现代生物科技专题知识点

《现代生物科技专题知识点》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、现代生物科技专题知识点专题1基因工程一．知识网络概念：又叫DNA重组技术，是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出基因工程工具更符合人们需要的新的生物类型和生物产品来源：主要从原核生物分离纯化（“分子手术刀”）限制性核酸内切酶（限制酶）作用：识别双链DNA中某种特定的核苷酸序列，并使特定部位的磷酸二酯键断开结果：产生黏性末端或平末端E·coliDNA连接酶DNA连接酶“分子缝合针”基来源：大肠杆菌本作用：连接黏性末端T4DNA连接酶工来源：T4

2、噬菌体具作用：可连接两种末端常用载体：质粒能在受体细胞中复制并稳定保存基因进入受体细胞的载体必备条件具有一至多个限制酶切点（“分子运输车”）具有标记基因其他载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒目的基因：主要指编码蛋白质的结构基因从基文库中获取目的基因方法利用PCR技术扩增目的基因用化学方法直接人工合成基因组文库部分基因文库（cDNA文库）目的基因的获取目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因基因工程的操作程序基因表达载体

3、的构建将目的基因导入植物细胞：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法将目的基因导入动物细胞：显微注射法Ca2+含重组DNA分将目的基因导入微生物细胞：受体细胞↓感受态子的缓冲液感受态细胞吸细胞收DNA分子将目的基因导入受体细胞检测转基因生物的染色体DNA是否插入了目的基因（DNA分子杂交法）↓检测目的基因是否转录出了mRNA（分子杂交法）↓检测目的基因是否翻译成蛋白质（抗原—抗体杂交法）目的基因的检测与鉴定抗虫转基因植物—减轻农药对环境的污染植物基因工程抗病转基因植物抗逆转基因植物利用转基因改良植物的品质

4、提高动物生长速度改善畜产品的品质动物基因工程用转基因动物生产药物用转基因动物作器官移植的供体基因工程药品的生产基因工程应用把正常基因导入体内，使该基因表达产物发挥作用基因治疗体外基因治疗方法体内基因治疗基因工程操作中的几个问题DNA连接酶、DNA聚合酶等的理解蛋白质工程与基因工程比较项目蛋白质工程基因工程区别过程预期蛋白质功能→设计蛋白质结构→推测氨基酸序列→推测脱氧核苷酸序列→合成DNA→表达出蛋白质获取目的基因→构建表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定实质定向改造或生产人类所需蛋白质定向地改

5、造生物的遗传性状，以获得人类所需的生物类型或生物产品（基因的异体表达）结果生产自然界没有的蛋白质生产自然界中已有的蛋白质联系蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。因为对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质，必须通过基因修饰或基因合成实现如果有一亲代DNA上某个碱基发生突变，一定会使其子代的性状发生改变吗？①体细胞中某基因发生改变，生殖细胞中不一定出现该基因；②DNA上某个碱基对发生改变，它不一定位于基因的中能编码氨基酸的部位；③若为父方细胞质内的DNA上某个碱基对发生改变，则受精后一般不

6、会传给子代；④若该亲代DNA上某个碱基对发生改变产生的是一个隐性基因，并将该隐性基因传给子代，而子代为杂合子，则隐性性状不会表现出来；⑤根据密码子的兼并性，有可能翻译出相同的氨基酸；⑥性状表现是遗传基因和环境因素共同作用的结果，在某些环境条件下，改变了的基因可能并不会在性状上表现出来。思考：真核生物的基因导入细菌细胞后，不能正常发挥功效的可能原因有哪些？①被细菌体内的限制性内切酶破坏。②该基因指导合成的蛋白质不能在细菌体内正确修饰和表达。②细菌的RNA聚合酶不能识别真核基因的位点，致使不能启动转录。④细

7、菌细胞中没有切除内含子转录部分的酶专题2细胞工程1.植物组织培养与动物细胞培养的比较植物组织培养动物细胞培养原理细胞的全能性细胞的增殖培养基的物理性质固体液体（合成培养基）培养基的成分水、矿质元素、维生素、蔗糖、氨基酸、琼脂、激素等葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等结果培育成新的植株或组织培育成细胞系或细胞株培养目的①植株快速繁殖②脱毒植株的培育③人工种子④生产药物、杀虫剂等⑤转基因植物的培育①蛋白质生物制品的生产②皮肤移植材料的培育③检测有毒物质④生理、病理、药理学研究取材植物幼嫩的部位或花药

8、等动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织其他条件均为无菌操作，需要适宜的温度、pH、O2等条件（1）植物组织培养　　（2）动物细胞培养　①概念：取动物体的相关组织分散成单个细胞后，在适宜培养基中使细胞生长和增殖的过程。②基本过程：培养的动物细胞大都取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官组织，将组织取出来以后，先用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理，使细胞分散成单个细胞，然后配制一定浓度的悬浮液，在培养瓶中进行原代培养。随着细胞的生长和增殖，大多