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时间:2018-12-24
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1、常用药品试剂和培养基的配制(一) 反应剂 1、检查葡萄糖试剂配方一 本尼迪克(Benedict)溶液(1)在400毫升蒸馏水中溶解85克柠檬酸钠和50克无水碳酸钠。(2)在50毫升加热的蒸馏水中溶解8.5克硫酸铜。把硫酸铜溶液缓缓倒入柠檬酸钠-碳酸钠溶液中,边加边搅拌,如果产生沉淀,要过滤。本尼迪克溶液配制后能长期使用(存放时间较久而产生沉淀是,取上层清液使用,不必重新配制)。本尼迪克溶液用来测试食物、血液和尿中的葡萄糖,可测出0.15~0.20%的葡萄糖。这种溶液跟未知物同加热时,如果未知物中有葡萄糖,会形
2、成红色的氧化亚铜沉淀物。配方二 裴林(Fehling)溶液(1)把34.5克硫酸铜溶于500毫升蒸馏水中。(2)把125克氢氧化钾(钠)和173克酒石酸钾钠溶解在500毫升蒸馏水中。上述两种溶液应分别保存。在检测葡萄糖时,使他们等量的混合,加入待测物的试管内,加热到沸腾。如果有葡萄糖,会形成红色的氧化亚铜沉淀物。2、检查淀粉的试剂鲁哥氏(Lugol’s)溶液(碘液)取6克碘化钾溶于20毫升蒸馏水中,搅拌到溶解后,加入4克碘,等碘充分溶解,在加入80毫升蒸馏水,贮存在棕色试剂瓶内。碘液用来测试食物样品或叶片中的淀粉,也
3、用作染色剂,例如可染色鞭毛、纤毛和细胞核等。3、检查蛋白质的试剂配方一 米伦(Millon)试剂在60毫升浓硝酸(比重1.42)中溶解40克汞(水浴加温可助溶),溶解后加入两倍体积的蒸馏水稀释,静置澄清后,取它上层的清液备用。这种试剂可长期保存。在待测物中加入少量米伦试剂,加热,如果有蛋白质,会出现红色。这种试剂不能用来测定尿中的蛋白质。配方二 双缩尿试剂分别配制10%氢氧化钠溶液和1%硫酸铜溶液。在3毫升待测物中加入1毫升10%氢氧化钠溶液和1滴1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质,会出现紫色反应。4、检查脂肪的试剂苏丹
4、Ⅲ(Ⅳ)酒精饱和溶液取0.2克苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ),放入纯酒精中,加热,使它充分溶解,成为饱和酒精溶液,过滤后密闭在试剂瓶内保存备用。5、酸碱指示剂配方一 酚酞试剂和试纸酚酞试剂 取1克酚酞,溶解在100毫升60%的酒精溶液里,装在试剂瓶内密闭保存。酚态试纸 取1克酚酞,溶解在100毫升95%酒精溶液里,加入00毫升蒸馏水。把绿纸条放入酚酞溶液中浸湿后,取出,放在无氨气影响处晾干。酚泰试剂(试纸) pH值变色范围8.2~10,在酸性和中性溶液中都无色,再碱性溶液中呈深红色。配方二 红蓝石蕊试纸取市售石蕊1克,放
5、在80毫升10%酒精溶液中搅拌,使它溶解,然后过滤。把滤液分成两份。1份滴入稀磷酸或稀硫酸,到出现红色为止。另1份滴入稀氢氧化钠溶液,到出现蓝色为止。在上述制备的溶液中分别浸湿滤纸条,随后取出滤纸条,放在蔽光处、无酸碱性气体影响的地方晾干,即的红、蓝两种石蕊试纸。红石蕊试纸在碱性溶液中变蓝,蓝石蕊试纸在酸性溶液中变红。6、检查二氧化碳的试剂检查二氧化碳的试剂,可用溴代麝香草酚蓝溶液和石灰水。配方一 溴代麝香草酚蓝溶液取0.1克溴代麝香草酚蓝,溶解在100毫升蒸馏水里,滴入少量0.1%氢氧化钾溶液,使它成为弱碱性溶液而
6、呈蓝色。溴代麝香草酚蓝溶液pH值变色范围是6.0(黄)~7.6(蓝)。待测物中如果有二氧化碳,会形成碳酸而使溶液变成黄色。配方二 石灰水在蒸馏水中加入生石灰(氧化钙),变加边搅拌,直到加入的生石灰不再溶解,呈饱和状态时为止。在石灰水澄清后,倾出上层清液,用滤纸过滤,放在密闭瓶内保存。如果测定的物质中有二氧化碳,会生成碳酸钙,使石灰水变浑浊。7、检查细胞生活力的试剂检查细胞有无生活力,可用中性红甲基蓝试剂。配制的方法是先分别配制1%中性红溶液和1%甲基蓝溶液,这两种溶液各取1份混合,用来鉴定细胞的死活。该试剂使活细胞的
7、液泡染上红色,而使死细胞全部染成蓝色。(二)分离液1、肌细胞分离液配方一 马克凯郎(Maccallum)液取1份浓硝酸、2份甘油、3份水,混合后就得到马克凯郎液。把新鲜的肌肉组织小块(横纹肌、心肌和平滑肌)投入这种溶液里浸渍,分离时间需1~3日。这种溶液尤其适于分离横纹肌核心肌细胞。配方二 氢氧化钾溶液取35克氢氧化钾,放在100毫升蒸馏水中,加热,使它完全溶解后,在室温下冷却。把新鲜的肌肉组织块投入氢氧化钾溶液中,浸泡15~30分钟后,肌细胞便可分离。2、上皮细胞分离液配方一 福尔马林—氯化钾溶液称取58.44
8、克氯化钠,用蒸馏水溶解,再稀释到1000毫升,加入2毫升福尔马林。这种溶液是很好的上皮细胞分离液,分离很迅速,而且能保护纤细的上皮细胞纤毛。小肠和气管的上皮组织小块,放在此溶液里2小时即可分离,口腔和皮肤上皮组织小块的细胞分离一般需3日左右。配方二 水和氯醛溶液称取5克水和氯醛,用蒸馏水溶解,再稀释到100毫升,就得到5%水合氯
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