现代分子生物学实验

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1、分子生物学实验一、课程纲要说明分子生物学实验是生物科学的一门主干实验课程。分子生物学技术作为现代生物技术中最为先进的实验手段之一，现在已经渗透到生命科学、医学及工农业生产等各个领域中，是一种非常重要的现代技术手段。通过此实验教学使学生了解分子生物学技术发展的现状、未来及应用，使学生掌握分子生物学技术的基本原理及相关的实验操作技术，从而使学生更进一步加深理解和巩固所学的分子生物学课程的理论知识。二、实验对象：生物科学专业本科学生三、实验学时数：18学时四、实验项目及内容：实验一质粒DNA的提取及酶

2、切一、实验目的通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒和酶切的方法。二、实验内容1、碱裂解法提取质粒DNA；2、酶切DNA。三、实验仪器及用品1、仪器：恒温培养箱、恒温摇床、台式高速离心机、高压灭菌锅、指管（微量离心管）、指管（微量离心管）架、加样枪、移液器架子、超声波清洗仪、超净工作台、稳压稳流电泳仪、多用途紫外分析仪、微波炉、恒温磁力搅拌器2、用（药）品：葡萄糖、三羟甲基氨基甲烷（Tris）、乙二胺四乙酸（EDTA）、NaOH、SDS、乙酸、钾、冰乙酸、氯仿、乙醇、胰RNA酶、氨卡青霉素、蔗糖、

3、溴酚蓝、8-羟基喹啉、β疏基乙醇、盐酸、含pUC19质粒、EcoRI吸头、小指管四、实验人数：每班分2次，每次分6~8组，每组3~4人。五、实验学时：3学时六、实验类型：设计实验要求：选修实验二琼脂糖凝胶电泳检测DNA一、实验目的：通过本实验学习琼脂糖凝胶电泳检测DNA的方法和技术。二、实验内容：1．制备琼脂糖凝胶2．加样3．电泳4．染色5．观察电泳结果、拍照三、实验仪器及用品1．仪器：恒温培养箱、琼脂糖凝胶电泳系统、台式离心机、高压灭菌锅、紫外线透射仪、指管（微量离心管）、指管（微量离心管）架

4、2．用（药）品：蔗糖、三羟甲基、氨基甲烷（Tris）、乙二胺四乙酸（EDTA）、硼酸DNAmarker、溴酚蓝、溴化乙、含pUC19质粒、吸头四、实验人数：每班分2次，每次分6---8组，每组3~4人。五、实验学时：3学时六、实验类型：设计实验要求：选修实验三大肠杆菌感受态细胞的制备及转化一、实验目的：通过本实验，掌握大肠杆菌感受态细胞的制备及转化的方法和技术。二、实验内容：1．培养大肠杆菌2．制备大肠杆菌感受态细胞三、实验仪器及用品1．仪器：超净工作台、低温离心机、恒温摇床、恒温箱、-70冰箱

5、（超低温冰箱）、恒温水浴锅、50ml离心管和离心机、吸头、试管、培养皿、锥形瓶、试管架、吸量管、量筒、滴管、吸耳球2.用（药）品：CaCI2、胰蛋白胨、酵母提取物、氯化钠、氨卡青霉素、大肠杆菌DH5a、Puc19质粒四、实验人数：每班分2次，每次分6—8组，每组3~4人。五、实验学时：3学时六、实验类型：设计实验要求：必修实验四哺乳动物基因组DNA的提取一、实验目的：通过本实验了解并掌握提取基因组DNA的原理和步骤，以及相对分子质量较大的DNA的琼脂糖凝胶电泳技术。二、实验内容：1．制备哺乳动物

6、肝脏匀浆2．提取DNA三、实验仪器及用品1．仪器：台式高速离心机、玻璃匀浆器、高压灭菌锅、微量指管、一次性灭菌过滤器、10ml注射器、水浴锅、加样枪、移液器架子、超净工作台、稳压稳流电泳仪、多用途紫外分析仪、微波炉、恒温磁力搅拌器、液氮罐2．用（药）品：鼠肝脏、Tris、SDS、EDTA、蛋白脉K、RNA酶、DNA相对分子质量标准物、λDNA/EcoRI+HindⅢ相对分子质量标准物、HCI、NaCI、NaAc、平衡酚、氯仿、异戊醇、硼酸、溴酚蓝、蔗糖四、实验人数：每班分2次，每次分6~8组，每

7、组3~4人。五、实验学时：3学时六、实验类型：验证实验要求：必修实验五植物总RNA的提取一、实验目的：通过本实验学习从植物组织中提取RNA的方法。二、实验内容：1．总RNA的提取2．甲醛变性琼脂糖凝胶电泳分析总RNA三、实验仪器及用品1．仪器：低温离心机、台式离心机、200℃以上烘箱、琼脂糖凝胶电泳系统、紫外线透射仪、高压灭菌锅、液氮罐、50ml离心管、研钵、剪刀、橡胶手套2．用（药）品：DEPC、异硫氰酸胍、乙酸钠、LiCI、酚、氯仿、乙醇、甲醛、吗啉代丙烷磺EDTA、琼脂糖四、实验人数：每班

8、分2次，每次分6~8组，每组3~4人。五、实验学时：3学时六、实验类型：验证实验要求：必修实验六植物基因组DNA的提取一、实验目的：通过本实验学习从植物组织中提取DNA的方法。二、实验内容：从植物组织中提取DNA三、实验仪器及用品1．仪器：高速离心机和离心管（50ml）、台式离心机、吸头、研钵、玻璃匀浆器、高压灭菌锅、微量指管、一次性灭菌过滤器、10ml注射器、水浴锅、移液器、超净工作台、稳压稳流电泳仪、多用途紫外分析仪、微波炉、恒温磁力搅拌器、液氮罐2．用（药）品：Tris、EDTA、NaCI