1

9、周后,每天以200mg·kg-1·d-1剂量的腺嘌呤混悬液灌胃造模,连续28天。2.2随机分组方法:55只大鼠根据体重按随机数字表法随机抽取10只作为正常组,10只作为假手术组,35只行左肾全切术。术中及术后1周死亡大鼠5只,术后1周,将存活的30只大鼠根据体重按随机数字表法随机分为模型组、绿茶组、尿毒清组各10只。2.3给药方法:正常组、假手术组、模型组:于分组当天开始每天灌胃2ml蒸馏水,直至第28天。治疗各组于术后分组当天开始,每天灌胃直至第28天。尿毒清组按3.75g·kg-1·d-1的剂量给尿毒清溶液,绿茶组按1.7g·kg-1·d-

10、1的剂量给绿茶液。2.4观察指标2.4.1病理染色方法:肾脏石蜡切片,分别进行苏木素伊红(HE)染色、六胺银(PASM)染色、马松(Masson)染色、天狼星红(SiriusRed)染色、Mallory染色,光镜下观察大鼠肾组织5种染色的病理形态学改变。2.4.2肾小管间质病变半定量分析方法:根据Sergio的半定量分级标准,随机选取HE染色每组镜下的20个视野,进行半定量分析。2.4.3肾脏组织病理学图像分析方法:在每组PASM染色切片包含肾小球的区域,随机选取200倍光镜下10个视野,用MetaMorph图像分析系统对所选取视野中PASM染

11、色肾小球系膜阳性目标光密度值进行测定。每组Masson染色切片在光镜200倍视野下分别观察10个互不重叠的皮质视野,借助HMIAS-2000高清晰彩色

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