生物选修三易考知识点背诵人教

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1、生物选修三易考知识点背诵专题1 基因工程基因工程的别名基因拼接技术或DNA重组技术操作环境生物体外操作对象基因操作水平DNA分子水平基本过程剪切→拼接→导入→表达结果产生人类需要的基因产物特点打破种的界限,定向改造生物本质基因重组基因工程的概念按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,又叫做DNA重组技术。1.1.基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。300多种微生物

2、分离出4000多种限制酶(2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。(4)限制性内切酶与DNA解旋酶的区别限制酶DNA解旋酶区别 割特定的核苷酸序列的磷酸二酯键 将DNA两条链的氢键打开形成两条单链(5)、限制酶的识别序列:能被限制性内切酶特异性识别的切割部位都具有回文序列:在切割部位,一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致。限制酶所识别的序列,无论是6个碱基还是4个碱基,都可以找到一条中轴线(如图

3、),中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称、重复排列的。当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时,产生的是黏性末端。当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,产生的是平末端。被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,它们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。(6)要获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口?可产生几个黏性末端?两个四个25思考:(1)、限制酶存在于原核生物中的作用是什么?原核生物易受自然界外源DNA的入侵,但生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制,以防止外来病原物的侵害。限制酶就是细菌的一种防御性工具,当外源DNA侵入时,会利用限制

4、酶将外源DNA切割掉,以保证自身的安全。所以,限制酶在原核生物中主要起到切割外源DNA、使之失效,从而达到保护自身的目的。(2)、为什么限制酶不剪切细菌本身的DNA?通过长期的进化,细菌中含有某种限制酶的细胞,其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列,或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上,使限制酶不能将其切开。这样,尽管细菌中含有某种限制酶也不会使自身的DNA被切断,并且可以防止外源DNA的入侵2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶)的比较:①相同点:都缝合磷酸二酯键。②区别:E·coliDNA

5、连接酶来源于T4噬菌体,只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4-DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。3.“分子运输车”——载体(1)载体具备的条件:①携带外源DNA片段的载体能在受体细胞中复制并稳定保存。或者整合到染色体DNA上,随染色体DNA同步复制②具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入。③具有标记基因,供重组DNA的

6、鉴定和选择。(2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。(3)其它载体:λ噬菌体的衍生物、动植物病毒。思考:⑴作为分子运输车——载体,如果没有切割位点将会怎样?25⑵霍乱菌的质粒有多个限制酶切点,你会用它来做分子运输车吗?⑶假如目的基因导入受体细胞后不能复制,转基因生物能有预想的效果吗?⑷目的基因有没有进入受体细胞,如何去发现?标记基因是否表达真正被用作载体的质粒都是在天然质粒的基础上进行人工改造的。补充:真核生物与原核生物基因结构的编码区:能转录相应的信使RNA,能编码蛋白质非编码区:①不能转录为信使

7、RNA,不能编码蛋白质②有调控遗传信息表达的核苷酸序列,在该序列中,最重要的是位于编码区上游的RNA聚合酶结合位点。启动子:位于基因首端一段能与RNA聚合酶结合并能起始mRNA合成的序列。没有启动子,基因就不能转录。终止子:位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断,它能阻碍RNA聚合酶的移动,并使其从DNA模板链上脱离下来,使转录终止。RNA聚合酶:能够识别启动子上的结合位点并与其结合的一种蛋白质.催化DNA转录成mRNA原核细胞基因的编码区是连续的、不间隔的,真核细胞基因的编码区是间隔的、不连续的.真核基

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