免疫学检验感染性疾病甲肝、乙肝的临床研究

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1、免疫学检验感染性疾病甲肝、乙肝的临床研究徐启芹（江苏省宝应县妇幼保健院检验科225800）【摘要】免疫学检验是依据免疫学原理，检测超微量，只有特异性的各种生理和病理的免疫学指标，在临床疾病诊断、检测及预后评估均具有重要的临床意义。近年来随着免疫技术革新与发展，新的敏感性标记物、示踪物等出现，对检测超微量、特异性及敏感的抗原与抗体提供了新的方法。尤其是目前利用抗原与抗体反应原理检测感染性疾病甲型肝炎肝和乙型肝炎中得到广泛应用。【关键词】免疫学甲型肝炎肝乙型肝炎甲型肝炎（甲肝）和乙型肝炎（乙肝）是常见的感染性疾

2、病。尤其乙型肝炎是一种严重危害人类健康的世界性传染病，部分患者可由急性乙型肝炎转变为慢性、迁延性乙型肝炎，甚至发展为肝硬化或肝癌，其危害程度远远高于甲型肝炎等其他肝炎。而目前免疫学方法被广泛利用于检测甲型肝炎肝病毒和乙型肝炎病毒。木文就利用免疫学方法检测甲肝病毒和乙肝病毒的原理及进展作如下分析。1免疫学检验的方法综述自1798年jenner发现了牛痘接种法以来，免疫学作为一门自然科学，从最初依附于微生物，逐渐发展成为一门独立的学科。直到20世纪80年代，伴随杂交瘤技术和基因重组技术的创立，现代免疫学的研究方

3、法也从细胞生物学、遗传学深入到蛋白质分子结构和基因调控水平。因此免疫学理论及新的免疫学实验技术也得到空前发展和更新。而且免疫技术及免疫测定仪器朝着智能化、精密度及特异性化发展。如金标免疫层析检测技术、电化学发光检测技术、生物免疫芯片技术及流失细胞等全新的免疫检测技术得到长足发展［1］。同时免疫检测项目也趋向多样化、个性化、自动化及相关的配套处理系统化发展。免疫学检验技术得到飞速发展，检验人员也在不断地学习充实新的临床免疫学知识，为新的检测项目基木原理，熟练地掌握各种免疫新技术，才能提高检测结果，临床人员才能

4、准确判断分析。2甲肝病毒及免疫学检测2.1甲肝病毒特性甲型肝炎病毒(HAV),HAV属RNA病毒科中的嗜肝RNA病毒属，该属仅存HAV—个种，其外形呈球形，直径27-32nm，无包膜，由32个亚单位结构组成20面对称体颗粒。电镜下可见实心和空心两种颗粒，实心颗粒为完整的HAV，具奋传染性；空心颗粒则为未成熟的不含RNA的颗粒，虽具有抗原性，但无传染性。HAV基因组为单股线状RNA，全长由7478个核苷酸组成。HAV对外界抵抗力较强，耐酸碱，室温下可生存1周，干粪中25°C能生存30天。HAV主要由粪-U途径

5、传播［2］。2.2甲肝病毒检查及临床应用病原学检查对于诊断急性甲型肝炎病毒感染十分重要。其病原学检查包括：①抗HAV-IgM：HAV感染后早期就可产生IgM型抗体，是验证新近感染的指标，也是早期诊断甲型肝炎的血清学可靠标志。一般在发病后数天即可持续8-12周，也冇少部分可延续6个月。临床检验技术多选用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测；②抗HAV&ndashJgG则感染后出现稍晚，于2-3个月达到高峰，是既往感染的标志，可持续多年或伴随患者终身。③检测方法除ELISA还冇免疫电镜观察和鉴定HAV颗粒、体外细

6、胞培养分离病毒及检测HAV-RNA等。2.3免疫学检验1973年由Feinstone等应用免疫电镜方法第一次特异性检测HAV感染病患者的病毒颗粒。由于局限性这项技术虽然成功在甲肝急性感染期检测，但是还不能应用在临床HAV感染的常规检测。在1975年，利用固相放射免疫检验技术(RIA)检测到HAV抗原的方法用于检测抗HAV抗体。但在1978年，雅培公司采用竞争性结合实验(HAVAB)提高了抗HAV抗体检测的灵敏度。1980年，雅培公司开发出可直接检测抗HAV-IgM的RIA方法(HAVAB-M),就是0前最为

7、常用的IgM抗体检测方法一一捕获法，即以抗人IgM抗体(抗人μ链)作为固相抗体，当加入血清标本吋，其中的IgM类抗体(特异的和非特异的)即可被固相抗体捕获，再加入特异抗原，艽与固相上捕获的IgM抗体结合后，加入酶标抗特异抗原的抗体，最后加入底物显色。随着抗HAVIgM检测方法的进步和提高，抗HAVIgM检测越来越多地在肝炎症状出现早期的被用于检测。3乙肝病毒及免疫学检测3.1乙肝病毒特性乙型肝炎病毒(HBV)是嗜肝DNA病毒科正嗜肝DNA病毒属。HBV对外界环境抵抗力强，尤其对热、低温、干燥、紫外线及

8、一般浓度的消毒剂均具有耐受性。但在65°C/10h、100°C/10min或高压蒸汽消毒均可让HBV火活。在消毒杀菌吋对含氯制剂、环氧乙烷、戊二醛、过氧乙酸和碘伏等敏感，可冇效火活。其传播途径主要经血和血制品、母婴、破损的皮肤和黏膜及性接触等途径传播。3.2乙肝病毒检查及临床应用［3］在诊断乙型肝炎时与HBV检测奋关的标志物有：HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc总抗体、抗HBc-IgM和H