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时间:2018-12-22
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1、为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划folin_wu法测定血糖含量实验报告 实验三:福林(Folin)-酚试剂法测定蛋白质的浓度 一、实验目的 1.学会制备无蛋白血滤液。 2.掌握Folin-Wu法测定血糖含量的原理和方法。 3.掌握7200型可见分光光度计的使用方法。 二,实验原理 蛋白质或多肽分子中有带酚基酪氨酸或色氨酸,在碱性条件下,可使酚试剂中的磷钼酸化合物还原成蓝色。蓝色的深浅与蛋白质的含量成正比,可用比色法测定。 三.实验仪器 1.试管 2.移液管 3.卵清蛋白片 4.72
2、20分光光度计 四.实验试剂 1、碱性硫酸铜溶液 A液:无水碳酸钠35g,酒石酸钠13g及碳酸氢钠11g溶于蒸馏水,稀释定容至1000ml. B液:硫酸铜晶体5g,溶于蒸馏水并定容至100ml。 临用时,A液:B液=9:1混合,混合液于冰箱中保存。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 2、标准葡萄糖溶液 (1)1%葡萄糖母液:称取葡萄糖,溶于蒸馏水,稀释并定容至100ml
3、。 (2)葡萄糖标准液:取葡萄糖母液于100ml容量瓶中,加蒸馏水定容。 3、10%钨酸钠溶液: 称取钨酸钠10g,溶于蒸馏水并定容至100毫升。 4、/LH2SO4溶液: 于53ml蒸馏水中加入1ml的浓硫酸。 五.实验步骤 1、无蛋白血滤液的制备: 用奥氏吸管吸取全血1ml,缓缓放入100ml锥形瓶中,加蒸馏水7ml,摇匀,溶血后加10%钨酸钠1ml,摇匀.。 再加/LH2SO41ml,边加边摇,加毕充分摇匀,放置5~15分钟,至沉淀变为暗棕色。 用干滤纸过滤。先倾入少许,待滤纸湿润后在全部倒入,如滤液不清需重新过滤。每毫升无蛋白血滤液相当于1/10ml全血。
4、 2、血糖的定量测定:目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 取25ml的血糖管3支,编号。第一支血糖管中加入2ml蒸馏水;第二支血糖管中加2ml标准葡萄糖液;用吸管吸取无蛋白血滤液2ml,放入第三支血糖管中。然后向三支血糖管中各加入2ml新配制的碱性硫酸铜溶液,同时置于沸水浴中8分钟,取出,在流水中迅速冷却后,勿摇动,各加4ml酸性钼酸盐溶液。 一分钟后,用蒸馏水稀释至25ml,
5、混匀,用7200分光光度计在420nm波长处比色,以空白管调节零点。 六.数据处理 按下式计算100ml全血中所含血糖的含量 m=A1/A0×C0÷×100 式中:m=100ml全血中含血糖毫克数;C0=标准液葡萄糖含量A1=样品液光吸收值;A0=标准液光吸收值 无蛋白血溶液相对于全血 得出m= 七.实验分析 一.提高实验准确度的措施? 1.应尽可能把移取的血液完全放出,即等待挂在壁上的血液滴下后再进行接下来的操作。 2.若过滤后滤液浑浊不为无色透明,则应二次过滤。 3.尽量保证三只试管水浴时间相同。 二、实验中,血糖管有什么作用? 由于空气中的氧对Cu2O
6、会产生再氧化作用从而影响测定结果,为减少Cu+与空气的接触,通过血糖管的细颈阻挡空气,防止形成Cu2+。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展,保障停车场安保新项目的正常、顺利开展,特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划 三.实验过程中,为什么要用流水冷却加入碱性硫酸铜液反应后的血糖管? 使其尽快降温,防止高温使钼蓝氧化。 福林(Folin)-酚试剂法测定蛋白质的浓度 一、原理 蛋白质或多肽分子中有带酚基酪氨酸或色氨酸,在碱性条件下,可使酚试剂中的磷钼酸
7、化合物还原成蓝色。蓝色的深浅与蛋白质的含量成正比,可用比色法测定。 二、实验仪器 1.卵清蛋白片 分光光度计 3.试管 4.移液管 三、实验试剂 酚试剂A:碱性铜溶液 甲液:取Na2CO32g溶于/l氢氧化钠溶液中乙液:取晶体,溶于1%酒石酸钾100ml中。 临用时按甲:乙=50:1混合使用。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解,并感受到安保行业的发展的巨大潜力,可提升其的专业水平,并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发
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