分子生物的学常考大地的题目

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1、实用标准文案l真核基因组的基本结构特点？答：①有一定的染色体数目，体细胞一般为双倍体②远大于原核基因组，结构复杂，数目庞大③每个基因都由一个结构基因与相关的调控区组成，转录产物为单顺反子④含大量重复序列，非编码区占90%以上⑤真核基因是断裂基因，编码区被非编码区分隔开⑥功能相关的基因构成基因家族l什么是基因突变，基因突变的意义？答：1、指一个或者多个脱氧核糖核苷酸的结构、复制或表型功能的异常变化，即DNA损伤2、意义：突变与遗传的保守性是对立而又统一的自然现象①突变是进化、分化的分子基础②突变造成了基因多态性：如突变发生在蛋白

2、质的非功能区域上，氨基酸的改变不影响蛋白质功能③致死性突变④突变是某些疾病的发病基础l试述乳糖操纵子是如何根据环境条件调整表达状态的？答：①葡萄糖存在、乳糖不存在：此时无诱导剂存在，阻遏蛋白与DNA结合。而且由于葡萄糖存在，CAP也不能发挥正调控作用，基因处于关闭状态②葡萄糖和乳糖都不存在：在没有葡萄糖存在的情况下，CAP可发挥正调节作用，但没有诱导剂，阻遏蛋白的负调控作用使基因仍然处于关闭状态③葡萄糖和乳糖都存在：乳糖的存在对基因的转录起诱导作用。但由于葡萄糖的存在使细胞内cAMP水平降低,cAMP-CAP复合物不能形成，C

3、AP不能结合到CAP结合位点上，致使RNA聚合酶不能与基因结合，转录不能进行，基因仍处于关闭状态④葡萄糖不存在、乳糖存在：此时CAP可以发挥正调控作用，阻遏蛋白由于诱导剂的存在而失去负调控作用，基因被打开，启动转录l何谓PCR-RFLP和PCR-SSCP，简述两者的基本原理和操作过程，并简要讨论两种基因诊断技术的应用特点和各自的优缺点？答：1、PCR-RFLP：聚合酶链反应——限制性片段长度多态性。基本原理：一些突变发生在限制性核酸内切酶的识别位点上，如果用相关的限制性核酸内切酶切割基因组DNA，就产生长度不同的片段。操作过程

4、：①目的基因的扩增②扩增片段的酶切③酶切产物的电泳④多态性的确定。2、PCR-SSCP：聚合酶链反应——单链构象多态性。基本原理：单个或多个碱基突变可能影响单链核酸分子的构象，在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳时，不同构象的核酸分子常表现不同的迁移率，电泳新生条带的出现反映了突变分子的存在。操作过程：①目的基因的扩增②扩增片段的变性③变性基因片段的电泳④正常和异常电泳带的确认⑤DNA测序的证实。3、两者比较：①检测目的：突变、多态性②电泳样品：双链、单链③检测范围：限制性内切酶识别位点、扩增的DNA片段全长④扩增片段的要求：限制性酶切

5、位点、200~400bp之间⑤测序的难易：较为简单、较为复杂⑥DNA测序的依赖：不需要、需要l简述基因治疗的基本条件和过程？答：基本条件：①基因诊断明确②现行治疗方法无效或欠佳③相关基因克隆、载体的构建和基因转移等技术已相当成熟④较低的表达水平可以治疗疾病⑤基因转移有效性和安全性的确定。过程：①病例的选择②基因诊断③目的基因的获取、扩增④靶细胞的选择与分离⑤载体的选择与构建⑥目的基因与载体的连接⑦基因转移⑧疗效的观察与确定l简述重组DNA技术的基本步骤？答：①获取目的基因②克隆载体的选择③外源基因与载体的连接④重组DNA导入受

6、体菌⑤重组体的筛选⑥克隆基因的表达l简述核酸探针的概念和种类？答：1概念：能与特定核苷酸序列发生特异性互补杂交，杂交后又能被特殊方法检测的已知被标记的核苷酸序列。2种类：基因组探针、cDNA探针、RNA探针、寡核苷酸探针l细胞周期调节关卡？答：⑴G1-S关卡当G1早期，Rb蛋白未磷酸化时，与E2F结合构成复合物抑制E2F的转录活性激酶由ATP提供磷酸基，使Rb磷酸化，与E2F解离。E2F影响结构基因的转录表达，其影响作用表现为①使cyclingE表达增加②DNA聚合酶表达增加③DNA修复酶表达④DNA合成原料相关酶的表达因此，

7、细胞周期从G1期进入S期要看E2F是否解离，解离才能从G1期进入S期。P21对cyclinD-CDK4/6，cyclinE-CDK2有抑制作用，阻止E2F解离表达为抑癌状态；Ras则促进上述复合体的活性，促进E2F解离，使细胞周期从G1期转化到S期，表达为无抑癌状态⑵S期关卡①短暂，没有“维持成分”②DNA损伤后仍需要合成染色体以提供同源重组有效修复的模板③长期s期停滞可能使已经启动的复制起点再次获得复制能力④ATM-Chk2-CDC25A-CDK2-CDC45是短暂的s期反应的关键机制⑶G2-M期转折①CDK1-Cyclin

8、B1/B2参与和完成有丝分裂⑷M期纺锤体组装关卡①有丝分裂纺锤体组装不完全，就会防止APC多泛素化系统的激活，导致细胞分裂后期停滞②有丝分裂纺锤体关卡与MPF活性调节相关。l凋亡细胞的基本特征？答：⑴形态学特点：①正常细胞群中单个细胞死亡②胞浆空泡出现，膜发泡，空泡排出③伴随