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时间:2018-12-22
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1、Chapter11.分子遗传学的概念:分子遗传学是研究遗传信息大分子的结构和功能的科学。它依据物理、化学的原理来解释遗传现象,并在分子水平上研究遗传机制及遗传物质对代谢过程的调控。其研究的对象是从基因到表型的一切细胞内与遗变异有关的分子事件。不仅仅包括中心法则中从DNA到蛋白质的过程。2.DNA变性(denaturation):在理化因素作用下,DNA双螺旋的两条互补链松散而分开成为单链,从而导致DNA的理化性质及生物学性质发生改变。变性后特点:①增色效应;②旋光性下降;③粘度降低;④生物学功能丧失或改变。3.DNA复性(renaturation):变性DNA在适当条件下,又可以使两
2、条彼此分开的链重新缔合成为双螺旋结构。复性速率公式:C/Co=1/(1+kCot)(C:t时单链DNA的浓度;k:反应常数;Co:t=0时DNA的初始浓度。)C/Co=1/2时,即复性反应完成一半时Cot值定义为Cot1/2。Cot1/2=1/k图:理解4.Cot½的大小与DNA的分子量及复杂性有关:(1)Cot½越大,表示复性速度越慢,DNA的分子量越大;(2)在不存在重复序列的情况下,Cot½值与基因组的大小成正比,也即与反应体系中的复杂度成正比;(3)在有重复顺序的复性中,在同一个复性曲线上的各动力学组分的Cot1/2并不因基因组的大小而增减,而是与DNA序列的重复频率成反比。
3、5.DNA复制原则:(1)半保留复制(2)复制起始点(3)双向复制(4)半不连续复制6.DNA复制过程:(知道)(1)复制起始DnaB(解螺旋酶,rep蛋白),DnaA和DnaC参与解链,形成复制叉;SSB结合并稳定解开的单股DNA链;引物酶(DnaG)与上述因子、酶构成引发体,并合成RNA引物。解链造成的超螺旋,由拓扑异构酶实现超螺旋的转型,即把正超螺旋转变为负超螺旋。(原核生物只有一个起始点(OriC),真核生物有多个)(2)DNA链的延伸DNA聚合酶Ⅲ,前导链,滞后链;(3)复制终止DNA聚合酶Ⅰ,连接酶。拓扑异构酶解链酶5/3/3/5/3/5/DNA聚合酶Ⅲ单链结合蛋白DNA
4、聚合酶Ⅰ前导链随后链DNA连接酶冈崎片段引物酶7.DNA复制相关酶及结合位点:8.DNA的损伤:物理因素(紫外线、(电离、核)辐射);化学诱变剂如EMS等。突变类型:(1)点突变:转换,颠换(2)移码突变:插入,缺失(3)重组突变损伤修复:(1)光修复(2)切除修复(3)重组突变(4)SOS修复9.DNA的转录(Transcription):(知道)转录的模板:DNA双链中的一条。模板链:DNA双链中具有转录功能的一条链(templatestrand)。编码链:贮存有遗传信息与模板链互补的一条链(codingstrand)。转录的过程:1、转录起始①RNA聚合酶识别、结合启动子启动子
5、:-10核苷酸——TATAAT(Pribnow盒)富含AT;-35核苷酸——TTGACA。②形成第一个3/,5/-磷酸二酯键,σ因子脱离全酶。(第一个核苷酸:GTP或ATP)2、转录延长(transcriptionelongation)核心酶催化,在模板指导下沿5/-3/方向延伸RNA链。3、转录终止:(1)非依赖于ρ因子的终止子1、GC丰富,重复序列2、形成发夹样结构(2)依赖于ρ因子的终止子转录的特点:不对称转录:(1)RNA分子上只有一条可转录(2)模板链并不总是在同一单链上RNA合成方向:5/→3/转录底物:A,U,C,G转录酶:RNApolymerase10.蛋白质合成(知
6、道)翻译过程:翻译的起始(initiation)(一)原核生物翻译起始复合物形成核蛋白体大小亚基分离;mRNA在小亚基定位结合;起始氨基酰-tRNA的结合;核蛋白体大亚基结合。(二)真核生物翻译起始复合物形成核蛋白体大小亚基分离;起始氨基酰-tRNA结合;mRNA在核蛋白体小亚基就位;核蛋白体大亚基结合。肽链合成延长:指根据mRNA密码序列的指导,次序添加氨基酸从N端向C端延伸肽链,直到合成终止的过程。三个阶段:进位指根据mRNA下一组遗传密码指导,使相应氨基酰-tRNA进入核蛋白体A位;成肽是由转肽酶(transpeptidase)催化的肽键形成过程;转位肽链合成的终止:当mRNA
7、上终止密码出现后,多肽链合成停止,肽链从肽酰-tRNA中释出,mRNA、核蛋白体等分离,这些过程称为肽链合成终止。终止相关的蛋白因子称为释放因子(releasefactor,RF)原核生物释放因子:RF-1,RF-2,RF-3;真核生物释放因子:eRF。释放因子功能:识别终止密码:RF-1特异识别UAA、UAG;RF-2可识别UAA、UGA;诱导转肽酶改变为酯酶活性,相当于催化肽酰基转移到水分子-OH上,使肽链从核蛋白体上释放。11.密码子特点:(1)连续
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