聚合betatsvp基因提高棉花耐盐性及共转化法获得基因聚合棉花的研究

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7、11ⅧIY1936271原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。论文作者签名:一室垂宝一日期:.型f:立=.至1关于学位论文使用授权的声明本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,

8、允许论文被查阅和借阅;本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名:至叠鱼导师签名:主亟亟兰圭日期:2QiI:曼:墨I山东人学硕十学位论文目录中文摘要.1Abstract4符号说明8第一章前言.91.1植物耐盐分子机制一91.2植物自身的耐盐调节111.2.1渗透保护物质的合成.121.2.2离子区隔化及平衡调节.121.2.3活性氧清除维持膜系统的完整性一131.2.4逆境诱导蛋白的生成.141.2

9、.5激素与信号转导系统..151.3甜菜碱合成相关的基因工程研究l61.3.1甜菜碱生物合成途径.161.3.26e纠基因工程研究进展..181.3.3甜菜碱的保护作用机制.191.3.3.1渗透调节作用201.3.3.2稳定和保护生物大分子的结构和功能201.3.3.3保护膜完整性211.3.3.4对光合系统的保护作用.211.3.3.5诱导特定基因的表达221.4H+.PPase相关基因工程的研究进展231.4.1液泡膜H十.PPase的分子结构与功能241.4.1.1H+.PPase的分子结构241.4.1.2H十.PPa

10、se的主要功能251.4.2液泡膜H+一PPase与植物抗逆性261.5肌醇磷脂信号系统相关研究.271.5.1肌醇磷酸信号系统简介271.5.2磷脂酰肌醇合成酶相关研究..30东人。≯硕{J学何沦文1.6转基因聚合的植物基因工程研究311.6.1实现基因聚合的策略和方法一311.6.2耐逆相关基因聚合的研究进展..341.7棉花基因工程研究现状361.8本工作的目的和意义36第二章聚合抛£4仿阡基因提高棉花耐盐性的研究382.1材料与方法3812.1.1实验材料..382.1.1.1植物材料382.1.1.2有性杂交获得转基因

11、聚合植株382.1.2聚合6比4/乃阡基因植株的PCR检测..382.1.3棉花RNA提取及RealtimeRT.PCR392.1.4聚合6P纠/乃牌基因棉花的耐盐性分析4l2.1.4.1棉花苗期盐胁迫处理412.1.5棉花叶片甜菜碱含量测定..422.1.6棉花液泡膜的分离及液泡膜ATPase和H+.PPase活性测定一422.1.7棉花叶片相对含水量的测定..432.1.8棉花叶片叶绿素含量的测定一432.1.9棉花叶片光合作用和叶绿素荧光参数的测定..432.1.10棉花叶片渗透势的测定442.1.11棉花叶片离子渗漏率和

12、丙二醛含量的测定442.1.12Na+、K+离子含量测定..442.1.13抗氧化酶活的测定442.2结果与分析45。'2.2.16P纠和乃阡转基因聚合棉花的获得452.2.2盐胁迫对棉花叶片甜菜碱含量的影响..472.2.3液泡膜H+.PPase和H+.ATPase酶活性变化.472.2.4盐胁迫处理对目的基因表达变化的影响.482.2.5盐胁迫对棉花叶片离子含量的影响.49Il』东大学硕十学何论文2.2.6盐胁迫对棉花叶片相对含水量和渗透势的影响.502.2.7盐胁迫对棉花叶片叶绿素含量的影响.5l2.2.8盐胁迫对棉花叶片

13、光合作用及叶绿素荧光参数的影响.522.2.9盐胁迫对棉花叶片膜损伤的影响..532.2.10盐胁迫对棉花叶片抗氧化酶活性影响.542.2.11盐胁迫对植株生物量的影响562.3讨论56第三章共转化法转基因聚合棉花的获得593.1材料与方法593.1.1实验材料。593.1.2转化植株的筛选与PCR检测593.1.2.1转化植株草甘膦除草剂的筛选593.1.2.2CTAB法微量提取棉花叶片基因组DNA603.1.3Southem杂交检测613.2结果与分析623.2.1转基因聚合棉花的除草剂筛选..623.2.2转基因聚合棉花的

14、PCR获得.633.2.3转基因聚合棉花soutllem杂交验证.643.3讨论.64第四章总结与展望65参考文献.67致{射..81攻读学位期间发表的学术论文目录.82咱棉花的研究中文摘要棉花是我国重要的经济作物,是一种较耐盐碱大田作物,同时也是改良利用盐碱地

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