雌激素对脂联素调控人成骨细胞分化及opgrankl表达的影响

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1、I＼I叭Y帆1m9舢1Ⅲ眦8㈣0叭011112眦原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：日期：丝f!年卫月丛日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以

2、采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。作者签名：导师签名：!旌竺三!日期：生让月丛日l／7博士学位论文中文摘要摘要第一部分中国女性血注slEl／粥'JIEI联素、瘦素水平与骨密度及骨转换生化指标的关系目的：作为脂肪组织分泌的主要循环肽，脂联素和瘦素对骨代谢有着重要的影响，但它们与女性骨密度(BMD)的关系仍不太明确。本部分研究就女性血清脂联素、瘦素水平与BMD及骨转换生化指标的关系进行探讨。方法：用ELISA测定265例绝经前、336例绝经后中国长沙地区健康成年女性血清脂联

3、素、瘦素、血清骨特异性碱性磷酸酶(BAP)和血清I型胶原交联氨基末端肽(MD()等生化指标；用双能X射线吸收测定法(DXA)测定全身、腰椎L2一L4、总髋骨、总前臂的BMD以及脂重和瘦重；指标间的相关性采用Pearson’S相关分析和偏相关分析，并用多元线性回归模型分析哪些指标可作为BMD的独立预测因子。结果：多元线性回归分析表明，在绝经后的中国女性，绝经年限、瘦重、雌二醇(E2)和脂联素均为BMD的独立预测因子(氏O．05或P<0．01)，而脂重和瘦素则均不是BMD的独立预测因子；但在绝经前的中国女性，脂联素与脂重和瘦素一样，也不是BMD的独立预测因子。Pearson’S相关分析

4、表明，在绝经后中国女性，脂联素与血清BAP、血清NTX及NTX／BAP比值呈显著正相关(均为P<0．05)，且中文摘要这种相关性经校正年龄和脂重后依然显著(均为P

5、的作用。本部分研究对雌激素(雌二醇，E2)在脂联素促人成骨细胞(HOB)分化中的影响进行探讨。方法：HOB用仅．最小必需培养基(仅．MEM)、含lO舭脂联素的a．MeM或含10嵋／IIlL脂联素与10‘1010‘sME21拘a．MEM分别培养48小时，观察E2不同剂量对脂联素诱导成骨细胞分化的影响；用含lO嵋／mL脂联素的0【．MEM或含10鸺／InL脂联素与10罐ME2的a-MEM分别培养12-48d、时以观察E2不同作用时间对脂联素诱导成骨细胞分化的影响；另外，在含1099／mL)]旨联素与10。8ME2的培养液中分别添加10ng／mLp38激酶激动剂或1O{M雌激素受体拮抗剂

6、后，将细胞培养48小时，以观察E2对脂联素诱导成骨细胞分化的影响是否被p38激酶激动剂和雌激素受体拮抗剂阻断；分别用洳磷酸奈酚法检测成骨细胞ALP、用放射免疫测定法(RIA)澳J定骨钙素(OC)、用WesternBlot检澳]p38和P—p38。结果：脂联素促进成骨细胞ALP活性、OC分泌和p38激酶磷酸化，E2则抑制成骨细胞ALP活性、OC分泌(均为P<0．01)和p38激酶磷酸化；E2与脂联素联合干预时，ALP活性、OC分泌均随E2浓度升高而降低(均为P<0．01)，p38激酶磷酸化水平也随E2浓度升高而下降；而且，联合干预的时间越长，成骨细胞ALP活性与分OCIII中文摘要动

7、剂或雌分泌量均(尺O．01)抑制了脂IV博士学位论文中文摘要第三部分E2对脂联素调控人成骨细胞OPG和RANKL表达的影响目的：探讨E2对脂联素调控HOB护骨素(OPG)与核因子心受体活化因子配体(RANKL)表达的影响。方法：HOB用a-MEM、含lOpg／mL脂联素或含10“g,'mL脂联素与10。010。8ME2的a．MEM分别培养48小时，观察E2不同的剂量对脂联素调控成骨细胞OPG和RANKL表达的影响；用含1099／mL脂联素与10。8ME2的a．MEM分