中药赤芍与白芍的道地性研究-中药学专业毕业论文

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1、中药赤芍与白芍的道地性研究摘要赤芍和白芍是常用传统中药，其市场主流商品均来源于芍药Paeonia／acfiflora的干燥根部。赤芍为野生芍药的直接干燥品，主产于内蒙古、黑龙江、河北等地；白芍为药用栽培芍药的去皮水煮加工品，主产于浙江、安徽等省。为了探讨赤芍和白芍的道地性，本研究采用在本草考证、产地调查和实验研究相结合的方法，研究了同为芍药来源的赤、白芍之间，以及不同产地的赤芍或不同产地的白芍之间的遗传背景，化学成分的差异。f主要结果如下：(1)通遗对现有本草文献的收集、考证，可以看出芍药分解为赤芍和白芍是一个长期渐进的演化过程，大致经历了观点提出、应用发展、

2、理论完善和本草确立四个阶段。初步认为：赤芍与白芍在中医临床上的分别使用可能始自唐代；现今白芍药材生产通用的“去皮水煮”的加工技术，其产生应不晚于宋代。(2)采用随机扩增多态DNA(RAPD)技术，用21条随机引物对来自11个产地的43株有代表性的芍药样品进行RAPD扩增，并计算得出，芍药在物种水平上的多态位点比率为85．26％，基因多样度为O．166；其中野生群体(77．61％)高于药用栽培群体(54．96％)及观赏栽培群体(61．76％)。分子方差分析(AMOVA)表明，芍药群体间的遗传变异占总变异的2950％，基因分化系数为0．254；野生与药用群体之问遗

3、传距离最远(0．3632)，药用与观赏群体之间遗传距离最近(0．0973)，群体间遗传分化显著(RO．001)。在非加权配对算术平均法(uPGMA)构建的聚类图中，芍药种内大致分为野生与栽培两大类群。在野生群体中来自多伦的芍药单独聚为一类；在药用栽培群体中产于安徽亳州的与产于浙江磐安、缙云的芍药各聚为一类。(3)从芍药的13个野生产地和3个主要药用栽培基地取得代表性样品，用高效毛细管电泳法(HPCE)首次同时分离、测定了其中的4个活性成分：芍药甙、D一儿茶精、苯甲酸和没食子酸。结果：野生来源的芍药根(赤芍)中芍药苷的含量为6．4％一10．32％，D一几茶精的含

4、量为0．05％一0．21％，没食子酸的含量(除黄龙外)均小于0．05％或未检出。与之不同的是，药用栽培来源的芍药根中没有检测到D-儿茶精，芍药苷的含量为3．1％一6．0％，没食子酸的含量都大于0．07％。同样条件下，由药用栽培芍药加工而得的白芍中也未检测到D一儿茶精，芍药苷含量仅为1．73％一3．83％，没食子酸含量仍在0．056％一0．075％，苯甲酸只有0．009％一0．072％。另外，在不同产地的赤芍中，内蒙古多伦赤芍所含的芍药苷、D一儿茶精、苯甲酸和没食子酸均较高，而辽宁西丰产的赤芍中D-JL茶精和没食子酸的含量较多伦赤芍降低了50％以上，黑龙江黑河、

5、克山、桦南所产赤芍中则均未检测到没食子酸。对比同一产地加工前后的白芍中化学成分的变化，去皮水煮后，苯甲酸几乎消失，芍药苷与苯甲酸的含量比从36倍上升到165倍，没食子酸与苯甲酸的含量比也由0．72倍上升到7．25倍。从各组份间的比例关系还可以看出，不同产地、特别是道地(亳州、缙云、磐安)与非道地(黄龙)的白芍药材之间，化学成分有所不同。在道地产区，芍药苷含量是苯甲酸的165倍，没食子酸含量是苯甲酸的5．22倍；在非道地产区，前者只有52．84倍，后者仅为0．95倍。(4)利用傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)测定了来自18个产地的90份赤、白芍样品，对所获得的指

6、纹图谱进行特征峰指认和比对分析(compare)。结果：芍药野生品与栽培品之间存在明显区别，野生芍药根(赤芍)在1621CIII1、1448cm1、1317cm一、1051cm～、780cm、517cm。1有较强的吸收峰，而栽培芍药根除了在1626om一、1022cm。有较强的吸收峰外，在1155cm～、1079cm‘÷、930cm～、860om～、762cm～、577cml、517cnl1处也有明显的吸收峰。将栽培芍药根的加工品(白芍)与未加工品的红外光谱图进行比较，主要吸收峰的位置没有明显变化，仍在1626cm1、1155cm。。、1079cm1、1022

7、cm～、930cm～、860cm～、762cm1、577C11／1、517cm1处有较强的吸收峰，但某些吸收峰的相对强度有所改变，使得与未加工品相比，白芍与赤芍的整体谱图相似系数略有增加。从不同产地的赤芍药材的红外鉴定结果看，内蒙古多伦与辽宁的西丰、黑龙江的克山、黑河、桦南所产赤芍在1051cm1吸收峰的强度、形态上有较大差异。另外，在道地产区(亳州、缙云、磐安)与非道地产区(黄龙)所产白芍的红外谱图中，1022cm。处的强吸收峰峰形有明显区别，1626CI／I‘与l317cm“两个吸收峰的相对峰高比相差1倍以上。根据上述实验结果，可以得出以下的结论：(1)除

8、环境饰变外，遗传分化应当是同一物种来源