[讨论]内标法与外标法的应用

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1、［讨论标法与外标法的应用内标法：选择适当的物质作为内标物质，定量加入被测样品屮，跟据被测纽分和内标物质的峰面积之比，乘以校正因子，对映内标物质加入量所进行含量测定方法。内标法的优点：色谱条件对结果影响不大，准确度、精度较高；缺点：选择合适的内标物质比教困难。外标法：又称标准曲线法，依照测W:标准品所绘制的曲线来计憧被测样品的含W:的方法。外标法的优点：简单，适和大量样品分析。缺点：每次色谱条件很难相同，容易出现误差。请问大家在做含量测定时依照什么原则來选定方法的？我们一般作体外药物分析时均采用外标法，体内药物分析，因提取步

2、骤烦琐，都采用内标法进行校正，但如果仪器稳定、方法的重现性好，也可使用外标法，国外体A药物分析用外标法的也有不少，但本人认为最好使用内标法。实际样品检测用外标法的更多。原因：1.内标物难获得，特别是同位素标记的有相近行为的内标物；2.操作步骤多、计算烦琐如在新药报批中使用内标物，则需报送内标物的结构确证资料，在报生产的同时还要报送此内标物对照品。所以现在连SDA的专家都不推荐使用内标法。最初使用内标是因为进样器进样不准确，采用内标可以校正进样误差。现在的HPLC用定W:环进样准确度很尚，加了内标有时候因为操作的误差反而降低

3、准确度。在药物质U检验屮,如果是原料药，或者制剂的成份不很多，用外标法即可，不一定非要用内标法，而且现在越来越多的标准都放弃了用内标法。对于体内药物分析，分析方法的误差反而不是那么的重要，而在样品处理的过程中引入的误差要引起足够的重视，所以，一般在处理过程中加入内标以校正误差。这个时候，回收率的高低又不是绝对的要求很高，虽然要求绝对回收率在70%或者80%以上，但是，有时候低一些也无所谓，关键是回收率的稳定性，测定的重现性。欢迎行家指点：）却是如此，我刚刚做完体A药物分析，A标法却是比较麻烦个人认为体内分析应该用内标法，否

4、则结果不准确。但药典中一些原料药和制剂用的还是内标法一般A标法能够消除进样量不准造成的系统误差，在采用自动进样器的前提下，这两种方法的精密度差别并不大。但是，建立内标法色谱条件明显要麻烦些，所以在采用自动进样器的仪器上，尽可以采用外标法进行测定。药典中采用内标法进行测定的往往是一些老的品种，现在一般的趋势是采用外标法测定。实际上，A标法屮需要对两个色谱峰进行积分同样也会引起误差增大的体内药物分析，特别是需要提取步骤的，加入内标可消除提取过程带来的偶然误差，内标-定要在提取前加入到样品中并要混合均匀后再加入提収液，如此操作使

5、提取的系统误差大大降低。内标物的结构及化学性质一记要与目的物相似很同意inferno的观点，内标法与外标法各有千秋，我正在做体内成分的测定，因内标物与代测成分是在是分不开,再加上我的样品处理方法比较简单，所以就采用了外标标准曲线法。我支持啊我支持啊我支持啊我支持啊我支持啊我支持啊我支持啊我支持啊我支持啊我支持啊我支持啊我支持啊我支持啊我支持啊我支持啊我支持啊我支持啊我支持啊我支持啊我支持啊我支持啊我支持啊我支持啊我支持啊我支持很爻用〜*谢谢！！！！各位老师，外标法耑要注意什么啊P、J标有它的优点，可寻找合适的内标物比较困难

6、，特别是在没有已有文献时，能不用内标就不用内标，尽量先优化制样方法。总结的很好，我主要川液相做西药的含量测定，都是用外标法，操作很简单，容易。去年还做了一个人体生物等效性试验，用液-质联用法，内标法。试验中发现内标和外标的不同情况应用，感觉当仪器响应变化很大时，必须选用內标法，否则测定就没有意义了。我谈谈我的看法：内标法是以前针对仪器的不稳定和进样的误差较大而设定的，其在克服仪器，环境因素方面有独到之处，但对于找到合适内标物仍是较大难题.这不用我多说.但对于现在仪器条件，有时内标不如外标，我从方法准确方而谈谈我的看法.在用

7、外标法做含量测定时，药典采用多种限制条件来控制方法误差，如系统适应性，控制供试与对照浓度的差异范围等.系统适应性用来判定仪器能否达到稳定要求，一半waters和agllent的连续进样误差在1%以内，自动进样就更不川说了.达到要求时，其仪器部件特别是件测器表明已稳定，可以进样.通过控制供试与对照浓度的差异范围是通过减少祕准曲线不完全过圆点造成的方法误差.1.一般外标法的步骤为对照供试各2份，每份2针，取平均计算.其误差为（4*0.2%（称量）+4*0.2%（稀释）+2%（仪器）*4）/2=4.8%.内标法为两份各一针，其误

8、差为2*0.2%（称量）+2*0.2%（—次稀释）+0.2%（转移）+0.2%（二次稀释）+2*2%（仪器）=5.2%，如果仪器误差很小或在1%以内时，可以看出内f小对外标的相对误差要大.内相对外标还有一次内标物的转移和稀释所多造成的人为误差，且无法通过重复取平均来消除.其•人为因素影响么较大成分.在仪