2019版高考生物一轮复习 第十二单元 生物技术实践 第一讲 无菌操作技术实践练习 苏教版

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1、第一讲无菌操作技术实践[课时作业]　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　单独成册1．微生物强化采油(MEOR)是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油粘度的原理，通过向油井中注入含微生物的水来提高采油率的新技术。以下是人们筛选、纯化和培养该类微生物的实验操作。请回答下列问题：(1)土壤是微生物的大本营，该类微生物应取自__________的土壤。(2)筛选和纯化该类微生物时，除考虑微生物生长所需的营养外，还要考虑微生物生长所需的温度、________以及是否需要O2等。倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是______________

2、______________________________。(3)在平板划线接种时，为保证每次划线都不能有杂菌污染，则每次划线前都要________________，平板划线结束后，最后一次划的线不能与第一次划的线__________。接种后还应密封培养的原因是__________，培养一段时间后在培养基上形成降油圈，此时选取__________就可获得可能的高效菌株。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在__________条件下进行。解析：(1)筛选、纯化降解石油的微生物，应取长期被石油污染的土壤。(2)微生物的培养需要满足微生物生长的营养条件以及温度、pH和气

3、体情况等。平板倒置可防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染。(3)平板划线法接种时，为降低每次划线杂菌污染的概率，每次划线前都要对接种环灼烧灭菌；划线结束时，最后一次划的线不能与第一次划的线相交(相接、相连、交叉等)。密封培养是为了制造无氧环境，故该类降解石油的微生物的呼吸作用类型是厌氧型。培养一段时间后在培养基上会形成降油圈，降油圈的大小与菌种降解石油的能力有关，降油圈越大，菌种降解石油的能力越强。在微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。答案：(1)长期被石油污染(含石油多)(2)pH　防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染(3)对接种环灼烧灭菌　相交

4、(相接、相连、交叉等)　该类微生物是厌氧型　降油圈大的菌落　无菌2．土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。某课题小组通过“土壤取样→选择培养→梯度稀释→鉴别培养”的实验流程，从土壤中筛选出了降解尿素的菌株。请依据所学知识回答下列问题：(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以__________为唯一氮源的固体培养基上。培养过程中，对培养基、培养皿常采用的灭菌方法分别是___________。(2)在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在_____________________________旁进行操作。稀释处理的目的是________________

5、_______________。(3)若培养基中存在能分解尿素的细菌，其菌落周围会出现__________，这是由于尿素被分解产生____________________________________________________，遇培养基中的酚红指示剂产生颜色变化。变色区域越大，表明该菌株降解尿素的能力__________。与全营养培养基中的菌落相比，以尿素为唯一氮源的培养基中菌落数__________(填“多”或“少”)。解析：(1)欲筛选出能降解尿素的菌株，应选择以尿素为唯一氮源的培养基。实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌法(如接种环)、干热灭菌法(如培养皿)和高

6、压蒸汽灭菌法(如培养基)等。(2)整个实验过程需要在无菌条件下进行，故稀释土壤溶液要在酒精灯火焰附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。为了得到单菌落，需将土壤溶液进行一系列的梯度稀释，从而使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，进而能在培养基表面形成单菌落，以便于分离纯化菌种。(3)分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解产生了氨，氨使培养基的pH升高，使酚红指示剂变红。降解尿素能力越强的菌株，产生的氨越多，在菌落周围形成的红色环带越大。全营养培养基的营养全面，生长的菌落数多，而以尿素为唯一氮源的培养基中只有具备降解尿素能力的细菌才能生长，故以尿素为氮源的培养基中菌落数少。答案

7、：(1)尿素　高压蒸汽灭菌法、干热灭菌法　(2)酒精灯火焰　得到单菌落，避免土壤溶液中菌体浓度过高　(3)红色环带　氨　越强　少3．制备培养基方法：将蛋白胨、NaCl和牛肉膏放入烧杯内，加200mL蒸馏水，用玻璃棒搅匀后，在酒精灯上加热。当蛋白胨、牛肉膏融化后，加入琼脂，用微火继续加热至琼脂溶化，补充水至200mL。用0.1mol/L的NaOH溶液或0.1mol/L的HCl溶液将pH调至7.0～7.2，分别对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌。当培养基的温度下降到50℃时，将其分装在5套培养皿中，当培养基冷却至室温，按下表分别进行处理。将处理